分享到:

成人嗅神经前体细胞移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究

脊髓损伤修复是目前神经科学研究领域最热门的课题之一。过去十几年来,有关脊髓损伤与再生的实验研究取得了很大的进展,出现了许多新的实验治疗方法与手段,不同程度地促进了动物模型的脊髓修复与功能恢复。但在将这些治疗措施用于临床治疗之前,有关疗效与生物安全性等方面关键问题必须予以考虑或解决。因此,寻找一种既容易获取又具有良好的修复潜能的成人神经前体细胞,用于自体移植治疗脊髓损伤,显得具有特别重要的临床意义。既往实验证实嗅神经上皮存有可替代神经元与支持细胞的内源性前体细胞(基底层细胞),终生具有自我修复能力。因便于取材,又具有良好的自我修复特性,嗅神经上皮可作为通过体外培养获取成人神经干细胞,用于自体细胞移植的独特来源。在过去几年内,我们建立了成人嗅神经上皮前体细胞(ONPs)鼻腔镜活检技术和培养流程。活检的鼻腔嗅上皮组织,经过原代培养,通常有神经球形成。对神经球细胞(NSFCs)进行传代培养与生物学鉴定,证实其具有神经前体细胞的特征,并表  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

大鼠嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究

大鼠嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的实验研究第一部分:新生大鼠嗅球嗅鞘细胞的体外培养目的 探讨新生大鼠嗅球嗅鞘细胞(OECs)的体外培养和纯化方法,并观察其形态学及免疫细胞化学特性,为研究脊髓损伤后神经再生获得丰富OECs来源奠定基础。方法原代培养的方法分离、培养新生大鼠嗅球OECs,比较p75抗体吸附、阿糖胞苷抑制、差速贴壁三种方法纯化效果,根据GFAP免疫细胞化学染色结果统计所得OECs的纯度,同时在相差显微镜下对不同培养时期的OECs的形态进行观察。结果体外培养的新生大鼠嗅球OECs主要为双极或三极细胞,其突起细长。未经纯化则成纤维细胞生长迅速而占据优势,而三种纯化方法中均能使接种14天后OECs纯度均在75%以上。p75抗体吸附法和阿糖胞苷抑制纯化效率略高于差速贴壁法。结论 新生大鼠嗅球OECs的原代培养中细胞纯化是必要的;在脊髓损伤再生研究中,较之p75抗体吸附、阿糖胞苷抑制,差速贴壁法是一种简单、经济、实用的OECs纯化方...  (本文共125页) 本文目录 | 阅读全文>>

第三军医大学
第三军医大学

树突细胞及神经干细胞/前体细胞联合移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究

脊髓损伤(Spinal Cord Injury, SCI)造成明显的功能丧失和神经细胞的死亡。虽然脊髓内源性神经干/祖细胞(Neural Stem/Progenitor Cells, NSPCs)位于于中央管周围的室管膜区,能够增殖和分化成神经元和神经胶质,但哺乳动物脊髓内源性神经干细胞/祖细胞的再生能力似乎是有限的,并且其分化形成新的细胞的数量较少。胚胎及新生哺乳动物的脑存在大量的NSPCs,有自我更新及向神经元和神经胶质细胞的能力。由于这些优势,外源性NSPCs常常被用于脊髓损伤修复治疗研究,许多实验表明NSPCs移植能够明显改善神经功能。体内移植NSPCs,由损伤区向周围迁移,存活并向星形胶质细胞、少突胶质细胞和神经元分化,最后整合入宿主组织参与损伤脊髓的修复。树突状细胞(dendritic cell, DC)是专职的抗原提呈细胞,在激发和调节适应性免疫反应中起关键作用。Schwartz等提出了神经变性状态下“保护性自身免...  (本文共75页) 本文目录 | 阅读全文>>

大连医科大学
大连医科大学

滋补脾阴方药保护谱系限制性神经前体细胞移植治疗脊髓损伤的研究

脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是骨科领域致残率、死亡率最高的创伤之一,是交通、工矿事故及运动意外中常见的损伤。近年来,神经干细胞(neural stem cell, NSC)移植成为SCI截瘫治疗的研究焦点之一。但最近国外有研究表明,将体外悬浮方式培养的大鼠胚胎NSC移植入成鼠损伤脊髓后,移植细胞只能分化成星形胶质细胞;并认为这是由于宿主损伤脊髓内环境不支持NSC向神经元祖细胞分化所致,但损伤脊髓却允许谱系限制性的神经元前体细胞(neuronal-restricted precursor cell, NRP)和胶质前体细胞(glial-restricted precursor cell,GRP)的存活及分化。贴壁方式培养的神经前体细胞主要由NRP/GRP组成,于是贴壁培养手段重新受到国外一些学者的重视。然而,究竟何种类型细胞更适于SCI移植治疗,目前尚无定论。本实验比较了神经前体细胞在悬浮与贴壁两种培...  (本文共91页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军第一军医大学
中国人民解放军第一军医大学

大鼠脊髓损伤后组织基因表达谱动态变化的研究

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是骨科临床工作中常见的伤病,致残率很高。但迄今为止,有关脊髓损伤的研究尚无突破性进展,临床上对脊髓损伤患者的治疗收效甚微,绝大多数患者仍无法逃脱肢体伤残的命运。目前的研究一般将脊髓损伤分为原发性及继发性损伤两个阶段,前者是指脊髓在暴力作用瞬间所受伤害,这是依客观而定,无法随主观改变的一个阶段;后者系在此基础上发生的一系列复杂的生理生化过程,进一步加重了原有的组织损伤,导致了脊髓损伤的难治性。目前尽管存在着多种理论或假说,但它们都只是从某一个或几个方面来阐述继发性脊髓损伤的机制,虽有不同作者提出了许多相应的实验性治疗措施,其效果是有限的,尚无实质性的突破。究其原因,可能是研究方法、研究对象的局限性与疾病发展过程中多因素参与的复杂性之间的矛盾所致,以上所述的各种理论可能是疾病发生过程的各个方面,它们应该构成一个相互联系的有机整体,而以整体的观念来探讨继发性脊髓损伤的发生机制,可...  (本文共68页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

血管内皮生长因子在损伤脊髓中的表达及其对脊髓损伤的治疗作用

第一部分 急性损伤对大鼠脊髓血管内皮生长因子及其受体表达的影响目的 了解血管内皮生长因子(VEGF)及其两个受体(Flt-1、Flk-1)在急性损伤后的大鼠脊髓中表达的动态变化。方法 采用改良Allen氏重量打击法大鼠急性脊髓损伤模型,用免疫组织化学方法观察了急性损伤后大鼠脊髓VEGF和Flt-1、Flk-1表达的动态变化。结果 急性损伤12h VEGF即可在大鼠脊髓软脊膜、脊髓内的血管内皮细胞、胶质细胞和巨噬细胞内表达,24h达高峰,并持续到3d,7d时开始下降。Flt-1、Flk-1在大鼠脊髓损伤后12h表达上调,24h达高峰,7d时开始下降。表达细胞主要为神经胶质细胞,其次为血管内皮细胞和巨噬细胞。Flk-1表达细胞比Fit-1更多见。结论 急性损伤可上调VEGF和Flt-1、Flk-1在脊髓血管内皮细胞、胶质细胞和巨噬细胞内的表达,VEGF和Flt-1、Flk-1可能通过保护血管内皮细胞和促进血管内皮细胞生长对...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国医科大学
中国医科大学

脊髓源性神经干细胞移植对脊髓损伤后功能恢复的意义

目的脊髓损伤后神经功能的恢复是目前的研究热点,神经干细胞(neural stem cells, NSCs)移植可有助于脊髓功能的恢复,但目前的研究多集中在纹状体和皮层的神经干细胞上,对脊髓源性神经干细胞的研究为数不多。该实验对胚胎脊髓源性神经干细胞的培养、移植及对脊髓功能恢复的作用做了研究。材料和方法1 实验动物及其分组:选择中国医科大学实验动物部SD大鼠160只,体重200-250克,成年雌性。许可证号:SCXK(辽)2003-0009,大鼠随机分成4个组,40只为移植对象,40只为损伤对照组,40只为假手术组,40只为空白对照组。2 脊髓损伤动物模型的制备:120只大鼠用2%戊巴比妥钠腹腔注射全麻后置于动物固定架上,备皮,消毒,于T_(10-12)水平行椎板切除术。做15-20mm的皮肤切口,向两侧分离背肌暴露下胸段T_(8-13)棘突,咬除T_(10)和T_(11)间的椎板,暴露硬膜,用手术刀片于T_(11)脊柱水平横切此...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>