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表达PRRSV GP5蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其免疫效力的研究

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS),由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起,主要表现为妊娠母猪发生早产、流产、产死胎、弱仔和木乃伊胎,仔猪和育肥猪发生呼吸道疾病,死亡率增加,饲料报酬率降低。该病传播速度极快,是危害我国养猪业的一个重要传染病。疫苗免疫是控制该病发生的一个有效办法,但目前现有疫苗存在许多不足,如PRRSV 灭活疫苗免疫剂量大,接种次数多,不能激发黏膜免疫,保护效果不确实;弱毒疫苗虽然可以形成有效的临床保护,但和灭活疫苗一样不能阻止野毒感染,且存在着散毒和毒力返强之忧。所以利用生物技术手段开发能够激发黏膜免疫并能通过血清学方法区分野毒感染的安全和有效的新型PRRS 疫苗,来控制在我国日益泛滥的PRRS,是广大养猪企业的迫切需  (本文共70页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
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伪狂犬病毒gC基因“自杀性”DNA疫苗及VP22蛋白转导的免疫增强效应研究

伪狂犬病(Pseudorabies)是当今危害养猪业的最重要传染病之一,免疫接种仍是目前控制和预防该病的主要手段。传统的猪伪狂犬病疫苗对控制疾病的发生和流行发挥了巨大作用,但存在毒力返强的安全隐患或免疫效果不佳等缺陷。研制更安全、高效、廉价的新型疫苗一直是伪狂犬病研究的重要方向。“自杀性”DNA疫苗(Suicidal DNA vaccine)是基于常规DNA疫苗和“自主复制型”RNA疫苗(Self-replicating RNA vaccine)基础上发展起来的一种全新的疫苗设计,不仅具有“自主复制型”RNA疫苗的安全性与高效性,而且结合了常规DNA疫苗易制备、保存等方面的优点,还能突破免疫耐受,堪称近年来基因疫苗发展的重大突破,具有巨大的开发潜力与良好的应用前景。作为重要的动物病毒性疾病,伪狂犬病的常规DNA疫苗得到了广泛开展,但“自杀性”DNA疫苗研究迄今尚未见报道。蛋白转导(Protein transduction)是近年...  (本文共151页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
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伪狂犬病毒Ea株gD基因转基因细胞系的构建及其人工感染仔猪的病理学

伪狂犬病(Pseudorabies or Aujeszky's Disease)是危害世界养猪业的最重要的传染病之一。目前,一些发达国家实施根除计划根除该病,而在发展中国家,该病仍然频繁发生,严重制约了这些国家和地区养殖业的发展。本研究着眼于伪狂病发病机理的进一探索及新型基因缺失疫苗的开发利用,主要研究工作及研究结果如下:1.转gD基因细胞系的建立本研究分别采用真核表达质粒介导的方法与逆转录病毒介导的方法,将PrV Ea株gD基因导入PK-15细胞中,建立起2株表达gD的细胞系PK~(PD)与PK~D,并对其相关生物学特性进行了详细的研究。通过免疫荧光观察,发现导入的gD基因在这2株细胞系中均获得表达,表达产物gD定位在细胞膜上,呈现明显的极性分布,并具备原有的免疫反应性。在相同培养条件下,PK~(PD)与PK~D的细胞形态、生长速度与正常PK-15细胞无明显差异,表明转入的gD基因对细胞的生理活动无不良影响;每隔5代,用PCR...  (本文共101页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北农业大学
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表达PRV-vp4基因的重组杆状病毒和重组伪狂犬病毒的构建

猪轮状病毒(Porcine Rotavirus, PRV)属于呼肠病毒科轮状病毒属,是引起仔猪病毒性腹泻的主要病原之一,1-4周龄仔猪的发病率超过80%,死亡率可达20%,该病在世界范围内分布,其感染引发的腹泻已发展成为一种世界性的疾病,给各国的畜牧业造成了严重的危害,有效的疫苗接种是目前预防该病的唯一途径,而现有疫苗存在着易发生毒力回复、异型间免疫效果差的缺憾。伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus, PrV)属于疱疹病毒甲亚科水痘病毒属,病毒在猪群中的传播引起妊娠母猪流产、死胎等繁殖障碍及呼吸系统疾病,有传播速度快、传播途径多、流行范围广、致死率高的特点,给养猪业造成了巨大损失,在伪狂犬病的防控中广泛使用的Bartha-K61株等弱毒疫苗被证明是疫苗研制成功的典范,目前研究热点正转为利用生物技术研制重组伪狂犬病毒活载体疫苗方面。本研究中,首先进行了PRV/JL94株的细胞培养和超离纯化,并提取病毒核酸进行研究。根据...  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>

南京农业大学
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伪狂犬病毒上海株PK~-缺失株及PK~-gG~-双缺失株的构建及免疫原性初步研究

伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种家畜和野生动物的以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病。病原属于疱疹病毒科α-疱疹病毒亚科的猪疱疹病毒Ⅰ型。除猪外,其他动物如牛、犬、猫等感染病毒后均为致死性感染,仅呈散发或地方疫源性流行。猪是本病的原发感染宿主,又是病毒的长期贮存和排毒者。由于猪感染耐过后往往建立起病毒的潜伏感染,在受到体内外因素的刺激时,病毒往往被活化,向外界环境散毒,传给其它动物引起疾病暴发,至今为止的所有疫苗只能抑制出现临床症状,不能控制感染和排毒。这些因素给伪狂犬病的控制和消灭带来了极大的困难。目前已在40多个国家和地区发生了本病,给畜牧业造成了重大的经济损失,发达国家已将此病列为重点防制疾病之一。预防伪狂犬病的主要措施是注射疫苗。常用疫苗能抑制本病的临床症状,但不能控制病毒在猪体内的繁殖和向外排毒。要消除伪狂犬病的危害,采用基因缺失苗免疫是一种比较理想的选择。基...  (本文共126页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
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猪2型圆环病毒核酸疫苗及重组伪狂犬病毒二价基因工程疫苗的研究

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)不仅可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),而且也与猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪先天性震擅、母猪繁殖障碍、猪增生性和坏死性肺炎等疾病密切相关。自从19世纪90年代发现可致猪的疾病以来,PCV2病毒在世界各国迅速蔓延。目前PCV2在猪群的感染率非常高,造成猪的生长缓慢,饲料报酬下降,同时侵害猪的免疫系统,导致猪的免疫机能下降,造成其它疾病的大暴发,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。我国也于2000年检测到了该病毒的存在,该病毒在我国猪群的感染率近乎50%,给我国的养猪业也造成了严重的打击。目前对于该病毒的防制主要是依靠疫苗,而由于该病毒在细胞上增殖滴度很低,发展传统的灭活疫苗和弱毒疫苗非常困难,因此用现代基因工程手段构建的第二代新型疫苗,必然在该病毒的防制上具有重要作用。本研究以编码PCV2核衣壳蛋白的ORF2基...  (本文共122页) 本文目录 | 阅读全文>>