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海南杂草双生病毒的分子鉴定及病毒致病性研究

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双生病毒能够侵染多种经济作物,并给作物生产造成极大的损失,在我国的云南、广西和广东等省份的作物上已发现了多种双生病毒。为进一步了解双生病毒在我国的分布及危害情况,本论文对侵染海南杂草的双生病毒进行了分子鉴定及致病性研究。从海南儋州表现黄花叶的黄花捻上采集到病毒样本Hn8、Hn40和Hn41,部分序列测定表明,它们为同一种双生病毒。对其中的Hn8分离物进行了DNA-A全长基因组的序列测定,全长为2749个核苷酸(nt)。Hn8与中国胜红蓟黄脉病毒(AJ558120)的相似最高(78%),而与其他双生病毒的同源性较低,表明Hn8是一种新病毒,命名为中国黄花捻黄花叶病毒(Sida yellow mosaic China virus,SiYMCNV)。在SiYMCNV分离物Hn8及Hn40和Hn41中还发现伴随有卫星DNAβ分子,序列测定表明Hn8、Hn40及Hn41的卫星DNAβ分子基因组全长分别为1346 nt,1341 nt和13  (本文共125页) 本文目录 | 阅读全文>>

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我国五种双生病毒的分子鉴定及致病性研究

双生病毒是植物病毒中唯一一类具有孪生颗粒形态的单链DNA病毒,已在多个国家和地区的多种重要经济作物上造成毀灭性危害。在我国的云南、广东、广西、海南和台湾等地的作物及杂草上已相继发现了多种双生病毒。为进一步了解双生病毒在我国的种类、分布及危害,本论文对我国上海、广东和广西地区发生的双生病毒进行了分子鉴定及致病性研究。从上海孙桥农场采集了2份表现为黄曲叶症状的番茄样品(SH1和SH2),利用双生病毒特异性引物PA/PB扩增得到约500 bp片段的相似性为97.4%。随机选择SH2进行全序列测定(登录号AM282874)及检测分析后发现,样品中只含有单组份双生病毒,并且与日本报道的番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leafcurl virus,TYLCV)分离物相似性最高,为99.8%,因此认为SH1和SH2是TYLCV的分离物,TYLCV是一类全世界广泛发生并引起严重危害的双生病毒,但这是我国首次报道有该病毒。从广东省表...  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>

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我国六种双生病毒的分子鉴定及两种病毒的致病性研究

双生病毒是植物病毒中唯一一类具有孪生颗粒形态的单链DNA病毒,已在多个国家和地区的多种重要经济作物上造成毁灭性危害。自20世纪90年代起,我国的云南、广东、广西、海南和台湾等地的作物及杂草上已相继发现了多种双生病毒。为进一步了解双生病毒在我国的种类、分布及危害,本论文对我国江苏、浙江和云南地区发生的双生病毒进行了分子鉴定并对部分病毒进行了致病性研究。从江苏宜兴采集了2份表现黄花叶症状的苎麻样品(J4和J5),从浙江余杭采集了1份表现黄花叶症状的苎麻样品(Z1),利用双生病毒特异性引物PA/PB扩增得到约500 bp的DNA-A部分片段,其核苷酸序列相似性为91.6-99.2%。选择代表性分离物J4和Z1进行全序列测定,结果显示J4和Z1 DNA-A全长分别为2736和2737 nts(登录号FN396969和FN396971)。利用PCR检测到DNA-B组份,J4和Z1 DNA-B全长分别为2717和2719 nts(登录号FN...  (本文共150页) 本文目录 | 阅读全文>>

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双生病毒及伴随卫星DNA之间的互作

本论文对中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)Y10分离物(Y10)和烟草曲茎病毒(TbCSV)Y35分离物(Y35)及其伴随的卫星DNAβ(Y10β及Y35β)分子之间的互作及DNAβ分子的变异进行了研究。将Y35+Y35β、Y35+Y10β、Y10+Y10β及Y10+Y35β分别接种本氏烟、心叶烟及三生烟,Southern印迹分析表明,Y10β及Y35β均可被异源辅助病毒复制,但Y10β或Y35β作为异源DNAβ分子时的积累量明显低于伴随其同源辅助病毒时的积累量。症状观察表明,无论Y10还是Y35伴随同源或异源DNAβ时诱导的症状明显不同,Y10β及Y35β作为异源卫星时与其辅助病毒诱导的症状也不同于与其同源辅助病毒引起的症状,且Y10β伴随异源病毒Y35时致病性更强,Southem印迹显示,病毒及卫星的积累量并不完全与症状严重程度直接相关。当Y10β及Y35β同时伴随Y10或Y35侵染本氏烟及心叶烟时,PCR及Southe...  (本文共152页) 本文目录 | 阅读全文>>

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云南杂草双生病毒的分子鉴定

双生病毒在云南烟草、番茄和南瓜等多种作物上广泛发生,并已造成严重危害。由于双生病毒可能在杂草和农作物之间相互传染,为此我们对云南杂草上的的双生病毒开展了研究。从云南赛葵、胜红蓟和稀硷上采集了39个双生病毒样品,部分序列测定表明,它们由不同病毒侵染。Y160分离自赛葵,全序列测定表明,它与赛葵黄脉病毒(MYVV)的同源性最高,为82.2%。因此它是双生病毒新种,命名为云南赛葵黄脉病毒(Malvastrum yellow vein Yunnan virus,MYVYNV)。MYVYNV伴随有卫星DNA分子,它与MYVV DNAβ的序列同源性最高,为72.3%。序列比较发现MYVYNV可能是由MYVV和泰国番茄黄化曲叶病毒(TYLCTHV)重组形成的。构建了Y160 DNA-A和DNAβ的侵染性克隆。DNA-A单独接种以及DNA-A和DNAβ混合接种均可系统侵染本氏烟,DNAβ对于Y160 DNA-A的侵染不是必需的。DNAβ虽然不是...  (本文共122页) 本文目录 | 阅读全文>>

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广西杂草双生病毒的分子鉴定

双生病毒是植物病毒中唯一的一类具有孪生颗粒形态的单链环状DNA病毒,已在多种重要经济作物上引起危害。我国已从云南、广西等地的烟草、番茄和番木瓜等作物上相继发现了多种双生病毒,并对其基因组结构及变异进行了深入研究。杂草因其种类多、分布广、具有很强的环境适应性,是双生病毒重要的原始寄主或中间寄主,因此对双生病毒的传播扩散、重组变异及进化有极其重要的作用。为了弄清杂草上双生病毒的发生与分布,我们从广西地区杂草上采集了双生病毒样品并对病毒进行了分子检测与鉴定。从5种常见杂草上采集了28株表现典型病毒症状的样本,用双生病毒的简并引物PA和PB进行了PCR检测,将扩增到的约500 bp的片段经过克隆和序列测定表明,22个样本为粉虱传双生病毒,序列比较发现这些病毒分离物至少有5种病毒类型。因此从每种病毒类型中选取代表,共对8个分离物的基因组结构进行了研究。对草龙上的病毒分离物G37和G38的基因组进行全序列测定,G37和G38DNA-A全长分...  (本文共134页) 本文目录 | 阅读全文>>

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云南番茄双生病毒鉴定及烟草曲茎病毒致病分子机理研究

双生病毒是一类具有孪生颗粒形态的植物单链DNA病毒,目前已在多个国家和地区的作物上造成毁灭性危害。近年来,我国华南各省作物上双生病毒病害的发生有逐年加重的趋势。本文对云南番茄上的双生病毒类群以及烟草曲茎病毒(TbCSV)的致病分子机理进行了研究。从云南省采集了23个的番茄曲叶病的样品,TAS-ELISA和部分序列分析发现它们属于不同的种类。测定了四个分离物(Y25、Y41、Y72和Y161)的全序列,同源性比较和进化分析表明,Y25、Y41、Y72和Y161分别属于四种不同的病毒,即中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)、TbCSV、泰国番茄黄化曲叶病毒(TYLCTHV)以及云南烟草曲叶病毒(TbLCYNV)。所有TYLCCNV和TYLCTHV的分离物都发现伴随有卫星DNAβ分子,而属于TbCSV和TbLCYNV的几个分离物都没有检测到卫星的存在。测定了Y25、Y72、Y77和Y79伴随的DNAp的全序列,比较发现,Y25p与其...  (本文共153页) 本文目录 | 阅读全文>>