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骨髓间充质干细胞在肝损伤模型小鼠体内向肝细胞分化

目的:建立体外分离培养骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的有效方法,观察BMSCs能否在有再生需求的小鼠体内向肝细胞分化,以及BMSCs移植能否促进肝脏的再生。方法:以含20%胎牛血清的DMEM低糖培养基,原代细胞直接贴壁培养,48小时后换液继续培养,待细胞生长铺满后(原代约8-10天,以后5-7天)消化传代,从雄性BALB/C小鼠骨髓中分离BMSCs。光学显微镜下观察细胞形态及生长特性。流式细胞仪检测新鲜分离的骨髓细胞与第五代的BMSCs CD_(44)与CD_(29)的表达。BMSCs移植实验动物共50只。除Y染色体阳性对照1只为雄鼠外,其余均为雌鼠,包括Y染色体阴性对照1只,正常对照组16只,模型组16只,BMSCs移植组16只。20%戊巴比妥麻醉后打开腹腔,从肝蒂处结扎并切除中叶肝脏,移植组肝右叶注射PBS稀释的源自BALB/C雄性小鼠的BMSCs 0.4×10~5/只  (本文共121页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
中南大学

同种异体骨髓单个核细胞肝内移植治疗急性肝损伤的磁共振扩散成像实验研究

第一章同种异体骨髓单个核细胞肝内移植治疗急性肝损伤的实验研究目的:探讨骨髓单个核细胞肝内移植治疗D-氨基半乳糖诱导的兔急性肝损伤模型的疗效。材料与方法:由雄性健康大白兔四肢长骨提取骨髓单个核细胞,用D-氨基半乳糖腹腔注射诱导建立兔急性肝损伤模型,模型兔(n=66)随机分为2组:移植组(n=32):直接肝内多点穿刺注射5 m1骨髓单个核细胞悬液(细胞约2×107个);对照组(n=34):直接肝内多点注射5 ml D-hanks液。定期观察各组实验兔的行为变化、生存率、肝功能(ALT、AST、ALB)的改变;移植术后,相当于制模后第7天、14天、28天分别处死两组实验兔,每次处死7只,观察肝脏组织病理学变化,计算病理评分。所有数据资料均借助SPSS 11.0统计软件分析。结果:移植组在骨髓单个核细胞移植后的第1周内生存率高于对照组(p0.05)。肝功能统计分析显示:移植前,两组肝功能无明显差别;移植后,随时间推移,肝功能逐渐好转,在...  (本文共118页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

肝大部切除鼠血清诱导骨髓干细胞向肝前体细胞的分化及其基因表达谱的变化

近年来的研究提示,成体骨髓干细胞(adult bone marrow stem cell,ABMSC)能转分化为肝细胞。这一现象为临床上应用ABMSC移植治疗肝损伤和急慢性肝功能衰竭展示了一个可喜的前景。但是ABMSC向肝细胞分化的影响因素及分化的机制尚不十分清楚。我们课题组先前有关肝再生的研究资料和国内外有关研究进展提示,虽然肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是启动肝细胞DNA合成的主要因子,但肝细咆的生长、分化和增殖要受到机体整体状态、以及肝外和肝内多种因子和某些激素等的调控,而肝大部切除术后的血清则可能包含全部刺激因子和营养成分。因此本课题应用肝大部切除鼠血清和/或HGF,进行ABMSC向肝细胞分化的体内外实验研究。研究目的1.应用肝大部切除鼠血清和/或HGF在体外诱导同系ABMSC向肝细胞分化,以探讨ABMSC向肝细胞前体分化和扩增的体外培养方法和条件。2.诱导分化至一定阶段的大鼠...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国医学科学院学报》2009年03期
中国医学科学院学报

骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程中肝细胞相关转录因子的表达

骨髓间充质干细胞在特定诱导条件下可分化为肝细胞样细胞,并具有成熟肝细胞功能[1]。已知在胚胎肝脏发育时,多种肝细胞相关转录因子,如肝细胞核因子(hepatocyte nuclear factor,HNF)4α,CCAAT增强子结合蛋白(CCAATenhancer binding pro-tein,C/EBP)α、β等对肝细胞分化和成熟肝细胞功能维持是必需的,但目前对其表达和功能尚不十分清楚。本研究检测了大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程中的HNF4α、C/EBPα和C/EBPβ表达情况,探讨了转录因子在肝细胞分化中的作用机制。材料和方法试剂DMEM/F-12培养基、胎牛血清(FBS)购自美国Hyclone公司,青链霉素(PS)和胰蛋白酶-EDTA(Trypsin-EDTA)购自英国Gibco公司,肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast...  (本文共6页) 阅读全文>>

南京医科大学
南京医科大学

长链非编码RNAUCA1在人脐带间充质干细胞向肝细胞分化中的研究

研究背景:各种终末期肝病常常导致肝功能衰竭,给人类健康造成了极大的危害,是当今世界范围内死亡的主要原因之一。肝细胞移植及肝移植目前是治疗肝功能衰竭的重要手段,但是供体缺乏限制了其进一步发展。研究证实,在体外添加生长因子及细胞因子可以诱导人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)分化为肝细胞,使其成为理想的替代肝细胞来源、充满应用前景。但是上述方法诱导分化来的肝细胞功能不成熟、不能满足临床需要。长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)已经被报道参与间充质干细胞的分化过程,但是关于其在肝细胞分化中作用还未有报道。本研究关注lncRNA UCA1(urothelial carcinoma associated 1)在UC-MSCs向肝细胞分化中的作用,旨在获取更加成熟的肝样细胞。研究目的:探讨UCA1对UC-MSCs向肝细胞分化的影响以...  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

《山西医科大学学报》2010年06期
山西医科大学学报

肝细胞分化过程中肝细胞极化分子的表达与调节

肝细胞在体内承载着合成、分泌、解毒等重要生理功能,而这些生理功能的实现有赖于肝细胞极化的形成和维持。极化肝细胞在其细胞膜结构及分子组成、细胞内骨架及转运系统构成等方面具有明显特征性,但是,目前我们对这方面的认识非常有限。肝细胞极化研究在很大程度上受限于缺乏理想的体外肝细胞极化模型[1]。本研究中,我们在诱导成人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的同时,观察肝细胞不同极化膜区标志性分子的表达和分布,探讨肝细胞极化形成和调节机制。1材料和方法1.1试剂DMEM/F-12培养基、胎牛血清(FBS)和trypsin-EDTA购于Hyclone公司(Logan,Utah,USA)。肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)购于Peprotech公司(英国)。胰岛素购于万邦医药公司(中国)。Oligo(dT)、莫洛尼鼠白血病病毒(M-MLV)逆转录酶、dNTP、RNA酶抑制剂购于Promega公司(美国)...  (本文共5页) 阅读全文>>

《国际消化病杂志》2007年01期
国际消化病杂志

骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究

1概述干细胞是一类具有自我增殖和分化潜能的细国际消化病杂志2(川7年2月第27卷第1期Int J Dig DIS.February 25,2。()7,Vol.27,No.胞,分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞(ES)被认为是全能干细胞,具有分化为各种细胞、组织、器官的能力。成体干细胞发现于2()世纪6()年代,最初认为成体干细胞仅能生成所在组织的成熟细胞。1997年Wilmut等[’〕利用成年哺乳动物的体细胞与去核卵母细胞融合并发育出克隆个体,证实体细胞通过基因组重编程,能恢复其发育全能性。此外,成体干细胞分化潜能的研究及成体干细胞可塑性概念的提出使成体干细胞的研究进入重新审视与发展的阶段。成体干细胞多向分化潜能已成为当今研究热点。其中骨髓干细胞由于取材方便,受到广泛关注。骨髓干细胞又可分为两大类:一类是造血干细胞(HSC),它是血细胞的起源细胞;另一类则是骨髓间充质干细胞(MSC)。MSC是来源于中胚层的具有多向分化能力的...  (本文共3页) 阅读全文>>