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ASPERGILLUS AWAMORI Y8木聚糖酶的酶学特性及其在饲料中的应用

木聚糖酶以内切方式作用于木聚糖分子中β-1,4-木糖苷键,可将木聚糖水解为木二糖和木二糖以上的低聚木糖,以及少量木糖和阿拉伯糖,在饲料、造纸和食品等行业具有广阔的应用前景。本研究从土壤中筛选诱变到一株可同时产木聚糖酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶和酸性蛋白酶的菌种Aspergillus awamori Y8,优化了木聚糖酶的培养基配方和发酵条件,研究了木聚糖酶的酶学性质,并进行了中试和木聚糖酶制剂的应用试验。产木聚糖酶菌种筛选及诱变 本研究采用的产木聚糖酶菌种筛选培养基成份包括桦木木聚糖10.0 g/L,酵母膏0.5 g/L,蛋白胨0.5 g/L,琼脂15.0 g/L,青霉素G(1610 U/mg)0.25 g/L,硫酸链霉素(761 U/mg)0.25 g/L。菌落周围透明圈大小与菌株所分泌木聚糖酶的活力成正比。从52份上样中共分离挑取了598个透明圈较大的单菌落,经综合比较,选取Aspergillus sp.558作为诱变育种的  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京林业大学
南京林业大学

重组内切纤维素酶酶学性能及其应用研究

以往对纤维素酶结构及功能研究的出发点主要致力于提高纤维素酶对生物质的降解能力,这需要多组分纤维素酶的协同作用。近年来,纤维素酶在植物纤维改性中的应用受到关注。大量研究结果表明,内切型纤维素酶在植物纤维酶法改性中起着关键作用。由于天然纤维素酶来源广泛,组分复杂,其分离纯化相当困难,使单一组分酶的应用受到一定的限制。内切型纤维素酶EGI是用基因工程方法得到的重组酶,其活性高,纯度高,最适pH为7.5,加之其制备方便,在植物纤维改性中有很好的应用前景。EGI最终的高效应用尚需作进一步的基础研究。本研究即从构建无纤维素吸附区的内切纤维素酶EGI-CD着手,通过对EGI和EGI-CD酶对不同性质的底物吸附及水解性能的比较,讨论了EGI不溶性纤维素在底物上的吸附性能及其对水解的影响,以及纤维素吸附区(CBD)在EGI对植物纤维水解及改性中的作用。研究主要得到了以下结果:1.利用基因工程方法成功构建了无纤维素吸附区的内切纤维素酶EGI-CD,...  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

豆粕异黄酮酶法提取及生物转化的研究

大豆异黄酮是一类具有重要生理功能的植物雌激素,从豆粕中提取大豆异黄酮具有重要的经济意义。本论文对豆粕异黄酮的酶法提取及结构修饰进行了研究,主要结果如下:建立了能够同时快速检出糖苷型和苷元型异黄酮的高效液相色谱(HPLC)法:检测波长为254nm,柱温40℃,流速1.0mL·min~(-1),流动相为溶剂A(10%乙腈,含0.1%三氯乙酸)和溶剂B(90%乙腈,含0.1%三氯乙酸),流动相梯度设置为在30min内,溶剂A从100%下降到30%。该测定方法能够在较短时间内(<20min),准确地分离出糖苷型和苷元型异黄酮。进一步研究发现:对于糖苷型为主的异黄酮,用HPLC法测定的总异黄酮含量是紫外分光光度法测定含量的60%左右;对于苷元型为主的异黄酮,用HPLC法测定的总异黄酮含量是紫外分光光度法测定含量的75%左右。采用薄层层析法定性检测糖苷型和苷元型异黄酮时,选用氯仿:甲醇:水=5:1:0.5作为混合溶剂系统,展开效果较好。其中...  (本文共155页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东大学
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纤维材料酶解机理分析与应用策略探讨

木质纤维素是最具有利用潜力的生物质资源,其生物降解产物可以用来生产多种生物产品以及渴望替代化石能源。对纤维素利用的工艺流程中,最主要的限制性因素存在于纤维素转化为可发酵的还原糖这一步。降低单位还原糖的生产成本的策略大体有两类途径:(1)提高纤维素酶生产的经济性,这主要涉及纤维素酶合成机理的研究,提高其合成效率以降低单位纤维素酶的生产成本(为本实验室另一研究组主要研究方向,不属本文主要研究内容);(2)提高纤维素酶的比活力或者利用效率,主要涉及纤维素酶解纤维材料时催化作用机理的研究,以降低单位可发酵还原糖的生产成本,此为本文研究的主要内容。与蛋白酶类、果胶酶类以及淀粉酶类相比较,纤维素酶(系)活力的准确测定十分困难,一直是理论和应用研究中的难题。由于纤维素的不溶性与结构异质性,以及纤维素酶系统的复杂性,建立以其为底物的实用且可靠的纤维素酶活力测定方法十分困难,而建立高效的活力测定或者筛选方法,以选择具有人们期望的特性的酶或者菌株,...  (本文共213页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东大学
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从天然生境中直接分离新纤维素酶组分方法的探讨

我国正处于工业化、城镇化进程加快的时期,能源消费强度较高,能源形势非常紧张。因此,对于新型能源的开发,既是解决当今能源危机的必经途径,也是子孙后代赖以生存发展的基础。地球上的能量主要源自太阳能,而被固定的能量主要以生物质的形式储存。人们把解决能源困境的希望寄托在具可再生性的生物质资源上,是很自然的,这既源于生物质资源惊人的总量,也因为其相对清洁、廉价。然而,生物质资源高值化、有效化的利用仍然存在种种瓶颈。生物质资源的有效利用涉及多个方面,从基础科学的研究到产业化的工艺流程,最终的成功可能会受益于每一个微小进步的积累。山大微生物技术国家重点实验室作为多年来一直研究生物质资源利用的实验室,开发新型纤维素酶以及研究天然条件下纤维素的降解是我们关注的重点问题之一。然而由于微生物可培养性的限制,现在对于纤维素天然降解的理解仅仅来自少数模式微生物,研究材料也主要限于修饰过的底物,特别是对于自然生境这样一个复杂体系还缺乏相应的研究手段。因此,...  (本文共178页) 本文目录 | 阅读全文>>

山东农业大学
山东农业大学

疏绵状嗜热丝孢菌热稳定纤维素酶的分离纯化和基因克隆

纤维素酶是一组能降解纤维素的酶的总称。该酶广泛存在于各种微生物中,如细菌、真菌、放线菌等;此外,在动物中也发现该酶的存在。但到目前为止,对该酶的研究仍多以中温好气性木霉(Trichoderma)为主。因此,为了提高纤维素酶的产率和加速对纤维素酶降解纤维素机制的研究,一些极端条件下高活力的纤维素分解菌已经引起科研工作者的重视,尤其是对嗜热真菌(thermophilic fungi)的研究。嗜热真菌具有产酶快且产量大、分解纤维素效率高等特性,是一类非常具有开发潜力的纤维素分解菌。疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)是一种广泛分布的,生长上限温度较高的一种嗜热真菌,本实验室从该菌中已分离了多种嗜热酶,但还未分离到β-葡萄糖苷酶和外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶。本研究中Thermomyces lanuginosus在以微晶纤维素为唯一碳源的合成培养基中诱导产生了外切β-葡聚糖纤维二糖水解酶和β-葡萄糖苷酶,通...  (本文共152页) 本文目录 | 阅读全文>>