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永生化人胚胎肝细胞系的建立及肝细胞移植的实验研究

各种原因导致的肝功能衰竭是一种严重威胁人民生命健康的终末期肝病,传统的治疗方法疗效差,患者存活率低。原位肝移植技术的开展使肝功能衰竭的治疗有了明显的突破,目前已成为挽救肝功能衰竭患者的主要手段,但由于技术复杂、费用昂贵以及供肝短缺等诸多因素,肝移植的广泛开展仍受到很大限制,我国每年仍有逾10万不同病因所致肝功衰竭的患者无法得到有效治疗。近年研究显示,肝细胞移植可以作为一种有效的替代治疗手段,帮助部分肝衰竭患者渡过危险期等待肝移植,在部分肝衰竭患者肝细胞移植甚至可以直接取得令人满意的疗效,因而为肝衰竭的治疗提供了一种新的选择。肝细胞移植技术的广泛临床应用需要理想的肝细胞材料,动物肝细胞或者各种传代人源肝细胞系由于存在病毒感染及潜在的致瘤危险,目前仅用于人工肝的生物反应器,无法直接输入人体进行肝脏替代治疗。原代异体或自体人源性肝细胞虽然较为理想,但难以在体外长期培养、快速扩增和长期保存,且来源受限,无法满足临床需要。为此本课题采用S  (本文共107页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

骨髓干细胞诱导分化的肝细胞移植对大鼠肝切除术后肝衰治疗作用的实验研究

研究背景和目的:原位肝移植(orthotopic liver transplantation, OLT)是目前治疗急性肝功能衰竭、终末期肝病和代谢性肝病最有效的方法,但由于供肝缺乏等原因在临床广泛开展仍有一定的困难。肝细胞移植(hepatocyte transplantation,HCT)与原位肝移植比较,具有价廉、操作简单、可重复进行、移植细胞可以体外培养增殖及冷冻保存,还可以进行基因修饰等优点。研究发现HCT可以纠正先天性肝脏代谢缺陷、辅助肝功能支持和替代受损肝实质。随着HCT在理论与技术方面不断发展,已逐渐呈现出替代OLT治疗肝病的潜力,当前肝细胞来源短缺、肝细胞移植后增殖能力差及免疫排斥等问题是限制HCT发展的主要原因。骨髓干细胞(bone marrow stem cell, BMSC)可以横向分化为肝前体细胞和肝细胞,并具有取材容易;增殖能力强;体外培养、传代及扩增容易;可以直接取材于患者本人,能避免移植后免疫排斥反应...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

第三军医大学
第三军医大学

小鼠胚胎干细胞向肝前体细胞诱导分化及其对实验性急性肝衰竭的移植治疗研究

背景在各种干细胞(stem cells, SC)的应用研究中,胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES细胞)由于具有发育全能性、种系传递能力(形成嵌合体)以及便于进行遗传学的基因改造而最引人注目,发展最快,且ES细胞作为研究的基本工具和潜在的细胞治疗来源继续强烈吸引着人们的注意力。在国外,1981年英国的Evans等和美国的Martine分别成功地分离和体外培养了小鼠ES细胞,建立了小鼠ES细胞系,而且证实了该ES细胞系具有发育全能性,能在体外诱导分化为各种类型的组织细胞。特别是继1998年James Thomson博士建立人ES细胞系之后,世界上其他许多科学家也相继成功地从囊胚内细胞团分离并建立了ES细胞系。目前,在NIH注册的ES细胞有83个系,分别来自不同的国家。据报道,ES细胞目前已有在体外培养两年,连续传代达450次以上,而胚胎生殖干细胞传代次数最多可达70~80次。更令人兴奋的是,科学家们已经开始...  (本文共147页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
中南大学

同种异体肝细胞移植对大鼠肝脏纤维化的影响

目的:在动物试验及临床研究中,同种异体肝细胞移植(Hepaocyte Transplantation,HTx)已经被证实对许多肝病的治疗有效。其可以促进肝脏的再生、纠正肝脏代谢性疾病、并能延长急性肝功能衰竭动物的生存期。为了扩大肝细胞移植的适应症,深入对其机制的认识,本研究采用动物实验方法探讨了HTx对肝脏最常见的病理类型——肝纤维化的影响。研究方法:本研究以肝纤维化大鼠为研究对象,将长效示踪剂CM-DiI标记的新鲜异体肝细胞经脾脏移植入受体大鼠的肝脏内。于术后1,2,7,14天收集肝脏及无血小板血浆标本。对肝脏标本的分析,本研究应用非线性光学激光共聚焦显微镜技术。该方法能够在不染色的前提下对肝脏切片标本中的胶原纤维进行灵敏客观的成像。结合免疫荧光染色及应用不同波长的激发激光,本研究对同一标本的肝细胞、胶原纤维、肝星形细胞活性、移植细胞的植入情况同时进行观察。由该方法得到的肝内胶原分布图应用计算机辅助的定量分析技术进行定量。由于...  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

《肝脏》2019年08期
肝脏

肝细胞移植的临床应用前景

肝细胞移植经过50多年的基础与动物实验研究,被证明可有效解决肝移植相关问题,包括器官短缺和术后肝功能异常等。现阶段,临床上一般采用同种异体肝细胞移植治疗遗传代谢性肝病,但成功率...  (本文共2页) 阅读全文>>

权威出处: 《肝脏》2019年08期
《大家健康(学术版)》2014年03期
大家健康(学术版)

肝细胞移植临床应用

各种原因所致的急慢性肝衰竭仍然具有很高的死亡率。目前在临床试验中已证明肝细胞移植可以有效的改善...  (本文共2页) 阅读全文>>