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以毛细管电泳为基础的蛋白组分离技术初步研究

本研究以发展基于二维CE 技术的复杂蛋白质分离方法为目标,采用特殊设计的中空纤维型接口,构建了2D CIEF-CGE 和2D CIEF-CZE 分离平台。在2D CIEF-CGE 分离平台上对血红蛋白异构体加以研究,采用动态聚焦和反向EOF 技术构建的2D CIEF-CZE 分离平台也被用于核糖核酸酶研究,展示了新型2D 分离系统独特的浓缩作用及高分离能力。通过对具有极端等电点蛋白质在pH 梯度中的电泳情况的综合考察,采取“预建梯度+部分进样”技术建立了一种新型CE 分离模式—“pH 梯度驱动电泳”(PGDE,pH gradient driving electrophoresis)。对蛋白质在PGDE 中输运特征加以理论研究,并结合CIEF 方法分离鸡卵清蛋白样品的实验结果,指出了完善具有极端等电点蛋白质分离分析方法的可能策略。为了克服等电聚焦缓冲溶液中添加载体两性电解质导致的缺陷,制备了“整体柱型固定化pH 梯度”(M-IPG  (本文共137页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国科学院大连化学物理研究所
中国科学院大连化学物理研究所

临床毛细管电泳的研究

本论文以临床医学检验中涉及到的主要三大类物质(内源性小分子、核酸和蛋白质)为研究对象,以开发毛细管电泳临床应用为目的而进行了较为系统的、有一定覆盖面的毛细管电泳方法发展和应用研究。以人类主要致死疾病肿瘤的研究为目标,以肿瘤标志物为研究对象,首次建立了毛细管电泳技术检测血清唾液酸的方法,对72例不同类型、不同分期的肿瘤病人血清唾液酸进行了分析研究,并和30例正常样本分析结果的对照表明该方法具有简便、灵敏,无需衍生等的独特优势,有可能发展为临床上进行肿瘤早期诊断、选择治疗方案、监测病情、判断预后等方面的有效手段。以毛细管无胶筛分电泳理论为基础,发展了一种新的无胶筛分介质,首次将其应用于短串联重复序列标记物GATA62A11、D4S1563和DSPP的多态性检测,并对一个Ⅱ型—牙本质生长不全家系进行基因连锁分析。成功地对致病基因进行了初步定位,为进一步克隆致病基因,进而实现临床上疾病的基因诊断奠定了基础。以分子间相互作用理论为依托,以...  (本文共114页) 本文目录 | 阅读全文>>

沈阳药科大学
沈阳药科大学

毛细管电泳基础理论与方法学及应用研究

毛细管电泳技术以其高效、快速、低实验消耗等优点,受到了世界范围的广泛重视,其应用得到了广泛深入的发展。本论文对毛细管电泳的基础理论、毛细管电泳的定量方法、毛细管电泳在手性药物的拆分方面、毛细管电泳应用于中药指纹图谱以及微全分析系统在药物分析中应用进行了较深入的研究。全文由六章组成。第一章对毛细管电泳发展的历史和毛细管电泳的分离模式进行了简要地论述。对非水毛细管电泳和亲和毛细管电泳技术进行了简单地介绍。论述了影响电渗速度的因素,提出了毛细管电泳分离因素相关图。介绍了CE-MS的相关进展,并对微全分析系统简史进行了回顾。第二章对毛细管区带电泳(CZE)分离模式中溶质系统的能量变化进行了研究,提出了溶质分离自由能ΔG_(sep)、混合自由能ΔG_(mix)、整体动能增量Δ_T、整体势能增量ΔU和溶质能量淨增值ΔE,以及表观作功时间t_(eff),分离功份额r和单峰能耗W_0等概念,并以实验证实了各项的变化规律。本章以质子理论为基础,将...  (本文共136页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

毛细管电泳在药物分析中的应用研究

毛细管电泳是近年来发展最快的一种分离分析新技术。它具有高效、快速、微量、灵敏度高、实验经济、应用面广等特点。在化学、药学和生命科学等领域均有广泛的应用。本文主要采用四种毛细管电泳操作模式即毛细管区带电泳、胶束电动毛细管色谱、亲和毛细管电泳和毛细管电色谱开展药物方面(中草药、中成药、生物样品、手性药物)的应用研究。本文包括五章。第一章是毛细管电泳综述。分别介绍了毛细管电泳基本原理;毛细管电泳的类型、特点和发展方向;毛细管电泳在药物分析中的应用(中药生药成分分析、其它非手性药物分析、手性药物分析); 毛细管电泳在药物与蛋白质相互作用方面的应用。第二章是胶束电动毛细管色谱法用于五味子酯甲的检测及齐墩果酸和熊果酸异构体拆分的研究。首先,研究了胶束电动毛细管色谱同时分离和测定女贞子中齐墩果酸和熊果酸异构体含量的新方法;确定的最佳缓冲溶液是15 mmol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)、15 mmol/L 硼砂(Na2B4O7)、10 m...  (本文共159页) 本文目录 | 阅读全文>>

华东师范大学
华东师范大学

毛细管电泳—安培检测联用技术及其应用研究

毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)是近二十年来发展最快的分离分析技术之一,它将分离柱效提高到上百万理论塔板数,进样量也从微升水平进入纳升水平,其研究和应用涉及环境分析、药物分析、生化分析等几乎所有的分析化学领域。但毛细管电泳较小的进样量和极细的毛细管通道内径也给检测也带来了困难。紫外、激光诱导荧光、质谱等各种检测方法都具有一定的优点,但往往存在仪器比较昂贵、衍生化步骤烦琐等缺点。电化学检测中的安培检测技术,具有比紫外检测更高的灵敏度,且仪器简单、价格成本低、线性范围宽、操作简便,因而其与毛细管电泳联用后在分析化学领域得到了广泛的研究和应用。同高效液相色谱分离相比,毛细管电泳在分离效率和仪器等方面有明显的优势。但由于毛细管电泳进样量远远小于液相色谱,利用紫外或荧光检测时光程很短,导致浓度检测灵敏度较低,不能满足有些痕量分析的要求。利用毛细管电泳本身的一些特殊性质,通过改变其进样和分离时的一些条件...  (本文共121页) 本文目录 | 阅读全文>>

《分析化学》2013年05期
分析化学

基于短毛细管的高速毛细管电泳系统的研究进展

1引言20世纪90年代,Jorgenson和Monnig[1]在传统常规毛细管电泳(CE)系统的基础上建立了高速毛细管电泳(High speed capillary electrophoresis,HSCE)系统。常规CE系统通常使用20~100 cm长的石英毛细管作为分离通道,分离场强一般小于500 V/cm,进样体积为1~10 nL。在小于30 min的分析时间内,可以获得每米数十至数百万塔板数的高分离效率。HSCE系统则通过缩短毛细管长度(500 V/cm),将分析时间缩短至秒级甚至毫秒级(100 s),提高分离速度。此时,由进样引起的样品区带展宽是除了轴向扩散以外导致区带展宽的最重要因素[1,2]。因此,在HSCE系统中,若要使分离效率仍然保持在每米数十万至上百万塔板数,形成一段小于100μm的狭窄的初始样品区带(相应的进样体积为皮升级至亚纳升水平)至关重要。常规CE的进样方法难以满足HSCE系统对亚纳升级进样的要求,因...  (本文共8页) 阅读全文>>