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乳腺癌差异蛋白质组学研究

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,目前其发病率在全世界范围内呈明显上升趋势[1]。我国虽然属于乳腺癌低发国家,但近年来沿海大城市的发病率及死亡率都有所升高。天津地区乳腺癌发病率从1981年的16.91/100,000增加到2000年42.25/100,000,粗发病率增加了150%,目前位居女性恶性肿瘤发病的第二位,而且年龄别发病率显示发病高峰有年轻化的趋势[2]。乳腺癌的发病原因,流行病学人群宏观研究认为,一部分与生理、生育和遗传因素有关,另一部分则与环境因素有关。近年来随着分子生物学技术的进展与更新,乳腺癌发生的分子机理研究也逐层深入,发现了一些乳腺癌易感基因和相关基因。然而由于生命活动真正的执行者是蛋白质,基因水平无法涵盖并解释一切表型[3],因此乳腺癌的分子生物学研究领域进入蛋白质组学阶段。鉴于国际上蛋白质组学研究自提出开始亦不过十年,乳腺癌相关蛋白质数据库尚不完善,因此乳腺癌蛋白质组学研究于国内外尚很少有报道。由于细胞  (本文共136页) 本文目录 | 阅读全文>>

上海交通大学
上海交通大学

乳腺癌转移的蛋白质组学研究及其关键因子的功能研究

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,其发病率逐年提高,已成为严重威胁女性健康的重大疾病之一。乳腺癌转移是致死的首要原因,转移一旦发生就预后不佳,极难治愈。高通量蛋白质组学技术的发展为乳腺癌转移研究提供了良好的技术支持,使人们能够系统地研究转移过程中蛋白质的组成及变化规律,进而筛选能够用于靶向药物设计的候选蛋白质。在本论文研究中,我们利用蛋白质组学研究技术,紧紧围绕乳腺癌转移相关的生物学问题,开展了一系列寻找转移关键因子的研究。我们在实验室已有的微升级质谱分析平台基础上,升级硬件系统,完善软件系统,搭建适用于复杂蛋白质样品鉴定的纳升级液相色谱串联质谱(LC‐MS/MS)蛋白质组学研究平台。标准样品检验表明,该平台能够实现复杂蛋白质组样品的纳升水平稳定分离,并且蛋白质检测灵敏度达到飞摩尔水平。该平台的建立,为我们实验室有效开展蛋白质组学研究奠定了基础,也成为本论文开展蛋白质组学研究的前提。首先,本论文应用2D‐LC‐MS/MS的技术线路进...  (本文共192页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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乳腺浸润型导管癌(Ⅱ期)实体瘤肿瘤特异性生物标志物的初探

乳腺癌是女性最常见的一种恶性肿瘤。鉴定出与乳腺癌癌变相关的肿瘤特异性生物标志物以及病情发展过程中蛋白质的变化对揭示乳腺癌变机理,诊断,判断预后及个体化治疗是非常重要的。我们采用特定病理类型的乳腺癌组织作为研究材料,进行差异蛋白质组学研究能够增加样品的重复性和均一性,寻找到的肿瘤特异性生物标志物具有普遍的代表意义。而且从癌组织中提取出的蛋白可代表病变组织的全部蛋白质,体现体内的真实情况,本试验也是对实体瘤组织蛋白质组学研究的初步尝试。为了减少杂质的影响,对样品的取材及处理、细胞及组织破碎、溶解液的配制、沉淀方法、染色方法等进行优化,获得了较好的乳腺癌旁腺体组织十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱,具有可重复性,可以进行二维凝胶电泳及进一步的研究。通过二维电泳分离得到了5对乳腺癌及癌旁腺体组织的2-DE图像。用ImageMaster 2D Elite Platnum软件对所得到的全细胞蛋白的2-DE图谱进行分析,根据不同处理条件下...  (本文共123页) 本文目录 | 阅读全文>>

青岛大学
青岛大学

三阴性乳腺癌患者血清的蛋白质组学研究

目的:比较三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌患者的血清蛋白质谱差异,以及三阴性乳腺癌不同时期的血清蛋白质谱差异,以期寻找三阴性乳腺癌相关候选血清蛋白标志物,为三阴性乳腺癌患者的早期诊断、预后判定以及治疗方式选择提供一定帮助。方法:以三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌患者为研究对象,利用双向凝胶电泳以及基质辅助激光解离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)技术比较三阴乳腺癌与非三阴乳腺癌患者以及三阴性乳腺癌不同时期血清蛋白表达谱的变化。结果:比较三阴性乳腺癌与非三阴性癌患者的血清蛋白质表达谱以及三阴性乳腺癌不同时期的血清蛋白表达谱的变化,分别筛选出16个及14个差异蛋白位点。分析结果显示,10个蛋白在三阴与非三阴乳腺癌组表现出特异性上调或者下调,9个蛋白在三阴乳腺癌早期与晚期组表现出特异性上调或者下调;有3个蛋自在两组患者中的变化趋势相同,这些差异蛋白都可能是三阴性乳腺癌的候选血清标志物。结论:(1)利用蛋白组学技术将血清中分子量以及等电...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>

青岛大学
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蛋白质组学方法筛选乳腺癌化疗敏感性和耐药性血清标记物

目的:(1)比较乳腺癌新辅助化疗前后,化疗敏感患者血清蛋白表达谱的变化情况,以期发现新的预测化疗有效的血清蛋白标志物;(2)比较乳腺癌辅助化疗前后,化疗耐药患者血清蛋白表达谱的变化情况,以期发现新的预测化疗耐药的血清蛋白标志物。方法:采用蛋白质组学的方法筛选乳腺癌的敏感和耐药相关血清蛋白标志物。以Ⅲ期乳腺癌新辅助化疗患者为研究对象,采用双向凝胶电泳和基质辅助激光解离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOF)技术比较化疗前后患者血清蛋白表达谱的变化。结果:首先比较化疗敏感乳腺癌患者治疗前后血清蛋白质表达谱的变化,筛选和鉴定出11个差异表达蛋白位点。然后比较化疗耐药乳腺癌患者治疗前后血清蛋白表达谱的变化,筛选出13个差异蛋白位点。分析结果显示,有5个蛋白在两组患者中的变化趋势相同,我们将这类蛋白称为“化疗反应性”血清标志物。6个蛋白的水平在化疗敏感组特异性上调或下调,是预测乳腺癌化疗有效性的候选血清标志物。8个蛋白的水平在化疗耐...  (本文共46页) 本文目录 | 阅读全文>>

湖南师范大学
湖南师范大学

蛋白磷酸酶2A催化亚基PP-2Aca过表达的蛋白质组学及其功能研究

蛋白磷酸酯酶2A(Protein phosphatase 2A,PP2A)是一种真核生物中最保守的丝氨酸/苏氨酸磷酸酯酶,也是真核生物中含量最丰富的酶之一。它能够对激酶、信号分子等大量细胞内蛋白质进行去磷酸化,并且参与了与细胞分裂、细胞凋亡、基因调控、蛋白质合成及细胞骨架组织相关的一系列重要生物学进程。典型的PP2A全酶以异三聚体形式存在,由催化亚基C、结构亚基A以及调节亚基B组成。有关B亚基对细胞转化的研究有较多的报道,最近实验也证明A亚基与肿瘤的生成有直接的关系,为PP2A作为肿瘤抑制因子提供了确凿的证据。但是关于C亚基与癌症发生之间关系的报道则很少。为了研究PP-2A催化亚基在癌症中的可能作用,我们研究小组在前期的工作中建立了PP-2A催化亚基C过表达的两种癌细胞的稳定克隆,即小鼠上皮细胞JB6(pCI-PP2Aca-JB6)和人的肺癌细胞H1299(pCI-PP2Aca-H1299)。利用这两种稳定的细胞系以及转染了载体...  (本文共213页) 本文目录 | 阅读全文>>