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人骨肉瘤相关蛋白质组分析及癌基因、抑癌基因、凋亡相关基因表达差异的基因芯片研究

骨肉瘤(Osteosarcoma,OSA)是最常见的骨组织原发恶性肿瘤,好发于儿童及青少年。其临床生物学特征为肿瘤恶性程度极高,生长迅速,早期发生转移。传统治疗方法(手术切除或截肢加辅助化疗)5年存活率仅为20%—50%。近年来,由于化疗药物的发展、及时诊断和严格按照外科分期选择手术,疗效有所提高,但总体治疗结果仍不理想,尤其是伴有远处转移者。骨肉瘤的治疗一直是临床研究的重点与难点,对骨肉瘤进行早期诊断,寻找特异、高效、副作用小的治疗手段即成为骨科领域亟待解决的重要课题。因此,在基因和蛋白质水平了解骨肉瘤的发生、发展具有极其重要意义。近年来对相关癌基因(ras,myc,fos,bcl-2,met等)和抑癌基因(Rb、P53、P21等)进行了结构分析和蛋白表达研究,发现骨肉瘤可出现多个基因的异常,不同患者间基因的异常存在差别。得出了骨肉瘤细胞普遍存在染色体、癌基因和抑癌基因的异常,骨肉瘤的发生与多种癌基因和抑癌基因变异有关的结论。  (本文共141页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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低频低能量脉冲电磁场照射辅助化学疗法的研究以及对骨肉瘤细胞株转移的影响

[目的]探讨在PEMF刺激作用下抗癌药物对血管内皮细胞的影响。[方法] 细胞在37℃,5%CO2, 95%空气,饱和湿度的条件下,利用添加了10% FBS 和1% Penicillin –Streptomycin 的RPMI1640 培养液培养于25cm2 flask 中,观察细胞生长状态,当细胞达到对数生长期,大约为90% confluent时,用0.25%胰蛋白酶进行消化处理成单细胞悬浊液,用trypan blue法计数后调整细胞浓度为1.5×104 cells /ml,然后将上述浓度的细胞200μl/well移种到96-well microplate中,并且按照培养液中是否含有VEGF(15ng/ml)并分成2大组培养,48小时后更换含有下列6个浓度0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5μg/ml Doxorubicin and Cisplatinum的培养液,然后PEMF200Hz, 100μsec, 50 Gaus...  (本文共83页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
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阿霉素联合微波诱导成骨肉瘤细胞凋亡分子机制的初步研究

目前治疗骨肿瘤仍以手术综合治疗为主,化学药物治疗、放射治疗、介入治疗、免疫治疗等治疗手段为辅。辅助化疗提高了骨肿瘤五年生存率和保肢率,但是绝大多数情况下对于实质性骨肿瘤的单纯化疗不能完全解决问题。热疗技术的发展使得肢体的保肢率大大提高,其中为代表的主要是微波热疗技术。大量研究证明,热疗合并化疗,有明显的互补和增效作用,将在肿瘤的综合治疗中发挥巨大作用。成骨肉瘤是常见恶性骨肿瘤,其病死率较高。临床使用阿霉素和微波热疗治疗的手术综合疗法取得理想效果,但是对其具体的作用机制还有待深入研究。为深入理解微波和阿霉素治疗成骨肉瘤的分子机制,我们通过DNA laddering分析,流式细胞术以及软琼脂集落形成实验分别检测了阿霉素处理、微波处理、两种联合作用下对人成骨肉瘤细胞系凋亡的作用,通过实验我们发现这三种处理方法均会导致细胞引起凋亡,而且均具有时间依赖性和浓度依赖性。但是三种措施对其凋亡的诱导结果有差异,其中联合使用最强,微波次之,药物较...  (本文共120页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
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靶向表达长dsRNA诱导骨肉瘤细胞凋亡

骨肉瘤是高发于青少年的最常见原发性骨肿瘤,其恶性程度高,预后差。虽然随着化疗放疗等辅助治疗手段发展迅速,5年生存率有了大幅度提高,但是肿瘤转移、复发等问题仍然没有得到解决,目前多数学者已将彻底治愈骨肉瘤的希望寄予基因治疗。有报道表明使用人骨钙素启动子和人端粒酶逆转录酶(humantelomerase everse transcriptase,hTERT)启动子靶向表达前药转换酶如单纯疱疹病毒胸苷激酶表达治疗骨肉瘤可获得满意效果。然而骨钙素启动子在肝、脑和肺组织也有低水平活性,同时hTERT启动子在干细胞、生殖细胞和激活的淋巴细胞均有活性,提示单独使用骨钙素启动子或者hTERT启动子引导治疗基因表达治疗骨肉瘤都存在对正常组织的毒副作用。此外其他的肿瘤基因治疗策略常需表达功能蛋白或功能RNA发挥作用,也不能避免毒副作用的发生,因此建立安全、有效的新型基因治疗策略成为肿瘤基因治疗研究的热点和重点之一。本课题以骨肉瘤为例,根据长双链RN...  (本文共109页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
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Survivin基因在骨肉瘤中表达效应与干预治疗的实验研究

目的1.明确细胞凋亡抑制基因survivin及其相关因子caspase-3、细胞周期蛋白D_1(cyclin D_1)在人骨肉瘤组织中的表达状态,探讨其与骨肉瘤恶性生物学行为的关系。2.观测反义寡核苷酸(ASODN)体外封闭人骨肉瘤细胞survivin基因表达、诱导细胞凋亡效应及其对化疗药物顺铂(DDP)的增效作用。3.探讨反义核酸技术与传统化疗联合应用,干预裸鼠荷骨肉瘤生长的综合治疗途径。方法1.采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记技术(TUNEL法)检测38例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织中survivin mRNA表达及骨肉瘤组织caspase-3、cyclin D_1蛋白表达状态和细胞凋亡情况;比较分析骨肉瘤中survivin mRNA表达与各因子表达的关系及其意义。2.设计合成特异性靶向survivin的ASODN,以脂质体为载体,按不同浓度和时间对人骨肉瘤OS-732细胞进行转染,并设空白、正义...  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
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PTEN、Fas、TRAIL介导的骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

前言骨肉瘤是最常见的恶性骨肿瘤,恶性程度高,易早期肺转移,预后差。骨肉瘤对化疗不敏感,单一用药常难见效,目前尽管采用多种抗肿瘤药物联合应用,预后依然很差,而且化疗药的毒副作用和耐受性也是严重的缺陷。近年来从研究基因改变和凋亡信号传导异常的肿瘤发生机制入手,发现通过促进PTEN、Fas、TRAIL介导的凋亡可杀灭多种肿瘤细胞,并应用于某些肿瘤的化疗中取得了令人振奋的科研成果。在骨肉瘤领域开展此方面的研究将对骨肉瘤的化疗方案的选择提供新的理论依据,并具有重要的临床应用价值。PTEN基因是继P53基因后发现的与多种肿瘤凋亡异常相关的抑癌基因。肿瘤组织中PTEN的低表达常使PTEN介导的凋亡减弱,导致肿瘤无限生长。研究表明,PTEN在多种恶性组织中表达下降,但PTEN在人的骨肉瘤组织是否有表达减低尚未见报道。Fas是一种表达在细胞表面的死亡受体,Fas在多种恶性肿瘤中表达减低,使Fas介导的凋亡受到抑制。因此如何提升肿瘤细胞Fas的表达...  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>