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鲍鱼养殖水系中霍乱弧菌基因水平转移的初步研究

霍乱毒素基因(cholera toxin gene,ctxAB)可以通过溶源性丝状噬菌体(CTXφ)发生水平转移,因此,基因水平转移在霍乱弧菌(Vibrio cholerae,VC)的进化中有着举足轻重的作用。随着致病性VC也是水系中常在菌观念的确立,环境因素对ctxAB基因转移的影响成为人们研究的热点。故本研究在初步调查致病性VC携带溶源性噬菌体的基础上,建立了追踪致病基因的原位PCR—流式细胞仪(in situ PCR—flow cytometry,ISPCR—FCM)分析法。并在鲍鱼养殖水系中,运用该方法进行了VC基因水平转移的初步研究。以丝裂霉素C为诱导剂,调查了VC携带溶源性噬菌体的情况。结果表明在丝裂霉素C诱导作用下,约18.75%(3/16)菌株产生携带ctxAB基因的丝状噬菌体CTXφ;一株O139群霍乱弧菌分泌出一种单条型丝状噬菌体,其性质不详;未检测出可以转移毒素共协调菌毛(toxin-coregulated  (本文共66页) 本文目录 | 阅读全文>>

第一军医大学
第一军医大学

霍乱弧菌检测芯片的研制

霍乱弧菌是霍乱的病原菌。霍乱可以引起爆发、流行、大流行,严重危害人民健康,甚至社会安定。霍乱在南亚地区流行了至少上千年。自1817年以来,霍乱发生过七次世界大流行。历史上霍乱的七次大流行的病原菌,前6次是古典型霍乱弧菌,第七次是埃尔托型霍乱弧菌。1992年10月,一种被称为O139型的新型霍乱弧菌首次袭击印度大陆,引发了典型的霍乱爆发。一些专家指出,O139型霍乱弧菌很可能会引起第八次世界性霍乱大流行。霍乱弧菌快速准确的检测,对于自然流行的监测与预防,具有重要意义。20世纪90年代新出现和发展起来的基因芯片技术,是近年来在生命科学领域内兴起的一项高新技术。而用基因芯片检测霍乱弧菌的方法,迄今为止,世界范围内均末见公开报道。为了成功地研制一块应用型的霍乱弧菌基因检测芯片,以λ噬菌体全基因组DNA模拟病原体霍乱弧菌的一个靶区域,试验性地对霍乱弧菌检测芯片探针的制备方法、样品的标记方法和芯片的杂交条件等进行了探索和优化。通过多种方法的...  (本文共129页) 本文目录 | 阅读全文>>

重庆医科大学
重庆医科大学

O1群小川型霍乱弧菌单克隆抗体的制备应用及其识别表位模拟肽的筛选鉴定

霍乱(cholera)是由霍乱弧菌引起的烈性肠道传染病,该病起病急、传播快、涉及范围广,可引起爆发流行,属国际检疫传染病,在我国被列为甲类传染病之一,从有记载开始霍乱已引起七次世界范围大流行,时时威胁着人类健康。霍乱弧菌血清群超过200个,但只有O1群及O139群引起霍乱大流行。O1群霍乱弧菌分为稻叶、小川和彦岛(少见)三种血清型,O139群不再分型。各型弧菌产生类似的肠毒素,临床表现也较为相似。目前对霍乱爆发的应答是以组织良好的紧急应答形式作出反应,虽然能防止许多死亡,但不能预防霍乱疫情的发生;每一次霍乱流行都会有一个特定的优势株,且流行趋势不断变化。因此,建立有效的快速反应机制和应对策略具有重要意义。霍乱的快速检验平台的建立有利于霍乱流行的监测与预防,通过针对霍乱弧菌的特异性单抗开发的胶体金试纸条,可快速、简便、准确地检测霍乱弧菌,无需特殊的仪器设备,适于现场和基层使用。疫苗则是从根本上消除霍乱威胁的最为有效手段,中期和长期...  (本文共147页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国卫生检验杂志》2018年02期
中国卫生检验杂志

霍乱弧菌基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术谱库的构建

霍乱弧菌(Vibrio cholerae)是引起霍乱的病原菌,属于弧菌科弧菌属。霍乱弧菌现有210多个血清群,现已证明O1血清群和O139血清群霍乱弧菌产毒株可引起霍乱流行,而O1血清群和O139血清群霍乱弧菌非产毒株及其他血清群霍乱弧菌亦可引起散发病例或导致小规模暴发。霍乱弧菌经口进入人的胃肠道,在小肠定居并分泌肠毒素,引起肠液的大量分泌,导致剧烈腹泻、呕吐、极度脱水和电解质紊乱,严重者引发代谢性酸中毒及循环衰竭等,有较高的病死率,在卫生部印发的《人间传染的病原微生物名录》中被列为危害程度为第二类的病原微生物,也是我国传染病防治法规定的2种甲类传染病之一,是当今3种国际检疫传染病中的一种[1]。霍乱弧菌的鉴定目前以传统的细菌形态学及生化方法为主,有时辅以核酸检测。生化实验包含手工生化试验、API及细菌生化鉴定仪等,但这些方法检测时间都较长,操作复杂,而且对细菌的生长状态要求高,难以满足实际检测工作需要,因此,如果能够找到更加快...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国兽医杂志》2018年04期
中国兽医杂志

北京港口水产品中非O1/O139群霍乱弧菌MLST分型研究

霍乱弧菌为革兰阴性菌,是人类霍乱病的病原体。根据霍乱弧菌O抗原的不同,可分为210多种血清型,过去O1和O139型被认为是引起霍乱流行的主要血清型[1],所以在检验霍乱弧菌时,常常检验此2种血清型,但随着研究的深入,人们发现非O1/O139群霍乱弧菌也会导致疾病[2]。非O1/O139群霍乱弧菌是指除O1群霍乱弧菌和O139群霍乱弧菌以外的霍乱弧菌[3],是一种全世界都有分布的水生性细菌,广泛存在于自然界的水体中,常常在水体或水产品中检出。近年来,越来越多的研究表明,散发或局部暴发的腹泻是由非O1/O139群霍乱弧菌引起的,此类菌群引起了细菌学家们越来越多的关注[4]。多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)起源于多位点酶凝胶电泳(Multilocus enzymeelectrophoresis,MLEE)[5],是一种针对微生物群体中缓慢基因位点变异进行分型的方法。此方法较简单快速,有着...  (本文共5页) 阅读全文>>

《食品安全质量检测学报》2017年11期
食品安全质量检测学报

进口黑虎虾中霍乱弧菌的鉴定及其挥发性产物分析

黑虎虾(black tiger shrimp,Penaeus monodon,也称斑节对虾),分类学上隶属于对虾属,分布区域广泛,是主要的海水养殖虾类。致病菌感染黑虎虾后,会发生烂腮、红腿等细菌性感染症状,给黑虎虾的养殖造成巨大影响。弧菌属细菌是引起对虾细菌性疾病的重要病原,弧菌属的霍乱弧菌(Vibrio cholerae)不仅能够造成对虾的弧菌病,也能引起人类霍乱病。对虾携带霍乱弧菌,人感染后能引起患者呕吐、腹泻、失水,若抢救不及时,死亡率较高,属于国际检疫传染病。目前霍乱弧菌已经鉴定到210多个血清群,包括O1、O22、O139等,只有O1、O139群能引起大范围的流行[1,2],其他血清群霍乱弧菌不具有致病性。传统生物学分离培养与生化鉴定是致病菌鉴定的金标准,快速筛选鉴定霍乱弧菌方法主要有常规PCR、实时荧光定量PCR、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)...  (本文共6页) 阅读全文>>