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重型脑创伤后细胞膜损伤及亚低温对其影响的研究

[目的][第一部分]研究轻型颅脑创伤患者及重型颅脑创伤患者脑细胞间液甘油浓度的变化规律;研究亚低温对重型脑创伤患者脑细胞间液甘油浓度的影响。[第二部分]研究Glu的兴奋性毒性与Gly升高的关系及脑创伤所伴随的跨膜信号转导系统的变化,探讨亚低温治疗对其的影响。[第三部分]研究Glu对神经元凋亡和细胞膜损伤的影响,探讨亚低温治疗对其的影响。[方法][第一部分]共37例患者,其中mTBI组(GCS13-14分)6例、sTBI组(GCS3-8分)31例,重型组又随机分为亚低温组16例和常温组15例。应用微透析技术监测脑细胞间液中Gly浓度,脑室内法监测患者的颅内压,激光多谱勒血流仪检测患者局部脑血流的变化,统计患者的病理类型及预后等临床资料,研究Gly与以上资料或指标的关系,探讨Gly浓度变化的临床意义及亚低温治疗对其的影响。[第二部分]266只SD大鼠分为四组。(1)假手术组,共48只,只切开头皮,不行FPI损伤,收集透析液并在规定时  (本文共116页) 本文目录 | 阅读全文>>

第一军医大学
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脑创伤后儿茶酚胺递质对神经细胞损害的线粒体调控机制的实验研究

创伤性脑损伤后的脑组织损害是由于直接机械性损伤和继发性损害所引起。继发性脑损害是一系列细胞、分子事件作用的结果。当前,颅脑损伤的研究主要是围绕颅脑损伤后继发性损伤机制展开的。大量资料表明创伤性脑损伤可导致细胞的死亡,而在生理和绝大多数病理条件下,细胞死亡都呈现为凋亡的典型特征。目前我们已认识到脑创伤可引起大量的神经细胞凋亡,因此研究引起细胞凋亡的机制可能为脑创伤的救治提供新的前景。近年的研究表明有多种脑内的生化物质涉及脑创伤后继发损害的病理过程。而作为内源性的儿茶酚胺类中枢性神经递质是神经递质中一个大类型,脑组织中儿茶酚胺递质的改变是反映颅内神经代谢的敏感指标。儿茶酚胺递质包括多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素,它们不但参与脑的正常神经生理生化功能,还与脑的继发性损害有密切关系。最近几年的研究表明,在中枢性退行性病变及颅脑损伤后的继发性损害中,儿茶酚胺类神经递质皆发生紊乱。我们的体外实验研究显示:过量的儿茶酚胺类神经递质对神经细胞具...  (本文共127页) 本文目录 | 阅读全文>>

第二军医大学
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应用组织芯片对脑创伤下小胶质细胞凋亡的研究及小胶质细胞凋亡相关蛋白的蛋白质组学研究

创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI),由于其高致死率和致残率,已成为现代社会威胁人类生存的主要疾患之一。小胶质细胞在其中起着非常重要的作用。小胶质细胞是中枢神经系统中的主要免疫活性细胞。生理条件下其功能是相对静止的;发生病理损伤时,小胶质细胞被活化,形成吞噬细胞,吞噬入侵微生物,清除死亡及受损细胞,维持和恢复中枢神经系统中的正常状态。静息的小胶质细胞缺乏吞噬功能,但具有吞饮功能和一定的迁移能力,加之其在脑内广泛而规律的分布,起到了液体净化的作用。可清除代谢产物,灭活损伤细胞释放的毒性物质。在神经系统的正常发育和损伤(如脑创伤)、炎症以及神经退行性变时的自我保护机制中,小胶质细胞被激活增殖后,可清除脑内细胞外氧化蛋白,吞噬细胞碎屑和溃变的髓鞘,为神经元提供一个相对适合的微环境,促进组织修复。神经系统发育到一定时期,过多的神经细胞死亡,活化的小胶质细胞起着清除死亡细胞和变性物质的作用。高浓度ATP长...  (本文共118页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津医科大学
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急性脑创伤后人脑皮层蛋白质组表达变化的研究

目的:脑创伤是一严重的临床疾患,往往伴随着复杂的病生理反应,反复多变的临床症状,成为目前神经外科领域的诊断、治疗、判断预后的难点之一。近期的研究表明,原发性脑创伤可引发一系列分子、细胞的级联反应,产生基因、蛋白质表达变化,导致神经细胞损伤或死亡。为了进一步研究脑创伤后病生理变化的机制,我们在本次研究中的目的就是应用蛋白质组学技术(主要包括双向电泳技术、生物质谱分析),分析神经组织或细胞中的蛋白质组在脑创伤后表达的变化,进一步阐明脑创伤后的病生理演变机制。通过研究,试图发现可以用于提示病情变化、判断预后的生物标记物,指导治疗的靶标。人脑创伤后蛋白质组表达变化研究的前提,就是首先构建完整的、高质量的、良好重复性的人脑皮层蛋白质组的双向电泳表达谱图。因此,在第一部分中,我们的目的是建立适用于分离人脑组织皮层总蛋白的双向电泳的技术体系。在此基础上,第二部分的研究目的是在重度脑创伤后急性期内,发现人脑创伤皮层中的产生差异表达的蛋白质组。由...  (本文共146页) 本文目录 | 阅读全文>>

第二军医大学
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神经干细胞移植治疗大鼠脑创伤的实验研究

目的:探索神经干细胞的培养技巧,观察神经干细胞采集与其增殖、传代能力的关系;观察细胞因子和神经干细胞移植治疗脑创伤的作用。方法:取SD大鼠不同胎龄或相同胎龄不同部位脑组织进行神经干细胞培养。bFGF、运动皮层和海马组织来源的神经干细胞分别注射到运动皮层创伤区,进行行为学检测和免疫组化检测。结果:胎龄小或相同胎龄靠近生发中心的神经干细胞增殖和传代能力强。脑创伤后皮层内注射bFGF和神经干细胞以后运动功能障碍明显改善。神经干细胞运动皮层原位移植后运动功能远期改善较好。结论:神经干细胞存在固有的增殖、分化规律,细胞来源决定其增殖、传代能力。神经干细胞原位移植具有优越性。  (本文共99页) 本文目录 | 阅读全文>>

天津医科大学
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基因芯片筛选人脑创伤皮层差异表达基因的实验研究

目的 检测人创伤大脑皮层与正常大脑皮层基因表达谱的差异,筛选差异表达基因,寻找脑创伤防治的新的分子生物学策略。方法 1.收集5例我院神经外科因脑创伤后行颅内减压手术时清除的挫裂伤灶缘相当于伤灶周围水肿区的脑额叶皮层组织,显微镜下清除软膜及血管。受伤至手术取材时间均在48小时内。Trizol一步法提取组织总RNA,并用RNeasy mini spin column过柱纯化,最后用分光光度计定量,甲醛变性胶电泳质检。正常对照的人脑皮层总RNA购自美国Ambion公司。T7promoter-Oligo(dT)15为引物,用cDNA Synthesis Kit合成双链cDNA,双链合成以后用QIAquick PCR Purification Kit纯化。用T7 RiboMAX RNA大量产物系统将双链cDNA进行体外转录合成cRNA。用SuperscriptⅡ反转录酶,随机引物进行反转录,再纯化。再以随机引物进行cDNA的KLENOW酶...  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>