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中华蜜蜂(Apis cerana)毒腺cDNA文库的构建及主要毒蛋白基因表达调控研究

蜜蜂的毒液是由蜜蜂毒腺分泌的多种组分的混合物,富含多种生物和药理活性物质,具有很大的应用前景。蜜蜂主要用它来防御其他动物的入侵和危害。中华蜜蜂是我国特有的蜜蜂资源,长期适应于我国的地理特征和气候条件,在我国年均饲养量约200—300万群,约占总饲养蜂群的三分之一,具有其他蜜蜂种类不可替代的应用价值和资源优势。但其基础研究落后,资源的利用方式十分原始和简单。蜂毒是中华蜜蜂开发利用的重要方面,我们已经对中华蜜蜂毒液内几种主要毒蛋白的基因进行了克隆和体外表达。在此基础上,为全面研究中华蜜蜂毒蛋白的组成和表达情况,本研究构建了中华蜜蜂毒腺cDNA文库,以期从中找出一些对人类健康有重要意义的生理活性蛋白或多肽;同时对溶血肽和磷脂酶A2在蜜蜂体内的表达从基因的拷贝数、转录/转录后水平以及蛋白表达水平三个方面综合进行研究,取得了一些进展,丰富了蜜蜂毒蛋白分泌生物学研究的内容。两种蜜蜂毒液的双向电泳分析和中华蜜蜂毒腺cDNA文库的构建和EST分  (本文共129页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东农业大学
山东农业大学

中华蜜蜂(Apis cerana)毒腺cDNA文库构建和表达序列标签(EST)分析

中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是一种重要的经济昆虫,在国内有大量饲养。蜜蜂毒腺是主要分泌酶、蜂毒肽等的重要器官,目前对其中的大部分蛋白和酶的基因表达与功能分析还不清晰,分子生物学和生物信息学的发展为开展这些研究提供了便利。为了获得中华蜜蜂毒腺的相关基因表达以及毒腺特异表达基因,本试验首先构建了中蜂毒腺的cDNA文库。经测定,文库的滴度大于5×106。借助生物信息学方法,本研究利用EST技术在分子水平上对中蜂毒腺相关蛋白和酶等基因的表达特性进行了分析。随机挑取所构建的cDNA文库阳性克隆1152个,用T3引物进行5’端测序。所得到的序列用phredphrap软件去除载体、接头序列、质量不高以及小于200bp的序列。共得到1121条高质量的cDNA序列。经过phredphrap软件拼装以后,这1121条cDNA序列代表了944条独立EST。经过在NCBI中的蛋白数据库中做BLASTX,即同源性分析以后,发现此944...  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>

福建农林大学
福建农林大学

中华蜜蜂与意大利蜜蜂乙酰胆碱酯酶生物化学性质比较

本文以中华蜜蜂Apis cerana cerana Fabricius和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica Spinola的成年工蜂为研究对象,系统比较了这两种蜜蜂乙酰胆碱酯酶(AChE)的一些生物化学特性及对抑制剂的敏感度,并对其进行了初步纯化。研究结果如下:1 用正交设计试验方法研究了AChE酶浓度、底物(ATCh)浓度、反应体系的pH、反应温度、反应时间5个因素对意大利蜜蜂头部AChE活性的影响。结果表明,除底物浓度对反应有显著影响外(P0.05),但中华蜜蜂胸部AChE的活性分布比例极显著高于意大利蜜蜂(PBuTChATChMeTCh;意大利蜜蜂为BuTChPrTChATChMeTCh。V_(max)显示,中华蜜蜂头部AChE对四种底物水解效率的高低顺序为MeTChATChPrTChBuTCh,意大利蜜蜂为ATChMeTChPrTChBuTCh。两种蜜蜂对四种底物亲和性的差异不  (本文共112页) 本文目录 | 阅读全文>>

陕西师范大学
陕西师范大学

中华蜜蜂(Apis cerana cerana)脑部胚后发育和促性腺激素释放激素相关受体的表达研究

中华蜜蜂(Apis cerana cerana)隶属于膜翅目(Hymenoptera)、蜜蜂科(Apidae)。是最典型的社会性昆虫之一,其高度组织、分工明确的社会形态让其他昆虫相形见绌。作为我国的特有蜂种,中华蜜蜂有着悠久的饲养史。它在维系动植物生态平衡等方面起着极为重要的作用,同时因其具有耐寒、耐热、抗螨、飞行敏捷、嗅觉灵敏、能有效利用当地蜜粉源等特点,在长期的进化过程中与本土大多数植物建立了牢固的“相互适应性”,成为我国养蜂业的重要组成部分。本研究通过形态解剖、免疫组织化学、原位细胞凋亡检测以及原位杂交等技术,对中华蜜蜂中枢神经系统的蕈形体、视觉系统、嗅觉系统的胚后发育过程以及促性腺激素释放激素相关受体在其体内的表达进行了系统的比较研究,探讨了中华蜜蜂脑部结构在发育过程中细胞的增殖和凋亡的特点、细胞的分裂模式以及视觉系统、嗅觉系统在发育过程中如何同社会性生活相适应等问题,并将中华蜜蜂的发育过程同其他动物种类进行了比较,填补...  (本文共171页) 本文目录 | 阅读全文>>

安徽农业大学
安徽农业大学

皖南中华蜜蜂种群数量动态及群体多样性研究

本项目在总结国内外东方蜜蜂种群动态及群体多样性研究进展的基础上,结合皖南山区生态环境,采用昆虫种群生态学及现代分子生物学研究方法,系统研究了皖南山区中华蜜蜂种群数量动态特征及群体多样性,研究结果如下:(1)对皖南山区对中华蜜蜂(Apis cerana cerana Fab.)种群数量动态与结构特征研究结果为:皖南中蜂蜂王产卵力强,分蜂性弱,同一蜂种的不同蜂群的分蜂性也有差异,维持群势大,有效采集时间长,越夏期蜂王停产期短,群势下降不明显,越冬期短,越冬饲料消耗量少,越冬稳定。皖南中蜂蜂王产卵量和种群内蜜蜂数量明显受气候和蜜粉源植物影响,周年分为春季蜂群繁殖期、自然分蜂时期、蜂群越夏期、蜂群秋季更新期和蜂群越冬期,呈现“两高”(春、秋)和“两低”(夏、冬)的变化模式曲线。皖南中蜂性比值为278.5:1~381.2:1,雄蜂呈季节性出现,大多是在春末夏初的分蜂季节里培育雄蜂,种群内年龄组配在不断变化。秋季培育适龄越冬蜂的蜂群,工蜂腺...  (本文共117页) 本文目录 | 阅读全文>>

《农家参谋》2018年23期
农家参谋

中华蜜蜂越冬管理现状与对策分析

做好中华蜜蜂越冬管理的相关工作才能够更好的保障中华蜜蜂在春季进行更好的繁殖,所以中华蜜蜂饲养人员就要分析中华蜜蜂越冬管理过程当中存在的问题,做好中华蜜蜂越冬管理工作,保障越冬前的饲养管理以及越冬期间的饲养管理的质量,还要做好越冬期蜂群出现异常的补救工作,明确中华蜜蜂越冬饲养管理的要点,作者通过分析中华蜜蜂越冬管理存在的问题,提出了中华蜜蜂越冬管理中存在问题的解决方法,阐述了中华蜜蜂越冬管理对策。1中华蜜蜂越冬管理存在的问题1)防寒保暖措施不到位。纵观我国目前中华蜜蜂越冬管理现状,防寒保暖措施不到位问题较为突出,很多的饲养人员对于低温带给中华蜜蜂越冬管理的质量的影响认识不够明确,常常将越冬的蜂群不加遮掩的暴露在室外,一旦室外气温降低过大,容易导致蜜蜂冻死冻伤。2)没有充足的越冬蜂粮。越冬蜂粮数量不足以及质量不佳问题也比较突出。3)没有掌握准确的越冬期。由于不同地区有着不同的气候,所以不同地区的中华蜜蜂开始越冬的时间也不尽相同,然而...  (本文共1页) 阅读全文>>

《新农业》2017年22期
新农业

辽宁地区中华蜜蜂未来发展构想

中华蜜蜂是我国地方优秀蜂种,2006年国家将中华蜜蜂列入《国家级畜禽品种资源保护名录》(农业部第662号公告)。辽宁的中华蜜蜂体色为灰黑色,具有抗寒性强、维持大群、产量高等独特的形态和生产性能,深受广大农民的喜爱。但随着辽宁中华蜜蜂产业的发展,产品销售和资源保护等问题也不断显现,只有向打造品牌、实施龙头带动、普及中华蜜蜂良种、建立中蜂保护区和蜜蜂旅游等方向发展,才能走出一条持续健康的发展之路。1辽宁中华蜜蜂饲养基本情况辽宁饲养中华蜜蜂历史悠久,据调查,辽宁现有中华蜜蜂5万群,主要分布在辽宁东部山区的抚顺、本溪、丹东等地区。2008年原辽宁省蜜蜂原种场(现名辽宁省动物卫生监督管理局兴城办事处)被农业部确定为国家级中华蜜蜂保种场,辽宁省将中华蜜蜂确定为辽宁省畜牧业十大地方优良品种之一,而且发展比较迅速,在良好的市场环境下,农民养中蜂的积极性普遍高涨,发展中蜂饲养已成为山区农民发家致富的一条有效途径。1.1蜂群数量显著增长在各级政府部...  (本文共2页) 阅读全文>>