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低浓度H_2O_2促进兔角膜培养上皮细胞黏附及移行的离体实验研究

目的:细胞黏附及移行是角膜上皮创伤愈合的关键步骤,该过程依赖于整合素(integrin)及其配体纤维连接素(fibronectin)的信号作用系统。在细胞黏附于细胞外基质的过程中,活性氧(Reacive oxygen species,ROS)是整合素信号系统所必需的胞内产物。本研究旨在通过体外实验观察外源性低浓度过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)对兔培养角膜上皮细胞黏附及移行作用。方法:采取新西兰大白兔的角膜缘作为原代细胞培养的组织片。除培养细胞外,本研究实验均使用无生长因子以及无血清的培养液。四甲基偶氮比色(measurement of trititaed thymidine incorporation,MTT)细胞活力测试法用于检测外源性H_2O_2(0,1,5,10,20,50,60,和70μM)作用兔角膜上皮细胞2小时及24小时后的细胞活性。在适宜H_2O_2浓度范围内,黏附离心法用于测试黏附3  (本文共63页) 本文目录 | 阅读全文>>

《首都医科大学学报》2015年03期
首都医科大学学报

循环血小板活化与血小板-白细胞黏附的流式细胞分析法及其应用

循环血小板活化(circulating platelet activation, Gly-Asp-Ser,RGDS),二憐酸腺营(adenosine diphos-CPA)与血小板-白细胞驗附(platelet-leukocyte adhe- phate,ADP),多聚甲酸(Paraformaldehyde,PFA)为美sion,PLA)是血栓形成的主要原因,与心脑血管病等国Sigma公司产品。多种血栓性疾病密切相关。由于CPA和PLA测定方 1.3样本采集法不同,致使检测结果差异很大[1],因此选择正确的 用枸嫁酸钠抗凝的真空采血管采集静脉血2 mL,CPA与PLA检测方法对血栓性疾病的诊断、治疗以取血时将开始抽出的前2 mL血弃去不用,以避免静及抗血小板药物的疗效监测、预后评估等意义重大。脉阻滞引起的激活;将全血样本轻轻混匀,注意减少流式细胞术(flow cytometry,FCM)拓宽了血小板相关体外人工激活,如剧烈振动、...  (本文共6页) 阅读全文>>

《细胞与分子免疫学杂志》2009年03期
细胞与分子免疫学杂志

牛白细胞黏附缺陷病的牛白细胞功能检测

1974年,世界上首次报道人发生一种容易感染、白细胞增生和趋化、吞噬功能缺陷的疾病,1984年确定其病因,它是一种与白细胞黏附有关的细胞表面糖蛋白整合素表达缺陷所致,并定名为白细胞黏附缺陷病[1]。1983年报道了牛白细胞黏附缺陷病(bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD)[2],该病是一种常染色体单基因隐性遗传疾病,病因为白细胞表面整合素CD18(β2)亚单位383位碱基由A突变为G,与之相应的位于胞外高度保守区的128位天门冬氨酸突变成甘氨酸,致使白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏,白细胞的黏附、趋化、吞噬和过氧化物生成等功能下降,进而导致中性粒细胞不能黏附到血管壁而到达炎症部位发挥病原清除作用,使机体出现严重的重复感染[3]。BLAD主要发生于1~14个月龄的Holstein牛,且多在犊牛时期死亡,但Muller等[4]进一步研究发现,一旦病牛超过12月龄,感染的严重性和频...  (本文共2页) 阅读全文>>

《世界华人消化杂志》2005年17期
世界华人消化杂志

细胞黏附力和黏附分子对癌侵袭性影响的研究展望

0引言癌转移是一个复杂的多步骤的癌细胞与宿主相互作用的过程.Liotta认为,黏附、基质溶解和移动是癌细胞侵袭宿主的三大步骤.其中黏附是指癌细胞通过自身膜表面的黏附分子与细胞外基质成分间的相互反应.目前人们对于细胞黏附的研究主要集中在两个方面:一方面是研究它的生物化学机制,以细胞黏附分子(cell adhesionmolecules,CAM)的研究为代表[1,2],近年来这方面取得了很大成绩并已逐渐成为生物学界的热点之一[3,4];另一方面是细胞黏附的生物物理性质和机理的研究,细胞黏附的一个基本物理问题是黏附的力学强度问题,这里的力学强度既包括细胞间的黏附强度又包括黏附分子间的分子键强度[5].目前这方面的研究报道尚处于起步阶段,尤其是肿瘤细胞的黏附力学问题,国内外所见报道不多.1细胞黏附分子与癌细胞的信号传导1.1两个细胞黏附系统共同参与细胞连接CAM系指存在于细胞膜上的一类跨膜糖蛋白,包括整合素类(integrins)、钙...  (本文共4页) 阅读全文>>

《黑龙江畜牧兽医》2009年01期
黑龙江畜牧兽医

牛白细胞黏附缺陷病等位基因频率分析

白细胞黏附缺陷病(bovine leukocyte adhesion de-ficiency,BLAD)是一种常染色体隐性致死性的遗传性疾病,以严重重复性感染、缺少脓液形成、损伤愈合延迟和白细胞增多为特征。BLAD的分子基础是编码整合素β亚单位(CD18)的383位碱基由A突变为G造成的,与之相应的128位的天门冬氨酸变成了甘氨酸,致使白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏,因而导致BLAD牛中性粒细胞的运动、黏附和内吞噬功能缺陷,lum inol依赖的化学发光反应、O2-生成能力显著降低,病牛由于传染性疾病常常年龄很小就会死亡。许多国家都报道过白细胞黏附缺陷病病例。BLAD及BLAD携带者群体中出现的频率与国家、年份和奶牛饲养环境是否改善有关。许多国家BLAD的发生及BLAD基因的携带状况已经得到控制。为了解荷斯坦奶牛牛群中成母牛白细胞黏附缺陷病病毒感染情况,采用RT-PCR法对我国1 000头荷斯坦奶牛的等位基因频率进行分...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中西医结合学报》2005年04期
中西医结合学报

中药抗组织损伤与白细胞黏附

白细胞跨内皮迁移至血管壁间隙是组织损伤和炎症反应的必要步骤,白细胞与血管内皮的黏附是此过程早期重要的一步。白细胞与血管内皮黏附分子的相互作用是组织损伤和炎症反应过程的重要分子基础[1]。炎症的重要特征就是白细胞黏附。炎症时血管内皮细胞被激活而出现选择素分子,与白细胞膜上的配体反应,使白细胞在血管内皮上滚动。炎症性物质激活白细胞后,其表面的黏附分子受体即为激活型,血管内皮上的相应配体与白细胞对合,导致白细胞-内皮细胞之间的强烈黏附,引起白细胞移动、趋化。白细胞和内皮细胞的黏附是有选择的。如急性炎症反应主要是中性粒细胞与血管壁的黏附,而慢性炎症反应则以单核细胞黏附为主。这是由于白细胞表达黏附分子的差异及细胞因子的不同调节所造成的[2]。另外,白细胞黏附功能异常将导致免疫功能下降,同样会引起炎症反应和组织损伤。中药可通过调节白细胞或内皮细胞表面黏附分子的水平来改善白细胞黏附功能,发挥抗炎作用,从而减少组织损伤。目前的研究主要集中在细胞...  (本文共4页) 阅读全文>>