分享到:

COC1与COC1/DDP的比较基因组杂交研究及COC1/DDP耐药机制及逆转的研究

目的卵巢癌在女性生殖器恶性肿瘤中的发病率占第三位,但死亡率却居第一位,治疗方法主要有肿瘤细胞减灭术和以铂类为基础的联合化疗,但由于卵巢肿瘤细胞对化疗药物耐药,影响其疗效,导致卵巢癌预后不良,其五年生存率始终徘徊在30%左右。因此对卵巢癌耐药发生机制的研究及寻找新的低毒性耐药逆转剂关系到化疗疗效,已经成为国内外学者研究的热点。我们采用比较基因组杂交方法,探讨人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP及其药物敏感细胞株COC1在基因组DNA水平上可能存在的差异,以及这种差异在肿瘤耐药性产生中的意义;探讨COC1/DDP和COC1中凋亡相关基因及凋亡相关蛋白的表达与人卵巢癌顺铂耐药的关系;探讨姜黄素对耐药卵巢癌细胞增殖、凋亡及对顺铂敏感性的影响及机制,为临床应用姜黄素治疗难治性卵巢癌提供实验依据。材料与方法卵巢腺癌COC1细胞株及其顺铂耐药株COC1/DDP均由武汉大学典型培养物宝藏中心提供。二者均用含10%小牛血清的RPMI-1640完  (本文共70页) 本文目录 | 阅读全文>>

河北医科大学
河北医科大学

MicroRNA在耐药及敏感卵巢癌细胞系中的差异表达及microRNA-30a-5p在卵巢癌耐药中的作用

在女性常发的生殖器恶性肿瘤中卵巢恶性肿瘤的发病率较高,其中85~90%为上皮性卵巢癌,对女性的身心健康造成了严重的威胁。病人的5年生存率处于30~40%的范围内,由于早期的卵巢癌均没有明显的诊断指标,并且该疾病极易发生早期侵袭及转移、病人对化疗药具有耐药性,使其在女性所有恶性肿瘤中的死亡率排列第一。目前临床上治疗该病的规范化疗法为联合使用肿瘤细胞减灭术与术后使用紫杉醇和铂类等药物化疗,但铂类药物涉及的耐药性问题也值得关注。卵巢癌病人产生铂类药物耐药性的过程需要多种因素相互作用,通过研究micro RNA一方面能够从一定程度上阐述这种生物学效应,另一方面还有助于临床上预测、或干涉耐药性,microRNA除了能有效的调节细胞的生长、增殖、应激、凋亡及脂肪代谢等作用,体外研究结果同样表明在卵巢癌耐药机制中microRNA扮演着重要的角色。本实验初步的探讨了卵巢癌产生耐药性的主要机制,分析microRNA在该过程中扮演了重要的角色,以期...  (本文共109页) 本文目录 | 阅读全文>>

《第三军医大学学报》2009年21期
第三军医大学学报

葡萄籽原花青素对人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP在体外的增殖抑制作用

近年来,葡萄籽来源的原花青素(grape seed proan-thocyanidin extract,GSPE)的抗肿瘤活性已有大量的研究,发现GSPE在体外对卵巢癌SKOV3细胞有增殖抑制作用[1,2],但对卵巢癌耐药细胞株是否有作用目前尚少报道。本研究通过体外实验将GSPE与卵巢癌顺铂耐药细胞(COC1/DDP)共同培养,观察其作用,并初步探讨其作用机制,为耐药性卵巢癌的临床治疗提供实验依据。1材料与方法1.1材料葡萄籽提取物购于天津市尖峰天然产物研究开发有限公司(用双蒸水配成20mg/ml的母液,一次性滤器抽滤,4℃保存),卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP,购于重庆医科大学超声研究所,标准胎牛血清购于TBD公司,Western blot配胶试剂盒购于碧云天生物工程研究所,Caspase-3(H-277):SC7148抗体购于北京中杉公司,溴化噻唑蓝四唑(MTT)等常规试剂均由重庆医科大学基础研究所提供。1.2方法1.2....  (本文共4页) 阅读全文>>

《重庆医学》2011年20期
重庆医学

川芎嗪对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的逆转作用研究

肿瘤化疗新的治疗手段中,耐药逆转剂是一类很有实用价值的新型药物,它们能增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,从而提高药物疗效[1]。顺铂(cisplatin,DDP)为一广谱、高效抗癌药,对卵巢癌、睾丸癌、头颈部癌及肺癌均有较高疗效,但由于耐药性的产生使其不能发挥应有的作用,常常导致化疗失败[2-3]。因此,提高卵巢癌的化疗敏感性,降低化疗耐药尤其是对最常用的化疗药物顺铂的耐药性是改善临床预后的关键[4-5]。本研究采用人卵巢癌细胞株COC1为诱导对象,采用逐步递增DDP浓度、间歇作用的体外诱导法,建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP,并研究川芎嗪对COC1/DDP顺铂耐药性的逆转作用及其机制。1材料与方法1.1药物与试剂川芎嗪(tetramethylpyrazine),无色针状结晶,纯度大于或等于98%,由上海楚柏实验室设备有限公司提供。精确称取川芎嗪100 mg,溶于10 mL单RPMI-1640培养液,以0.22 nm超滤...  (本文共4页) 阅读全文>>

《实用妇产科杂志》2005年05期
实用妇产科杂志

拓扑替康诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP凋亡的研究

凋亡是由基因控制的细胞自我消亡过程,作为一种细胞的最基本生命活动,在机体的许多生理病理过程中起重要作用。很多化疗药物除通过相应靶点直接作用外,也可通过诱导细胞凋亡来杀伤肿瘤。新近研究表明肿瘤细胞对凋亡的耐药是肿瘤多种药物耐药的一个新机制[1],肿瘤细胞对化疗药物耐受的实质是后者不能活化其凋亡途径。拓扑替康(topotecan,TPT)是一种新型的抗肿瘤药物,已被美国FDA批准应用于卵巢癌的二线治疗。我们在体外试验中发现TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株有强烈的促凋亡作用,本实验对其促凋亡的内在分子机制进行了探讨。1材料与方法1.1卵巢癌细胞系人卵巢腺癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP及其顺铂敏感株COC1均引自中国典型培养物宝藏中心,耐药株在实验前无药培养2周后使用,接种于含10%小牛血清的RPMI-1640培养基,置于37℃,5%CO2培养箱中培养。1.2药品与试剂TPT购自贵州汉方制药有限公司;顺铂(DDP)购自山东齐鲁制药厂;R...  (本文共4页) 阅读全文>>

重庆医科大学
重庆医科大学

葡萄籽原花青素对人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP增殖抑制作用及机制研究

目的观察葡萄籽来源的原花青素(GSPE)对人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP的增殖抑制作用,并初步探讨其机制。方法(1)在第一部分实验中,细胞培养细胞形态观察,HE染色观察细胞形态变化,MTT法检测不同浓度葡萄籽来源的原花青素(0、20、40、80、160、320μg/ml)不同时间(24、48、72h)对COC1/DDP的增殖抑制作用,测定抑制率。(2)在第二部分实验中,流式细胞仪和TUNEL检测各浓度GSPE作用后细胞凋亡情况,Western-blot和RT-PCR检测细胞内Caspase-3, bcl-2,bax基因的表达情况。结果经GSPE作用后,COC1/DDP细胞体积变小,边缘皱缩,胞浆内颗粒物质增多;HE染色观察发现GSPE能引起明显的细胞凋亡形态改变,在相同作用时间下,药物浓度越高,形态改变越明显;经MTT试验和细胞生长抑制率测定,GSPE对COC1/DDP有明显的增殖抑制作用,而且这种抑制作用随着其浓度的增大和作...  (本文共42页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东大学
山东大学

丙戊酸增强人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP对顺铂敏感性的研究

研究背景、目的化疗耐药是目前恶性肿瘤治疗中急需解决的难题。卵巢癌对化疗的耐药性是影响卵巢癌患者五年生存率的一个重要因素。不少逆转剂(如维拉帕米、三苯氧胺等),由于达到逆转作用时所需的剂量对人体产生明显的毒副作用,因此限制了它们的临床应用。国外报道组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histon-deacetylase inhibitors, HDACIs)具有诱导肿瘤细胞分化、细胞周期阻滞和凋亡,逆转转移性肿瘤的恶性表型,以及增强放化疗敏感性等生物学效应。HDACIs对放化疗增敏作用的机制非常复杂,至今还未完全阐明。丙戊酸(valproic acid, VPA)是临床上被广泛应用的广谱抗癫痫药,最近发现其具有抑制HDAC活性的作用,因其半衰期长、生物利用度高、有效血药浓度低、毒副作用小等优点,而显示出良好的临床应用前景。本研究旨在探讨丙戊酸是否可以增强卵巢癌耐药细胞COC1/DDP对顺铂的敏感性并初步探讨其增敏的可能机制,并为临床用药提供理...  (本文共50页) 本文目录 | 阅读全文>>