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钝挫性眼外伤动物模型中晶状体上皮细胞热休克蛋白的表达及其调节

晶体是人眼视觉系统的重要组成部分,是重要的屈光间质,其透明性的维持对正常视功能的维持具有重要的意义。成熟的晶体具有独特的解剖结构特点,只有赤道部的晶体上皮细胞具有代谢活动能力,新的纤维细胞从赤道部上皮细胞长出并失去细胞器及细胞核。这种独特的解剖结构使得其内层结构必需依赖外部结构以保持其自身稳定及有毒物质的代谢。同样,由于损伤的分子无法通过代谢机制修复,因此晶体物质在对抗损伤时显得尤为脆弱。晶体本身无血管及神经供给,其独特的解剖结构使其一直暴露在应激的微环境中,氧及酸性物质来源受到限制,而废弃的代谢产物如毒素和炎症性物质却长期与其密切接触。因此,晶体本身易遭受各种刺激因子的损害,蛋白质发生变性,透明晶状体出现混浊,发生白内障。钝挫性眼外伤在临床相当常见,它可引起一系列的并发症如前房出血、瞳孔括约肌损伤、虹膜根部离断、房角后退、继发性青光眼、晶体半/全脱位、外伤性白内障、玻璃体积血、屈光不正、脉络膜破裂、视网膜脱离甚至眼球破裂等严重  (本文共104页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
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低强度微波辐射对晶状体上皮细胞和晶状体的损伤及对相关调控基因表达的影响

第一部分 低强度微波辐射阻断晶状体上皮细胞周期及对相关调控基因表达的影响【目的】检测不同剂量微波辐射对兔晶状体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells,RLECs)增殖活性及细胞周期的影响,并测定微波辐射后细胞周期调控基因P21~(?)、P27~(?)和c-myc表达量的改变。初步探讨体外培养的兔晶状体上皮细胞对微波辐射损伤的耐受剂量,以及辐射损伤的分子机制。【方法】应用频率2450MHz,功率密度分别为0.10mW/cm~2、0.25mW/cm~2、0.50mW/cm~2、1.00mW/cm~2、2.00mW/cm~2的微波连续辐照体外培养的RLECs 8h,分别用相差显微镜和HE染色观察辐射后细胞形态学的改变;四唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖活性;PI荧光染色后用流式细胞仪检测微波辐射对细胞周期各个时相的影响;Western印迹晰江大李雄科李博士毋位论义—研宪摘要.洲冲年万月名法检测2.OOmw/...  (本文共116页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
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紫外线诱导的人LEC DNA损伤修复机制及抗氧化剂的拮抗作用的实验研究

目的流行病学证据表明紫外线辐射是白内障形成的环境因素之一,长期慢性的紫外线辐射被认为是老年性白内障形成的主要原因,但是,有关紫外线辐射导致白内障的机制还不太清楚。自然光中的紫外线来自太阳光辐射。紫外线对晶状体的影响是长期的,慢性蓄积的氧化损伤过程,透明晶状体存在的防御系统虽然有足够的保护作用,但当积累的效应超过一个临界水平时,不可逆转的损伤就发生了。紫外线对晶状体的损伤机制为:(1)直接光化学损伤。(2)光氧化损伤。光的辐射能导致哺乳动物细胞DNA的损伤,损伤的程度是由波长和细胞的外在环境决定的。UV-C(100~290)射线无生态相关性,因为它能在数量上被地球大气层的氧和臭氧所吸收。而长波UV-B(290~320)和UV-A(320~400)射线可以明显作用于生物。在相对早期与年龄增加有关的氧化损伤,晶状体上皮细胞是一个很好的模型。氧化损伤显示与DNA损伤有关。在光诱导的氧化损伤中,代偿增多的抗氧化系统,如谷光苷肽、过氧化氢酶...  (本文共62页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津医科大学
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靶向毒素DT_(389)-hbFGF的克隆表达及对人晶状体上皮细胞毒性研究

后囊混浊(PCO)是白内障囊外摘除术后引起视力下降的最常见的并发症,目前没有一种方法可常规应用于临床来阻止其发生,Nd:YAG激光后囊切开不仅可增加病人的经济负担,而且其所致的视网膜脱离、黄斑损伤等严重并发症可成为患者再度视力下降的根源。因此阻止PCO的发生比治疗显得更加重要。研究证实:术中残留的晶状体上皮细胞(LECs)增殖、迁徙并合成细胞外基质是PCO发生的主要机制,因此清除LECs是阻止PCO发生的根本。LECs不仅可分泌bFGF还可高表达具有高度亲和力的FGF受体;bFGF可终生在晶状体赤道部诱导上皮细胞分化为晶状体纤维,促进LECs的增殖;LECs受损后释放的bFGF与其表面受体结合可刺激其自身的增殖是PCO形成的重要因素。白喉杆菌外毒素(DT)不仅具有很强的细胞毒性而且其酶活性区、跨膜转运区、细胞膜受体结合区三者在结构上彼此独立,适于基因重组免疫毒素的构建及保持毒性功能。因此,本实验利用基因工程技术保留白喉毒素N端3...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
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急性手机微波辐射对人晶状体上皮细胞DNA的损伤作用及细胞抗损伤反应的实验研究

第一部分急性手机微波辐照对人眼晶状体上皮细胞DNA的损伤和修复及其细胞增殖情况的影响【目的】不同剂量急性手机微波辐射2小时,检测其对体外培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,hLECs)的DNA损伤作用及停止辐照后不同时间段的DNA修复情况,并用BrdU-Kit检测辐照后hLECs的增殖活性,以初步探讨体外培养的人晶状体上皮细胞对手机微波辐射损伤的耐受情况。【方法】体外培养人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,hLECs),分为辐照组和假照组,置于sXc-1800细胞辐照(发射217Hz脉冲调制的1.8GHz微波)系统内连续波辐照2小时,辐照强度(specific absorption rate,比吸收率SAR)分别为1,2,3,4w/kg,假照组为0w/kg,分别于辐照后0、0.5、1、2、4小时进行彗星试  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
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表皮生长因子对体外培养的人晶状体上皮细胞移行和粘附的作用的实验研究

前言白内障囊外摘出术后的后发性白内障(简称后发障)是目前白内障术后导致视力下降的最主要并发症之一。有研究表明,成人白内障术后2年内,有20%~30%的患者因后发性白内障而再度失明,5年内有43%因后发性白内障而再次手术。术后残留的晶状体上皮细胞的增殖和移行可能是形成后发障的主要原因。在白内障囊外摘除术时由于注吸皮质、植人人工晶体等机械性操作,造成晶状体上皮细胞损伤,术后残留的晶状体上皮细胞即发生损伤修复过程,合成并释放多种细胞因子。这些细胞因子在体内与其特异性受体结合,既可单独发挥作用,又可互相影响形成细胞因子网络,从而参与后发性白内障的形成。表皮生长因子(EGF)最初是由Cohen等于1960年从小鼠颌下腺纯化神经生长因子时发现的。分子质量为6045u,由53个氨基酸组成。在继发性白内障、白内障合并视网膜脱离、白内障囊外摘除术后或超声乳化术后无晶状体眼或人工晶体眼的房水中均测出有EGF的存在。EGF作为一种作用广泛的内皮细胞刺...  (本文共58页) 本文目录 | 阅读全文>>