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树突状细胞影响CIK细胞体内外特异性杀伤卵巢癌细胞的研究

第一部分目的:1、脐带血CD34~+干细胞及单核细胞来源DC的数量、免疫表型及功能比较;2、负载卵巢癌细胞系总RNA抗原DC对CIK细胞在体外特异性杀伤的影响。方法:1、利用免疫磁珠法纯化脐带血CD34~+干细胞,贴壁法纯化脐带血单核细胞;2、分别在干细胞培养体系内加入SCF、FL、GM-CSF、IL-4及TNF-α,单核细胞培养体系内加入GM-CSF、IL-4及TNF-α以诱导成熟DC;3、计算干细胞组扩增DC的数量;4、利用流式细胞仪检测DC的免疫表型,观察两组来源不同DC的特异标志、表面黏附分子及HLA分子的表达有无差异,以混合淋巴细胞反应检测两组来源不同DC在功能上有无差异;5、Trizol提取卵巢癌细胞系SKOV3及HO8910的总RNA作为肿瘤抗原,转染脐带血CD34~+干细胞来源的DC;6、在脐带血单个核细胞培养体系内加入γ-INF、IL-1β、OKT-3及IL-2,诱导CIK细胞,计算扩增并利用流式细胞仪检测免疫  (本文共111页) 本文目录 | 阅读全文>>

昆明医学院
昆明医学院

脐带血单个核细胞体外诱导成CIK细胞及其抗肿瘤效应的实验研究

目的:探索建立CIK细胞的有效原代培养方法并阐明其生物学特性,为该细胞在肿瘤过继免役治疗中的运用奠定基础。方法:无菌采集健康足月产胎儿脐带静脉血,以淋巴细胞密度梯度离心法提取其中的单个核细胞,通过定时及选择加入IFN-γ、IL-2、IL-1、OKT_3等细胞因子使其定向诱导成CIK细胞或LAK细胞,并设未加细胞因子的脐带血单个核细胞(CBMNCs)培养作为空白对照;于培养过程中的不同时间测定各组细胞的细胞表型;利用改良的MTT法于细胞增殖高峰期测定各组效应细胞对白血病细胞株K562、宫颈癌细胞株Hela及肺癌细胞株YTMLC的细胞毒活性;利用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡及细胞周期的分布拟阐明CIK细胞的杀瘤机制。结果:实验发现,通过四种细胞因子的联合加入,可大量诱导出高活性的CIK细胞:CIK细胞在培养的第4-5天开始增殖,第12天达高峰,增殖的细胞表型以CD_3~+CD_(56)~+细胞为主,其相对百分比由最初的0.14%增加到...  (本文共48页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国输血杂志》2008年04期
中国输血杂志

CIK细胞与树突状细胞联合治疗恶性肿瘤的研究进展

随着免疫细胞生物学及免疫分子生物学的高速发展,细胞介导的过继免疫治疗已成为肿瘤患者放、化疗后辅助治疗的重要手段之一,其对于促进患者免疫系统的重建、消除残留病灶及骨髓净化都具有良好效果。免疫细胞主要分为T细胞、NK细胞(natural K iller cell,自然杀伤细胞)和NKT细胞(NK细胞样T淋巴细胞),如LAK细胞(lympho-k ine activated k iller cells,淋巴因子-激活的杀伤细胞)、TIL细胞(tumor-infiltration lymphocyte,肿瘤浸润淋巴细胞)、C IK细胞(cytok ine-induced k iller cells,细胞因子诱导的杀伤细胞)等。C IK细胞是将人外周血或人脐带血单个核细胞在体外用多种细胞因子诱导而获得的一群异质细胞。大量研究表明C IK细胞是一种新型、高效、具有广谱杀瘤活性的非主要组织相容性复合体(m ajor h istocompati...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国免疫学杂志》2009年02期
中国免疫学杂志

黄芪多糖诱导的树突状细胞增强CIK细胞的杀伤作用

CIK细胞是一种新型、高效的具有广谱杀瘤活力的免疫效应细胞,具有增殖速度快、杀伤活性高、临床应用副作用小等优点,是目前发现的杀瘤活性最强的免疫效应细胞之一,在肿瘤免疫治疗中显露巨大应用价值[1]。体内、体外研究均表明DC能诱发肿瘤宿主对特异性抗原的免疫应答,提高肿瘤宿主免疫效应细胞的细胞毒活性[2]。DC功能受抑制是恶性肿瘤患者免疫力降低的重要原因,由于许多肿瘤宿主可能缺乏功能性DC而不能诱发抗原特异性T细胞应答,故体外诱导功能性DC用于主动免疫治疗有重要的临床应用价值[3]。黄芪多糖具有显著的免疫调节和稳定的抗肿瘤作用[4]。本研究应用黄芪多糖致敏DC,观察DC与同源CIK细胞共培养后培养物的表型、体外增殖活性和细胞毒活性变化,探讨中药多糖抗肿瘤作用的免疫学机制。1材料与方法1.1试剂基因重组人IFN-γ(上海生物制品所)、抗CD3单抗(αCD3,武汉生物制品所)、基因重组人IL-2(上海华新生物高技术有限公司)、基因重组人G...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国老年学杂志》2017年19期
中国老年学杂志

miR-374b靶向PD-1/PD-L1信号通路增强CIK杀伤肿瘤细胞效应

细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)是新一代肿瘤过继免疫治疗的首选方案。程序性死亡蛋白(PD)-1可表达于B细胞、自然杀伤(NK)细胞、树突细胞(DC),还有活化的单核细胞。其主要表达于活化的T细胞表面,与其配体相互作用,抑制外周组织中的持续免疫反应,并且阻止自身组织受到免疫损伤[1]。PD-1的配体包括PD-L1和PD-L2,主要在巨噬细胞、单核细胞中表达。肿瘤细胞上的PD-L1与T细胞表面的PD-1相互作用,可以诱导对抗肿瘤的T细胞凋亡,从而产生免疫逃逸[2]。miR-374b在对抗肿瘤中具有重要作用[3]。CIK对抗肿瘤细胞可能通过miR374b调控PD-1/PD-L1信号通路来进行。本文拟对此进行分析。1材料与方法1.1仪器与试剂T细胞培养基:RPMI-1640培养基,10%FBS(Gibco 900-108),青霉素/链霉素溶液(Gibco 15140-122),2-巯基乙醇(Invitrogen 21985-023)。流式...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中医学报》2015年12期
中医学报

消癌平注射液联合CIK细胞治疗老年多发性骨髓瘤临床观察

文献引用:董平.消癌平注射液联合CIK细胞治疗老年多发性骨髓瘤临床观察[J].中医学报,2015,30(12):1712-1713,1717.Reference citation:DONG Ping.Clinical Observation of Xiaoaiping Injection Combined with CIK Cells for the Treatment of ElderlyMultiple Myeloma[J].China Journal of Chinese Medicine,2015,30(12):1712-1713,1717.多发性骨髓瘤是血液系统的恶性肿瘤,该病的高发人群为老年人。目前,该病还不能够被治愈。随着医学技术的不断进步和新药的不断开发,多发性骨髓瘤的缓解率正在不断提高。但是,由于仍有一定量的残留肿瘤细胞,所以该病的复发是不可避免的[1]。对患者进行维持治疗可以使缓解时间延长,生活质量得到明显提...  (本文共3页) 阅读全文>>