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CREB结合位点诱骗寡核苷酸缓解吗啡依赖机制的实验研究

第一部分 CRE-decoy ODN对吗啡依赖SK-N-SH细胞CREB的DNA结合活性升高的抑制作用目的:研究以转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein, CREB)为靶点的CREB结合位点诱骗寡核苷酸(CRE-transcription factor decoy oligodeoxynucleotide, CRE-decoy ODN)对慢性吗啡诱导SK-N-SH细胞CREB的DNA结合活性的影响。方法:(1) 合成全硫代磷酸化ODN:CRE-decoy ODN:5'-TGACGTCA TGACGTCA TGACGTCA-3′; CRE mismatch ODN; 5'-TGTGGTCA TGTGGTCA TGTGGTCA-3'; nonsense palindromic ODN; 5'-CTAGCTAG CTAGCTAG CTAGCTAG-3'。顺式元件CR  (本文共127页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
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人类基因CREB4和4.10的克隆和功能研究

从我们的大规模cDNA克隆和测序计划中,利用表达谱基因芯片筛选的结果并通过生物信息学分析,我们选取了2条基因进行进一步的研究,以探讨这些基因的功能。外界刺激通过细胞内的蛋白激酶反应链,将信号从细胞膜传导到核,导致相关转录因子的磷酸化和被激活,从而引起基因表达的变化。cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-responsive element binding protein,CREB)也许是其中最具特点的刺激诱导转录因子我们实验室克隆了一个人类CREB的新基因(CREB4),该基因编码一个395个氨基酸的蛋白,并与小鼠的CREB3高度同源。RT-PCR显示CREB4在胰腺、前列腺、脑和骨骼肌组织中表达,在小肠、外周血白细胞、睾丸和胸腺组织中低表达,而在成人胎盘、心脏、脾脏、卵巢、肾脏、肝脏、肺和结肠组织中未检测到特异性条带,在检测的各肿瘤组织中显示CREB4基因只在结肠癌 (CX-1和GI-112)、肺癌(LX-1)、前列腺癌(PC-...  (本文共133页) 本文目录 | 阅读全文>>

河北医科大学
河北医科大学

CREB结合位点诱骗寡核苷酸对大鼠吗啡耐受症状改善及其分子机制研究

长期应用阿片类物质将导致耐受和依赖。耐受(tolerance)是指需要增加阿片类药物的剂量才能得到同样的效果,主要是指阿片类物质引起急性行为改变(如镇痛、自主神经系统抑制和“欣快感”)的耐受。依赖可分为身体依赖(physical dependence)和精神依赖(psychological dependence)。身体依赖又称生理依赖,是长期反复应用阿片类物质使机体生理发生改变,一旦停药,严重的生理紊乱导致戒断症状(withdrawal syndrome)的出现。精神依赖又称心理依赖,是指情感或动机的症状,表现为戒断时不计后果的对阿片类物质强迫性渴望和用药。阿片类物质耐受和依赖严重危害人类健康,同时也带来日益突出的公共卫生和社会问题。目前阿片类物质耐受和依赖的神经生物学分子机制尚未完全阐明,临床上也缺乏有效的治疗方法。如何消除阿片类物质耐受和依赖是一项世界性难题。因此探讨阿片类物质耐受和依赖的形成机制,寻求、评价和筛选有效的防治...  (本文共120页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
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大鼠杏仁体和海马结构内CREB对应激刺激的调节作用

杏仁体(amygdala, AM)和海马结构(hippocampal formation, HF)是与情绪活动和学习记忆相关的重要结构,AM和HF内的转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)被证实在记忆调节过程中发挥了重要作用。CREB是一种核蛋白,是刺激诱导转录因子的主要成员,多种刺激都可导致CREB的活化,形成磷酸化的CREB(pCREB)。神经生理及神经药理学的研究表明,在突触可塑性的长时程效应阶段,CREB可调节基因转录、参与蛋白质合成,从而维持突触效率的长期持续改变。但是形态上,目前还不清楚AM、HF等脑区内的CREB究竟在哪类神经元中表达而发挥作用。为此本实验准备进一步探讨:① 应激刺激后AM和HF内pCREB表达量的变化;② pCREB在什么神经元中表达;③ pCREB的表达与NMDA受体活性的关系。本实验作了如下工作:1.对SD大鼠强迫性游泳(FS),建立情绪性应激刺激动物模型,以正常同类大鼠为对照,用免疫细...  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>

汕头大学
汕头大学

抗抑郁药帕罗西汀对应激所致大鼠海马组织学和行为学改变的影响及与CREB相关信号通路的关系

背景与目的:应激是机体对内外环境的刺激所产生的综合应答状态,对个体产生正负两方面的影响,严重或持久的应激是多种精神和躯体疾病如复发性抑郁症、创伤后应激障碍以及A1zheimer病等的促发因素。海马是应激激素作用的主要靶区,是介导应激反应的主要中枢,研究提示应激引起的海马神经元萎缩和丢失参与了抑郁症的病理生理过程,并与各种应激相关疾病的认知损害密切相关,所以,推测海马的损害在各种应激所致疾患的发病中起到关键作用。cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-response-element-binding-protein,CREB)参与了海马神经元存活和长时记忆的调节,受多种信号通路蛋白激酶的调控。应激所致的海马神经元和海马功能的损害是否同CREB相关信号通路有关?在不同脑区中,哪些信号通路参与对应激反应的调控?其它脑区是否参与了应激反应?解决这些问题对阐明应激的发生机理及应激相关疾病的发病机制具有重要意义,但目前国内外尚未见相关报道。本课...  (本文共138页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
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吗啡依赖大鼠CPA建立、消退和重建及部分脑区内CREB和强啡肽基因表达

精神活性物质具有明显的负性强化作用,物质依赖戒断所致的厌恶负性强化了冲动性的觅药行为导致复吸/持续的药物使用,故戒断厌恶被看作是最强的负性强化因子之一。至今,对其生物学机制还知之甚少,本研究主要基于慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断建立的CPA 动物模型,探讨戒断厌恶可能的神经生物学基础。第一部分目的:探讨慢性吗啡依赖大鼠纳洛酮催瘾戒断CPA建立过程中,与成瘾密切相关一些脑区内CREB 和强啡肽基因表达的适应性变化。方法:采用慢性吗啡注射后予一次纳洛酮催瘾注射(同时与条件性位置训练箱搭配)建立大鼠CPA 模型。并以此为基础,进一步采用原位杂交和免疫组化的方法,检测与成瘾密切相关的一些脑区内CREB 和强啡肽基因在CPA 建立后的表达情况。结果:1. 连续6 天半的慢性吗啡注射(10mg/kg/次,BID,IP)纳洛酮一次催瘾(0.3mg/kg)搭配可以成功建立CPA,试验鼠表现出明显的厌恶动机,对伴药侧表现出明显的回避。2. MN ...  (本文共72页) 本文目录 | 阅读全文>>