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低氧诱导因子1α和糖转运蛋白1在肺癌组织中的表达及其意义的研究

目的:恶性肿瘤组织的一个显著特点就是快速增殖性,在肿瘤生长过程中,由于肿瘤细胞增生迅速,造成肿瘤微环境始终处于相对低氧状态。,低氧可触发肿瘤产生一系列应激性保护反应,使得肿瘤细胞在低氧状态下免受损伤或死亡。实验表明,几乎所有的实体瘤中均有低氧细胞存在,其数量与肿瘤的组织学类型及增长速度有关,通常其比例随肿瘤体积增加而增加。近来的研究表明肿瘤细胞存在低氧诱导因子1(Hypoxia induced factor1,HIF1),在肿瘤缺氧环境中起着中枢纽带作用,对血红素加氧酶、葡萄糖转运蛋白、糖酵解酶、血管生成因子、促红细胞生成素以及P53 等细胞酶和蛋白起着调节作用,促使肿瘤内新生血管的生成以及细胞代谢的改变,以满足肿瘤快速生长的营养需要。HIF1 是一个由HIF1α和HIF1β亚单位构成的异二聚体,研究表明在HIF1 中亚单位HIF1α对氧的依赖性较强,当周围环境的氧浓度下降时,HIF1α表达增加,并且其表达增加表现在多个水平上,  (本文共131页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

低氧诱导因子1诱导血红素加氧酶1过表达在大鼠肾移植缺血再灌注损伤中的保护性作用研究

随着更多特异性免疫抑制药物应用于临床,急性排斥反应发生率已经大大减低,但是移植物长期存活状况并无明显改善。非免疫因素因而更加受到人们重视,而缺血再灌注损伤(IRI)无疑是其中极为重要的一环。IRI后因急性肾小管坏死(ATN)往往导致移植肾功能延迟恢复,以后更会增加急性排斥和慢性移植物失功的发生率。低氧诱导因子 1(HIF-1)是重要的氧依赖性核转录因子,低氧条件下能上调多个靶基因表达以减少缺氧性损伤。靶基因之一的血红素加氧酶1(HO-1)被多个研究证实能够在心脏、肝脏和小肠移植中抑制IRI。本实验中我们设想通过预处理使HIF-1稳定表达并诱导内源性HO-1过表达,探讨它们在体内和体外试验中对缺血再灌注及缺氧再复氧损伤的保护作用及其机制。第一部分肾微血管内皮细胞的原代培养及低温缺氧再复氧损伤细胞模型的建立目的:在体外原代培养肾微血管内皮细胞;建立肾微血管内皮细胞低温缺氧再复氧损伤模型,在体外试验中模拟临床肾移植过程中的缺血再灌注损...  (本文共87页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

低氧诱导因子-1对肝细胞生长因子基因表达调控机制的研究

目的:第一部分:(1) 观察氯化钴(CoCl_2)及HIF-1α过表达对乳鼠心肌细胞及人宫颈癌Hela细胞存活及凋亡状况的影响。(2) 观察CoCl_2模拟的低氧以及由pcDNA3-HIF-1α真核表达质粒转染介导的HIF-1α过表达对乳鼠心肌细胞和Hela细胞中HGF/c-Met系统mRNA和蛋白表达的调节。(3)对人HGF基因启动子区进行生物信息学分析,寻找可能介导HGF低氧表达调控的转录因子作用位点。第二部分:根据生物信息学分析结果,在Hela和转染效率较高HEK293细胞中,研究HIF-1α对TGF-β2基因表达调控的作用机制,并进一步观察重组转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)对Hela细胞中HGF表达的影响,方法:第一部分:(1) 体外培养乳鼠原代心肌细胞和Hela细胞,应用MTT和流式细胞仪检测CoCl_2对乳鼠心肌细胞和Hela细胞存活、增殖及凋亡的影响。...  (本文共229页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
中南大学

川芎嗪对人视网膜色素上皮细胞表达低氧诱导因子-1α及VEGF的影响

目的:1、探讨川芎嗪对离体培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE细胞)增殖的影响。2、探讨糖基化终产物(AGEs)作用下人RPE细胞中核转录因子低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达的改变及相关细胞因子血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达的改变。3、探讨加入川芎嗪后对AGEs作用下人RPE细胞中HIF-1α蛋白表达、VEGF mRNA及蛋白表达改变的影响,探讨川芎嗪治疗糖尿病视网膜病变(DR)的分子机制,为川芎嗪治疗DR提供实验依据。方法:1、应用酶消化法分离人RPE细胞,进行形态学观察,并运用免疫细胞化学法做抗人角蛋白抗体鉴定,取3-8代细胞用于实验。2、细胞计数法、四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度(0、10、20、40、80、160、320、640mg/L)和处理时间(24和48h)下川芎嗪对RPE细胞增殖活性的影响,并计算出相应的细胞增殖抑制率。3、免疫细胞化学方法及免疫印迹法(Western Blot)观察相...  (本文共100页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

低氧诱导因子-1a受体的小干扰RNA对人脊髓星形胶质瘤细胞凋亡的影响

目的 研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)受体的小干扰RNA对人星形胶质瘤细胞(U251)凋亡的影响,小干扰RNA对HIF-1α的调控作用;探讨肿瘤细胞凋亡的分子机制及调控。方法 构建靶向低氧诱导因子-1α(HIF-1α)受体的小干扰RNA(si RNA)真核表达载体pSUPER EGFP1。培养成熟的U251细胞株随机分成:①、载体(载体中转染HIF-1α基因)缺氧组(U251在1%氧,无糖和血清的培养基中分别培养12h、24h和48h):②、载体常氧组(U251在常氧,无糖和血清的培养基中分别培养12h、24h和48h);③、空载体(载体中未转染HIF-1α基因)缺氧组(U251在1%氧,无糖和血清的培养基中分别培养12h、24h和48h);④、空载体常氧组(U251在常氧,无糖和血清的培养基中分别培养12h、24h和48h);⑤、对照缺氧组(U251在1%氧,无糖和血清的培养基中分别培养12h、24h和48h);⑥、对照...  (本文共126页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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低氧诱导因子1α反义核酸对喉癌Hep-2细胞的影响及其在放疗增效中的作用

在低氧环境下生长是人类和动物肿瘤的共同特征。低氧诱发的肿瘤反应是多种恶性肿瘤独立性不良预后因素,也是肿瘤对治疗(包括放疗和化疗)产生抵抗和耐受的重要原因。为了探讨低氧诱导因子1α(HIF-1α)在头颈鳞癌放疗抵抗中的作用,采用免疫组织化学、流式细胞术和分子生物学实验技术,在体外实验的基础上,探讨低氧条件下HIF-1α及其相关调控因子在喉癌Hep-2细胞中的表达和相互作用机制,从肿瘤血管生成因子(VEGF)和抑癌基因(P53)变化等不同侧面了解HIF-1α与头颈鳞癌生物学行为和放疗抵抗关系及其机理。通过反义寡核苷酸技术阻断HIF-1α的表达,探讨抑制HIF-1α生成在减低头颈鳞癌放疗抵抗和增强其对放疗敏感性的可能性。本研究的完成对进一步揭示头颈鳞癌对放疗抵抗的机理,增强头颈鳞癌患者综合治疗效果和改善预后都有较大理论和实际应用价值。  (本文共126页) 本文目录 | 阅读全文>>