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Nipradilol对视网膜神经节细胞保护作用的研究

目的:建立成熟视网膜神经节细胞的三维培养模型。方法:将边长500μm的方形网膜片神经纤维层向下浸入12孔培养板的胶原溶液层中,胶原溶液凝固后,培养孔内加入无血清MEM培养液。相差显微镜观察生长情况。应用羊抗鼠FITC-Thy-1.1单克隆抗体鉴定培养的神经节细胞突起。结果:视网膜神经节细胞突起在凝胶中呈螺旋迂曲生长,可存活两周以上。免疫组化荧光显色神经节细胞突起呈阳性反应。结论:应用凝胶做支持物对成熟视网膜神经节细胞进行三维原代培养,是一种成功的,可广泛应用的培养方法。  (本文共70页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

骨髓间充质干细胞向视网膜神经节样细胞分化中蛋白质表达差异及电生理特性的研究

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是骨髓中除造血干细胞以外的另一类干细胞,具有多向分化潜能。在眼科领域,在体内外可将BMSCs诱导成视网膜光感受器样细胞。发育神经学的研究证实视网膜的发育具有时相性。BMSCs向视网膜光感受器样细胞的诱导成功使BMSCs向视网膜神经节细胞的诱导成为可能,为本文提供了理论依据。本研究采用Percoll分离液体外分离法,体外培养出能稳定传代的大鼠BMSCs。并在Transwell双层培养体系下,利用乳鼠视网膜细胞诱导BMSCs,诱导后细胞经免疫组化及RT-PCR、免疫荧光鉴定,NF、nestin、β-III Tubulin、Thy1.1表达阳性,证实了诱导后细胞为视网膜神经节样细胞。本文采用SELDI蛋白芯片技术检测了BMSCs、诱导后的视网膜神经节样细胞及原代培养的视网膜神经节细胞(RGCs)的蛋白质谱。结果显示:与BMSCs质谱相比,诱导后的视网膜神经节样细胞质谱有16个标志分子增高,其中有11个标志...  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

《眼科新进展》2009年02期
眼科新进展

骨髓间充质干细胞向视网膜神经节样细胞的诱导分化

视网膜变性疾病在发病机制上各异,多种视网膜疾病如视网膜缺血、缺氧[1]、青光眼[2]、糖尿病视网膜病变[3-4]、视网膜变性等[5]均可引起视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)损伤,最终都发生不可逆的视网膜神经细胞损伤及功能丧失,成为低视力和致盲的主要病因。因此,挽救和替代变性的RGCs、促进RGCs功能恢复是临床治疗的关键。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有跨胚层发育成神经元的潜能,如果在体外能定向诱导BMSCs分化成RGCs,不仅具有重大理论意义,还将会在临床上为难度较大的视网膜疾病的治疗带来希望。本实验拟用视网膜条件分化液诱导BMSCs成为视网膜神经节样细胞,从而寻找一种合适的细胞来源进行移植以替代受损的RGCs。1材料与方法1.1动物与主要试剂Wistar大鼠,雌性,体质量150~200g,SD乳鼠由吉林大学实验动物中心提供。二...  (本文共4页) 阅读全文>>

《吉林大学学报(医学版)》2011年05期
吉林大学学报(医学版)

骨髓间充质干细胞向视网膜神经节样细胞分化过程中的电生理特性

骨髓间充质干细胞(bone marrowmesenchymal cells,BMSCs)是存在于骨髓中不同于造血干细胞的另一种干细胞,其体外培养和视网膜下移植技术研究已取得很大进展,移植到视网膜下的BMSCs能分布于视网膜各层,细胞形态以及表面标志都与其周围的视网膜细胞相似[1],但移植后的细胞能否发挥正常神经生理功能,特别是神经元的电生理特征及调控因素,对BMSCs视网膜下移植研究的进一步发展具有重要意义。BMSCs的离子通道特性国外已有少量报道,但其诱导后细胞的电生理特性至今尚无相关研究。本研究利用膜片钳技术,比较体外培养的BMSCs、诱导后的视网膜神经节样细胞及原代培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的离子通道特性,为BMSCs的体外诱导及移植提供生理学依据。1材料与方法1·1 BMSCs细胞培养及鉴定出生8 d的Wistar乳鼠(吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供)过量麻醉处...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国生物制品学杂志》2010年02期
中国生物制品学杂志

骨髓间充质干细胞向视网膜神经节样细胞的分化

骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是位于骨髓间充质区域的一种间充质干细胞,具有多向分化潜能。体内外实验证明,BMSCs能够分化为间充质系细胞,如成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞[1~3]。研究表明,BMSCs在脑及胰腺的损伤修复中有重要价值[4,5],并可降低小鼠胸腺瘤的成瘤率[6]。1999年,Kopen等[7]发现,BMSCs能够分化为神经元,从而揭示了BMSCs具有跨胚层分化-神经外胚层分化的能力,为各种神经退行性病变的治疗提供了新的途径。近年来有实验发现,BMSCs能够分化并表达视网膜色素上皮细胞特异标志物[8],有望应用于眼科的治疗。本研究旨在观察乳鼠视网膜细胞条件分化液诱导BMSCs向神经节样细胞分化的情况,以期为视网膜退行性疾病提供治疗方案。1.材料与方法1.1实验动物清洁级Wistar大鼠乳鼠,7日龄,体重(10±1)g,由吉林大学动物中心提供。1.2主...  (本文共4页) 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

成纤维细胞直接转分化为神经元和视网膜神经节样细胞的研究

再生医学的首要目的是生成可以替代受损组织的细胞,在这方面有诸多非常具有创新性的研究。2006年诱导多能干细胞的成功生成是细胞生物学以及再生医学领域里程碑式的进步,为再生医学研究清除了多年来面临的伦理障碍。最近的研究在此基础上,成功实现了一个更加大胆的理念,即一种分化成熟的细胞直接转分化为另外一种分化成熟的细胞。比如易于取材的皮肤成纤维细胞,已经成功转分化为心肌细胞,肝脏细胞,神经元等。这些转分化所得的细胞可以回植入机体,实现患者个体化细胞替代疗法,避免排斥反应。本研究拟采用非基因组整合性的腺病毒,实现皮肤成纤维细胞向神经元及视网膜神经节样细胞的转分化。第一部分利用腺病毒将小鼠成纤维细胞直接转分化为神经元中文摘要目的:利用腺病毒作为载体,过表达神经元相关转录因子,使小鼠胚胎成纤维细胞和成年成纤维细胞直接转分化为具有功能的神经元。方法:神经元相关转录因子Ascl1,Brn2,Mytl1和Ngn2分别被构建入pAd/CMV/V5-DE...  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>