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外源性IL-10、TGF-β1对大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的影响

第一部分 大鼠节段性小肠移植模型的建立目的 自1971年Monchik成功建立大鼠小肠移植模型以来,经过多年来的改进,大鼠小肠移植成为小肠移植实验研究最常用的动物模型,然而大鼠小肠移植是一项难度较大的实验外科技术,完成稳定的模型需要一定的经验和手术技巧。本实验拟建立稳定的大鼠节段性小肠移植模型。方法 手术要点如下:取供体小肠长约20cm,供应血管:动脉为带部分腹主动脉段的肠系膜动脉,静脉为门静脉。供体手术:通过结扎切断肾动脉和腰动脉游离肠系膜根部的腹主动脉,全身肝素化后4℃肝素林格氏液原位灌洗小肠至小肠颜色变白,尽可能缩短热缺血时间。动脉由带肠系膜动脉和部分腹主动脉的血管袖组成,门静脉在其分支上方切断,取下小肠,修剪。受体手术:游离下腔静脉和腹主动脉,并在左肾血管的下方用血管夹阻断。供体的门静脉端侧吻合与受体的下腔静脉,然后动脉端侧吻合。移植小肠的两端均外置,在腹壁造瘘,关腹。血管吻合在放大10倍显微镜下进行。结果 本实验分2个  (本文共86页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京医科大学
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CTLA4Ig局部转基因治疗大鼠小肠移植急性排斥实验研究

一、大鼠同种异体在体异位节段小肠移植模型的建立目的 为研究抗小肠移植排斥治疗提供良好的动物实验模型。方法 选用大鼠进行同种异体异位节段性小肠移植。重建供肠血管采用腹主动脉-肾下腹主动脉吻合以及门静脉-肾下下腔静脉吻合。结果 共施行96例移植手术,模型稳定后的56例小肠移植5天成活率为85.71%。结论 本模型制作成功率较高、适合小肠移植排斥研究。二、大鼠移植肠局部CTLA4Ig基因转染的可行性研究目的:探讨CTLA4Ig基因能否在移植小肠局部转染表达。方法:移植前经肠系膜上动脉给供肠灌注脂质体包裹的CTLA4Ig cDNA重组质粒,应用免疫组织学及逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)观察移植小肠中CTLA4Ig转基因产物的表达。结果:免疫组织学及RT-PCR结果显示在移植后48h移植小肠中有大量CTLA4Ig转基因产物的表达。结论:经肠系膜上动脉体外灌注脂质体包裹的CTLA4Ig cDNA重组质粒可有效转染移植小肠。三、C...  (本文共137页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津医科大学
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大鼠原位小肠移植术后早期肠运动功能障碍的机理研究

目的:为探讨小肠移植术后早期移植肠运动功能障碍的机理,明确COX-2在大鼠早期移植肠功能障碍中的作用和机制,了解早期移植肠运动功能障碍的表现,同时寻求有效的治疗方法。方法:本课题利用显微外科技术,建立了大鼠原位全小肠移植模型。为了避免免疫排斥和抗排异药物对移植物的复杂影响,采用同系大鼠(BN→BN)间移植。在稳定的小肠移植模型基础上,采用了RT-PCR的方法观察供肠及术后早期不同时段—术后0h、术后12h、术后24h和术后48h移植肠肌层中炎症反应的关键调控因子—COX-2 mRNA的表达情况。并采用LAB-SA免疫组化染色法了解COX-2蛋白的表达及其在肠肌层中的细胞定位,本课题也首次使用透射电子显微镜观察移植肠肌层的变化,以期了解早期移植肠运动功能障碍的机理。同时结合对正常小肠和48h移植肠肌条机械活动的体外试验,在体小肠传输实验和移植肠运动功能的放射学评价,明确早期移植肠运动功能障碍存在的特征。最后通过小肠传输实验观察了具...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
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TGF-β1修饰未成熟树突状细胞在诱导大鼠小肠移植免疫耐受中的实验研究

器官移植在治疗某些终末期疾病上取得了巨大的成就,成为医学界令人瞩目的领域之一,但组织器官移植后排斥反应等始终是困扰人们的难题。在防治移植排斥的研究和临床实践中,强有力的免疫抑制剂对于保持移植物的存活状态起到了举足轻重的作用。但是,大量免疫抑制剂的使用,除本身诸如升高血压、肝肾毒性等毒副作用外,随着用药时间的延长,免疫抑制剂所引起严重的机会感染和恶性肿瘤的发生,以及移植器官过早失功等矛盾亦渐渐突出。因此,当今器官领域所面临的最大难题是如何诱导移植免疫耐受,防止移植物排斥。近年来,随着对抗原提呈细胞(APC)特别是树突状细胞的深入研究,发现树突状细胞不仅是最有效的抗原提呈细胞而且树突状细胞也是唯一能激活初始T细胞的抗原提呈细胞,因而调控或干扰DC致敏途径有可能诱导免疫耐受,延长移植物存活时间,同时新的免疫因子的发现以及体外培养树突状细胞技术的成熟,用基因修饰的树突状细胞诱导移植免疫耐受成为可能。而TGF-β 1是一种强效免疫抑制因子...  (本文共127页) 本文目录 | 阅读全文>>

第四军医大学
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活体小肠移植的临床及基础研究

第一部分 活体小肠移植的临床研究目的 施行国内首例临床活体小肠移植。方法 受者男性,18岁,因短肠综合征而接受小肠移植。供体男性,44岁,为受体之父。取供体回肠末段150cm,移植肠血管与受体肾下腹主动脉、下腔静脉吻合,移植肠近端与受体空肠近端行端端吻合,移植肠远端与受体空肠远端行端侧吻合,移植肠末端10cm造口作为观察窗。免疫抑制方案为FK506、骁悉、强的松龙。结果 至今患者健康生存6年,自由进食,并参加工作,成形排便,每日一两次,体重维持在56~58kg,血色素在120g/L以上,白浆总蛋白、白蛋白正常。D-木糖吸收试验,尿中排出率在28%,FK506血药浓度维持在5.0-6.0ng/L,吸收功能稳定。全消化道钡餐检查,肠蠕动良好,无狭窄性改变。结论 活体部分小肠移植是治疗短肠综合征的一种理想方法。第二部分 细胞因子与小肠移植急性排斥反应相关性研究目的 观察我国首例活体部分小肠移植患者围手术期及急性排斥反应期间相关细胞因子...  (本文共99页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津医科大学
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iNOS对移植大鼠小肠运动功能及排斥反应作用的研究

探讨实验性小肠移植术后诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)对移植肠运动功能的影响及在排斥反应中的作用,并观察L-N~6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸(L-NIL)、青藤碱(sinomenine, SIN)对iNOS的阻断作用。第一部分 大鼠小肠移植模型的建立目的:建立稳定的原位及异位大鼠小肠移植模型。方法:利用显微外科技术,构建大鼠小肠移植模型。结果:实验阶段施行原位小肠移植47次,异位移植55次,手术成功率分别为85.10%(40/47)、87.27%(48/55)。结论:经过短期的显微外科训练,可建立稳定的原位及异位大鼠小肠移植模型,为进一步研究移植免疫反应、移植肠功能奠定良好的基础。第二部分 iNOS在同系大鼠移植肠组织中表达的研究目的:检测同系大鼠异位小肠移植手术不同时段移植肠iNOS的表达。方法:按实验过程分为8组,包括正常小肠组(开腹后切取)、冷保存供肠组以及...  (本文共117页) 本文目录 | 阅读全文>>