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幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白口服核酸疫苗实验研究

摘 要一、研究背景幽门螺杆菌(H. pylori)感染为慢性活动性胃炎和消化性溃疡的主要病因,与肠型胃癌和胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤的发生密切相关。抗生素联合制酸剂为目前H. pylori感染主要的治疗方案,但随着细菌耐药、药物不良反应及药效经济学等问题的突出,研究接种简便、成本低廉并易于大面积推广的H. pylori口服疫苗越来越受到重视。DNA疫苗因可诱导全面的免疫应答、提供同种异株交叉保护作用、易于制备多价疫苗、兼有预防和治疗作用等特点在多种疾病的防治中显示出巨大的应用潜力。而与传统疫苗相比,活减毒鼠伤寒沙门菌这一新型口服疫苗载体释放系统亦具有无需纯化抗原,无需佐剂,可避免抗原在胃内的降解和变性等优点。大量试验证实,减毒伤寒沙门菌作为疫苗免疫载体接种人体是安全的,具有广阔的实际应用价值。中性粒细胞激活蛋白(HP-NAP)为新近发现的H. pylori主要毒力因子之一。目前对HP-NAP的免疫原性及保护性研究尚处  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津医科大学
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单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白加趋化因子MIP-1α核酸疫苗的构建及初步免疫观察

单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)主要引起生殖器疱疹。近年来,生殖器疱疹的发病率在迅速上升,危害性亦日益显得突出,但目前尚无特效药控制其发生和复发,因此研制疱疹病毒疫苗已成为预防生殖器疱疹感染的关键。在现已研制的疫苗中,DNA疫苗尽管诱导的免疫应答效力较低,可因其具有制备简单、安全、诱导的免疫应答广泛长久,并且可以共表达免疫调节因子,根据需要诱导产生最适免疫应答等特性,受到人们的青睐。近几年来,国外学者们一直在探索应用分子佐剂来加强DNA疫苗的免疫效果,并取得了一定的成效。为构建有效预防HSV-Ⅱ的DNA疫苗,探讨分子佐剂对DNA疫苗的作用机制,本研究完成了以下工作:1.HSV-Ⅱ gD DNA疫苗的构建:根据GenBank中HSV-Ⅱ HG52株gD基因序列设计了一对引物,采用PCR方法扩增出HSV-Ⅱ Sav株gD全部编码区的基因片段,经中介pUCm-T载体,将其插入到真核表达质粒pcDNA3中相应的位点,并转化E.coli D...  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川农业大学
四川农业大学

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5核酸疫苗的研究

本研究在对从四川省分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)SC1和SC2株进行细胞培养特性、电镜观察和RT—PCR鉴定的基础上,对ORF5基因进行克隆、鉴定和序列分析,构建了ORF5基因和猪白细胞介素2(IL-2)真核表达载体(核酸疫苗),利用Marc-145细胞、小鼠和猪作为模型研究ORF5核酸疫苗在Marc-145细胞中表达、在仔猪和小鼠体内的动态分布及安全性、诱导仔猪体液免疫和细胞免疫的能力、IL-2的免疫增强等作用进行了系统研究,获得如下结果:1.猪繁殖与呼吸综合征病毒四川分离株ORF5基因的序列及分析:本研究对SC1和SC2分离株的ORF5基因分别进行pGEM-T载体克隆与测序,并进行了同源性比较和进化树分析,结果,SC-1、SC-2分离株ORF5基因序列与VR-2332株的十分相似,其核苷酸同源性达到99%,氨基...  (本文共159页) 本文目录 | 阅读全文>>

第二军医大学
第二军医大学

幽门螺杆菌尿素酶B和黏附素A核酸疫苗的研究

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)是革兰氏阴性的微需氧菌。在世界范围内,其人群感染率达50%以上。H. pylori为胃、十二指肠溃疡的主要病原,与胃癌、胃黏膜相关性淋巴组织淋巴瘤密切相关,已被世界卫生组织列为与胃癌发生相关的Ⅰ类病原。目前控制H. pylori的感染主要进行H. pylori根治性治疗,主要治疗方案为联合应用质子泵抑制剂和抗生素的疗法。虽然获得较好的疗效,仍然存在下列问题:如患者对药物的依从性、抗生素耐药菌株不断出现、再感染的发生及药物的不良反应如腹痛、恶心、呕吐,这都可能使临床药物治疗受到限制,另外,药物治疗仅针对有症状的患者,而无症状的H. pylori携带者仍存在发展为慢性胃炎甚至胃癌的危险性。如何在广大人群中有效控制H. pylori感染,并遏制感染后的一系列相关疾病的发生发展具有重要意义。有效的预防性和治疗性H. pylori疫苗可以克服上述药物根治治疗H. p...  (本文共121页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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PCV2核酸疫苗和重组鸡痘病毒疫苗的构建及实验免疫研究

猪圆环病毒(PCV)是一种小的、二十面体对称、无囊膜、单股环状DNA 病毒。病毒粒子直径为17nm,是目前发现的较小的动物病毒。PCV 具有PCV1 和PCV2两种基因型。PCV1 没有致病性,但广泛存在猪体内及猪源传代细胞系;而PCV2具有致病性,可以引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Post-weaning multisystemic wasting syndrome, PMWS),它是一种新的传染病。疫苗接种是特异性预防传染病尤其是病毒引起的传染病的可靠和有效手段,安全有效的疫苗是成功地预防、控制乃至最终消灭PCV2 引起若干综合征的先决条件。在PCV2 的防制中,国内外均无有效的疫苗可供使用,虽然国外以pCDNA3.1为载体,以衣壳蛋白基因和颗粒巨噬细胞集落刺激因子基因为目的基因片段,制作了核酸疫苗,以杆状病毒表达的ORF2 蛋白为亚单位疫苗,并采用prime-boost方案进行了动物免疫实验。研究工作表明亚单位疫苗比核酸疫...  (本文共171页) 本文目录 | 阅读全文>>

第二军医大学
第二军医大学

乙型肝炎核酸疫苗的安全性研究

核酸疫苗是90年代兴起的新型疫苗,已在多种疾病的防治中显示出巨大的潜能。然而核酸疫苗是一个新生事物,目前还存在许多尚未解决的问题,其中安全性的问题最为重要,直接关系到核酸疫苗的应用。全面评价乙肝DNA疫苗的安全性,我们进行了以下的毒理研究:1.急性毒性试验本研究分别考察了乙肝DNA疫苗肌肉注射或皮下注射免疫小鼠或豚鼠的急性毒性,结果表明乙肝DNA疫苗在小鼠或豚鼠上未见任何明显急性毒性反应。半数致死量是推荐临床剂量的几百倍。2.重复剂量的长期毒性试验分别用三个剂量组的DNA疫苗(4.5m乙肝g/kg、1.5mg/kg、0.5mg/kg)肌注免疫小鼠56天(每1周给药2次,之后每周1次),从实验开始至停药后30天内进行毒性观察。结果表明小鼠体重、食量及粪便与对照组之间未见明显改变。血液学及临床生化指标均属正常范围内波动,未发现与受试药相关的毒性反应。尸检、器官重量检查未发现有与受试药物有关的毒性改变。观察了在上述给药条件下小鼠的多项...  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>