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法医昆虫种属鉴定的分子生物学方法研究

目的 本课题旨在探索新的法医昆虫学种属鉴定方法。方法 利用引物设计软件分别对法医常见昆虫的常染色体微卫星区域和线粒体DNA(mtDNA)进行引物设计,使用PCR技术分别对其进行扩增,用聚丙烯酰胺电泳对PCR产物分离、银染。对于微卫星(microsatellite)遗传标记直接进行分型检测。对于线粒体DNA通过银染分离、检测,利用DNA测序仪进行测序分析。用系统进化软件(Mega2.1和PHYLIP3.06)进行法医常见昆虫的亲缘关系分析。结果 采用对线粒体16rsRNA基因进行PCR扩增和DNA测序的方法,我们得到了中国9个地区6种不同法医常见昆  (本文共158页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国法医学杂志》1999年01期
中国法医学杂志

煮熟组织块的种属鉴定1例

1997年某月,某市发生一起杀人碎尸案。后从犯罪嫌疑人住所提取可疑红烧肉块,怀疑为被害人尸块(据犯罪嫌疑人交代,受害人碎尸后被做成红烧“猪”肉供他人食用),要求进行种属鉴定。笔者应用PCR技术扩增人28srRNA基因对所送肉块进行了种属鉴定,获得成功,方法简便、快速,图谱清晰,现报告如下。1材料与方法1.1检验材料送检的红烧肉块1份,深褐色,2cmX2cmX2cm;已知人血、猪血各1份。1.2DNA的提取用Chelex-100处理已知人血和猪血样品[1],送检的红烧肉块取0.05g,用Chelex-100处理后,上清液经Centricon-100柱纯化备用。1.3DNA的扩增根据文献[2]设计引物序列,即5’TGTAAAACGACGACGGCCAGTATCTAGTAGCTGGTTCCCTC3’和5’CCTCTAATCATTCGCTTTAC3’。扩增反应使用25μl体系,引物浓度为0.2μmol/L,其它试剂见参考文献[3]。扩增...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国刑警学院学报》1995年03期
中国刑警学院学报

骨灰残渣的种属鉴定

各种动物的骨骼复杂多样各具特点,每一种动物都显示出特定的解剖学形态特征。人和动物间的骨骼差异较大,如果是一副较完整的骨架,或具特征的较完整的骨骼,要作种属鉴定是比较容易的。但是,骨骼残块的鉴定则需要利用血清学和动物解剖学的方法作种属鉴定。而骨灰残渣的种属鉴定至今尚未见报道. 近年来,时有杀人碎尸后焚尸的案件发生,在现场勘查或侦察中搜集到的嫌疑骨灰残渣需要作骨灰的种属鉴定时,首先遇到的难题是,骨灰本身已失去了血清学检验的条件和骨骼解剖学形态特征,而用普通的骨磨片和切片的方法是无法制成可作检验的显微片的。 本文作者通过实验发现,骨质在经过高温烧成骨灰后,其骨质的有机成分全部破坏,而无机盐成分可不受破坏,并保持较完整的骨质的显微结构。用特殊的方法制成显微片,通过显微镜观察骨质的哈弗氏系统等结构,根据不同动物和人的骨质显微特征的比较,进行骨灰的种属鉴定。 材料及方法 本文作者在检案中收到嫌疑杀人后焚尸的骨灰残渣约300克,在市场搜集猪、...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国法医学杂志》2000年02期
中国法医学杂志

PCR扩增SON基因3’非编码区进行种属鉴定

在刑事案件现场生物物证的检验鉴定中,首先必须进行种属鉴别,确定检材是人还是动物所留,必要时还要确定是何种动物所留。传统的种属鉴定技术主要是血清学的方法,如环状沉淀试验、酶联免疫吸附法[1],等电聚焦法[2],高效液相色谱技术[3]等。这些方法都是通过检测检材中具有种属特异性的蛋白质成分来达到鉴定目的。本文作者根据有关DNA种属鉴定技术的研究报道,选择SON基因3’非编码区作为目的基因,自行设计一对引物,并采用SSCP银染色技术,对人和14种哺乳类动物的DNA扩增产物进行检测,成功地进行了种属鉴别,现报告如下。1 材料与方法1.1 实验材料64份人血样品,其中黄种人53份、白种人7份、黑种人4份;同一个体人的肌肉、肺、脑、肝、肾、骨骼等不同组织DNA样品各1份(本室日常办案及科研中积累或采自国家检疫部门);牛、猪、狗、兔、大白鼠、小白鼠等6种动物的血斑样品各10份,猕猴、驴血斑各4份,阿拉伯狒狒、骡、羊、猫血斑各1份,马、豚鼠血斑...  (本文共3页) 阅读全文>>

《刑事技术》1988年03期
刑事技术

微量陈旧血痕种属鉴定的实验研究

当前,国内对血痕种属鉴定采用的方法有多种(1、2、3、4)。但要从陈旧或受高温等理化因素影响的微量血痕中确定其神属,还是一个难题。本文对应用1%氨水溶液提取微量陈旧血痕蛋白作种属鉴定的效果问题,作了一些比较性实验研究,现报告如下: 一、实验材料 (一)人血痕检样的制备: 1.将2毫升人静脉血均匀吸附在100平方厘米的洁净纱布上,晾干后置室温保存。 2.将人静脉血稀释成l/10、1/20、1/40、1/80,再取各稀释血2毫升均匀吸附在100平方厘米的洁净纱布上,晾干后与未稀释血样一起作如下处理: (1)分别置甲醇中固定10分钟、30分钟、60分钟和120分钟,取出后晾干备用。 .(2)分别置100℃烘箱中干热60分钟、120分钟、180分钟和240分钟。 (3)分别置沸水中1分钟、5分钟、10分钟、30分钟和60分钟,取出后晾干备用。 (4)分别置室外向阳处l周、2周、3周、4周和5周,室外温度为7~30℃。 (二)取24年、1...  (本文共4页) 阅读全文>>

《刑事技术》2003年04期
刑事技术

细胞色素b基因序列测定进行种属鉴定应用研究

对现场提取的各种生物检材进行种属鉴定是进行其他鉴定的首要及关键环节。传统的法医学种属鉴定用免疫学方法,但用这类方法作种属鉴定对现场提取的腐败检材、特别是白骨、毛发、指甲等难以奏效。DNA检验技术为解决这类检材的种属鉴定提供了新方法。细胞色素b基因位于线粒体环状DNA中,Zehner(1998)等[1]研究表明不同物种细胞色素b基因的序列不同。本研究应用特异性引物扩增人与14种常见物种动物细胞色素b基因358bp的片段,用荧光标记自动测序技术对此片段进行序列测定,比较这些动物与人之间358bp片段的序列差异。显示所测14种动物细胞色素b基因358bp的片段序列与人之间均存在明显的差异。显示该方法在种属鉴定方面具有良好的应用价值。报道如下:1材料与方法1.1样本及模板制备人类血样30份,为本实验室案件积累,收集狗、羊、猫、兔、牛、猪、大白鼠、小白鼠、狒狒、鸡、鸭、鹅、水蛇、鲫鱼等14种常见动物血样,每种物种10个样品(狒狒4例),取...  (本文共3页) 阅读全文>>