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67kDa层粘连蛋白受体反义寡核苷酸抑制卵巢癌细胞侵袭转移的实验研究

目的 采用细胞培养的技术体外培养四种卵巢癌细胞株,观察其生长特点、镜下形态及分裂增殖能力差别。并分别收集四种卵巢癌细胞采用免疫细胞化学和RT-PCR的方法检测各株细胞中67kDa层粘连蛋白受体(67kDa LN-R)的表达情况,确定67kDa LN-R表达阳性的细胞株,为进一步研究其在卵巢癌侵袭转移机制中的作用奠定理论基础。方法 复苏冻存卵巢癌细胞株HRA、SKOV3、3AO、OVCAR3,分别培养于加入10%新生牛血清、1×10~5 IU/L青霉素、100 mg/L链霉素的RPMI 1640培养液中,在37℃、5%二氧化碳培养箱中培养并传代至对数生长期。根据四种细胞分裂增殖情况绘制生长曲线,并利用Giemsa染色观察比较四种细胞形态差别。将四种细胞分别制成细胞飞片,采用免疫细胞化学的方法检测67kDa LN-R蛋白表达情况,分别收取10~6个卵巢癌细胞,运用RT-PCR半定量的方法检测各株细胞mRNA水平67kDa LN-R的  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国妇幼健康研究》2017年07期
中国妇幼健康研究

趋化因子CXCL12对卵巢癌细胞侵袭和转移的作用及机制研究

卵巢癌是妇科常见女性生殖器官恶性肿瘤,发病率在妇科肿瘤中排第三位,但致死率排首位,治疗失败和致死率高的原因主要是癌细胞转移。癌细胞转移是一个复杂连续的过程,具有高度的组织性和器官选择性,虽然既往的研究证明有多种因素与癌细胞转移密切相关[1],但其分子机制尚不清楚。趋化因子CXCL12(stromal cell derived factor-12,CXCL12)是趋化因子蛋白家族中的一种小分子细胞因子,对淋巴细胞有强烈的趋化作用。多数研究表明,CXCL12及其配体CXCR4与肿瘤发生、发展密切相关[2-3],本研究旨在分析趋化因子CXCL12及其配体CXCR4对卵巢癌细胞侵袭和转移中的作用,并探讨卵巢癌腹腔转移的分子机制,以期为卵巢癌的治疗提供依据。1资料与方法1.1一般资料1.1.1细胞株卵巢癌细胞株CAOV3购自武汉大学医学宝藏中心,血管内皮细胞株HUVEC购自河北医科大学第四医院科研中心。1.1.2临床样本选取2015年6月...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国计划生育和妇产科》2017年08期
中国计划生育和妇产科

Jagged1-STAT 3信号轴对卵巢癌细胞A 2780迁移能力的影响

卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,卵巢癌死亡率居妇科恶性肿瘤首位[1]。虽然近年来卵巢癌在放化疗和手术方式上有一定的提高,但其5年生存率仍无明显的提高,仅为30%~50%[2]。现有研究表明,Notch信号通路作为高度保守的信号通路,不仅与细胞增长、分化、黏附、凋亡及上皮间质转化关系密切,而且在卵巢癌的发生、发展、侵袭、转移过程中发挥重要作用[3-4]。Notch关键配体Jagged1与之结合后可引发受体结构改变,使Notch胞内区(NICD)发挥作用[5]。STAT 3信号通路活化与多种肿瘤的发生、转化、侵袭和转移密切相关[6]。炎性细胞因子IL-6、TNF-α等可直接或间接激活STAT 3信号,诱导肿瘤细胞发生上皮间质和肿瘤干细胞转化[7]。研究显示,在乳腺癌中,IL-6是Notch/Jagged1信号通路的靶基因[8]。然而,到目前为止,Jagged1是否调控STAT 3/p STAT 3的表达,以及影响卵巢癌细...  (本文共5页) 阅读全文>>

《现代妇产科进展》2017年09期
现代妇产科进展

TGF-β1调节miR-99家族对卵巢癌细胞恶性行为的影响

卵巢癌在女性肿瘤中发病率及病死率分别居时间梯度12、24、36、48h,检测TGF-β1对细胞增殖的影响,7、8位,5年生存率低于45%,尤其在欠发达国家,选择合适浓度进行后续实验;(3)miR-99家族模拟物转染组(miR-99a/99b/100 mimic,miR-99a/99b/100-m);(4)miR-99其发病率呈上升趋势[1]。微小RNA(miRNA)是一家族模拟物对照组(miRNA mimic control,miRNA-mc);(5)类长度为20~25bp的内源性非编码RNA,通过结miR-99家族抑制物转染组(miR-99a/99b/100 inhibitor,miR-合靶基因mRNA的3'非翻译区(3'-UTR)进而在转录99a/99b/100-i);(6)miR-99家族抑制物对照组(miRNA in-后水平调控靶基因表达hibitor control,miRNA-ic)。所有实验重复3次。。MiR-99...  (本文共6页) 阅读全文>>

《生命世界》2009年02期
生命世界

发现休眠卵巢癌细胞存活机制

卵巢癌复发率高一直困扰医学界,美国科学家新近发现了休眠的卵巢癌细胞在人体内的存活机制,这项研究有望帮助人们找到治疗卵巢癌的新途径。科学家指出,一种名为ARHI的基因是卵巢癌细胞自体吞噬机制能否启动的关键,决定细胞是否会依靠自噬机制“自我灭亡”。在以该基因为重点的研究中,他们发现在移植了卵巢癌细胞的实验鼠体内有几种蛋白质存活因子...  (本文共1页) 阅读全文>>

《医学研究杂志》2009年04期
医学研究杂志

美发现休眠卵巢癌细胞存活机制

卵巢癌复发率高一直困扰医学界。美国得克萨斯大学研究人员新近发现了休眠的卵巢癌细胞在人体内的存活机制。这项研究有望帮助人们找到治疗卵巢癌的新途径。最新一期美国《临床检查杂志》月刊报道,一些卵巢癌患者切除肿瘤两三年之后,体内再次出现肿瘤,其主要原因是体内休眠的卵巢癌细胞在作祟。这些卵巢癌细胞休眠时不进行细胞分裂,不易被发现,然而一旦重新生长,肿瘤就会再次出现。研究人员介绍说,一...  (本文共1页) 阅读全文>>