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影响H9N2亚型AIV传播途径的分子机制和构建致弱的8基因全禽源H5N1亚型重排AIV

已有的证据表明,九十年代以前在中国大陆鸡群中没有检测到H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)感染。我国1994年首次公开报道从鸡群中分离到H9亚型AIV,随后几年在一些地区形成小规模的局部流行,未波及全国。但1998年春夏开始的H9亚型禽流感则不同,在短短的几个月时间内就形成波及20多个省区的全国范围大流行,给我国的养禽业造成了巨大的经济损失。显然造成1998年大流行的H9亚型AIV的传播效率要高于1994年报道的H9亚型AIV。为了解影响AIV传播效率的分子机制,本研究选择H9N2亚型AIV中国大陆最早分离株A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(简称SS株)和1998年大流行时期的分离株A/Chicken/Shangai/F/98(H9N2)(简称F株)作为研究对象,比较了它们的致病性和传播途径特性,发现F株可以经直接接触和气溶胶途径传播,而SS株只经直接接触途径传播  (本文共137页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

宠物鸟H3N8亚型流感病毒的鉴定及利用反义遗传学技术产生重组病毒

2001年香港大学从香港入港口及鸟园市场的宠物鸟分离得到20株病毒,命名为A/Songbird/Hong Kong,SBxx/2001。其中大多数流感病毒来自鸟的饮用水。流感病毒分离率为5.6%(18/321),而新城疫的分离率为0.6%(2/321)。大多数流感病毒来自passerineformes(雀科鸟),少数来自psittocine species(鹦鹉鸟类)。本文对H3N8亚型23株宠物鸟流感病毒分离株进行了部分及全基因序列测定,分析和分子演化的研究。首先将试验用的毒株在SPF鸡胚接种增殖,提取RNA,RT-PCR扩增,及应用特异引物进行测序,然后用DNASTAR(4.0 edition)和Tree View(1.6.6)软件进行序列和数据编辑,序列翻译,进化树绘制和分析。进化树分析表明来自不同国家和地区的H3N8流感病毒的每一个基因都非常相似,都形成一个独立的分支,同源率为95.9-100%。特别要强调的是香港200...  (本文共124页) 本文目录 | 阅读全文>>

扬州大学
扬州大学

H9N2亚型AIV基因组序列分析及用反向遗传技术产生多个H9N2和H5重组流感病毒

目前,H5N1和H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在包括我国在内的东南亚及世界许多国家分布广泛,是流行主型,它们引起的禽流感对养禽业的严重危害性和公共卫生意义都受到关注。由于AIV亚型众多,宿主广泛,抗原易变,尤其是有野生水禽作为病毒的大储存库,禽流感是难以消灭的,只有依靠严格的生物安全措施及疫苗预防和控制。对华南(主要是香港)活禽市场的监测表明这两个亚型的病毒共存,内部基因进化活跃,这警示我们对人类流感大流行应有所准备。中国大陆有必要加强对AIV的分布、进化、致病性及新型疫苗等方面的研究。1999年以后Neumann等、Hoffmann等建立了完全以质粒为基础的流感病毒反向遗传操作系统,显示了对相关研究的良好应用前景。本研究选择1个中国大陆分离株A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2),对其进行全基因组序列测定和遗传进化分析,然后将其8个基因cDNA克隆入Hoffmann等构建的双向转录/表达载体pHW2000...  (本文共165页) 本文目录 | 阅读全文>>

内蒙古农业大学
内蒙古农业大学

禽源H3、H4亚型流感病毒的序列分析及对鸡的致病性研究

本论文对来自中国安徽、福建、浙江、江苏省的 14 株鸭源和来自中国四川的 2株鸡源的禽流感病毒(AIV)分离株进行了亚型鉴定、全基因序列测定和分析,从中挑选出 8 个毒株用于鸡的致病性试验研究。 16 株禽流感病毒的序列分析:经亚型鉴定,确认 16 株流感病毒中,12 株为 H3亚型流感病毒,其中 1 株 H3N2 亚型, 1 株 H3N6 亚型,10 株 H3N1 亚型;4 株为 H4N6亚型。通过提取病毒的核酸、设计特异性引物,用 RT-PCR 方法扩增所有毒株的各个基因片段、克隆到 pMD18-T 载体、测序、拼接序列等一系列步骤,最后绘制进化树。 H3 亚型 HA1 基因进化分析结果:本研究 10 个 H3N1 亚型分离株和 1 个 H3N2 亚型分离株聚成一支,它们与 1963 年乌克兰病毒分离株 A/Duck/Ukraine/1/63(H3N8)同源率最高,达 87.7%~88.7%;分离株 DK/SZH/1/02(...  (本文共197页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

禽流感病毒分离、复合多表位重组体构建及实验免疫研究

本研究分离了1株禽流感病毒(AIV)A/Chicken/Jilin/9/(H5N1)(JL9/04),并进行了全基因组序列测定和遗传进化关系分析。结果表明,JL9/04株各基因分别与猪源H5N1亚型、人源H5N1亚型、禽源H9N2亚型毒株同源性较高(96%~98%),JL9/04株符合AIV强毒株HA基因裂解位点的分子模式。表明在2004年吉林省禽流感暴发中,猪源H5N1亚型与禽源H9N2亚型AIV起了不可忽视的作用。以上述研究为基础,根据H3、H9亚型抗原表位及其它主要抗原(NA、M、NP)表位基因设计并合成了流感病毒复合多表位基因盒Epi。构建与筛选出表达Epi基因盒的DNA重组体pRI-Epi,共表达H5、H7亚型AIV HA与Epi基因的DNA重组体pRI-H57-Epi,共表达H5、H7亚型AIV HA、Epi基因及鸡IL-18基因的鸡痘病毒重组株vFA7935L18。SPF鸡和BALB/c小鼠实验免疫研究结果表明,p...  (本文共181页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

虎源和狮源H5N1亚型流感病毒进化分析与HA基因重组犬2型腺病毒构建研究

自2003年以来,H5N1禽流感(AI)在亚洲的大面积暴发已导致近亿只禽类感染死亡或被捕杀,并跨越种间障碍导致109人死亡。这些事件让人们担心H5N1AIV可能会进化成为引发流感大流行的病毒。2002年我们从发病死亡虎中分离到1株H5N1 AIV,这是首次发现H5N1 AIV能够自然感染除人以外的哺乳动物并且导致其发病死亡。在进一步的虎和狮AI感染情况调查中分离获得14株H5N1 AIV,对虎源和狮源流感病毒的生物学特性和基因进化进行了研究:人工感染实验表明所分离病毒对鸡、小白鼠和家猫均具有高致病性;全基因序列测定表明所分离病毒与H5N1亚型AIV高度同源(96%~100%),虎源和狮源流感病毒各基因节片具有一系列H5N1 AIV特征性遗传位点;受体结合特性检测表明15株病毒均保持着与AIV受体结合的特性,虎气管流感病毒受体以AIV受体类型为主。以犬2型腺病毒为载体,构建了表达流感病毒HA蛋白的重组活病毒,用其免疫猫可以诱导产生...  (本文共166页) 本文目录 | 阅读全文>>