分享到:

促红细胞生成素对缺血导致视网膜神经节细胞损伤的保护作用及其机制

促红细胞生成素(EPO)传统上被认为是由胎儿肝脏和成人肾脏对缺血起反应的造血因子。近年研究结果证明,EPO在中枢神经系统有重要的生理作用。如EPO和EPO受体(EPO-Rs)在中枢神经系统内的表达,缺血、缺氧条件下EPO上调等说明,这一细胞因子是脑损伤反应的重要调制子。但EPO对缺血再灌注损伤的视网膜神经节细胞的保护作用尚未见报道。本实验以视网膜电图为指标,从器官水平上观察到EPO有保护缺血再灌注损伤的视网膜功能。以对缺血、缺氧最易感的视网膜神经节细胞为观察对象,通过体外培养视网膜神经节细胞给予缺氧和兴奋性氨基酸谷氨酸处理,模拟体内缺血缺氧损伤条件,应用全细胞膜片钳技术,从细胞水平上观察到EPO可降低视网膜神经节细胞Ca~(2+)通道电流,从分子水平表明其上的电压依赖性L-型钙电流,可以被谷氨酸受体阻断剂APV阻断。还观察到EPO可降低视网膜神经节细胞Na~+通道电流的幅值,以及降低谷氨酸引起的自发放电增多和谷氨酸受体门控通道电  (本文共137页) 本文目录 | 阅读全文>>

青岛大学
青岛大学

重组人促红细胞生成素对高糖状态下体外培养视网膜神经细胞凋亡的保护作用及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin, rhEPO)对高糖作用下体外混合培养大鼠视网膜神经细胞凋亡的保护作用及与Bcl-2蛋白表达的影响。方法:取出生1-3天大鼠,取其视网膜,通过0.125%胰蛋白酶消化制成单细胞悬液,建立一个稳定可靠的体外培养视网膜神经细胞的方法,用台盼蓝染色观察不同浓度葡萄糖对视网膜神经细胞形态、生长状态及存活数的影响,并采用免疫细胞化学技术对视网膜神经细胞进行鉴定。将体外混合培养3天的原代大鼠视网膜神经细胞随机分为高糖培养组、对照组和各浓度rhEPO处理组,rhEPO处理组在高糖培养液中分别加入rhEPO,终浓度为5、10、20、40U/ml,培养48h后,用MTT法检测,评价在培养液中加入rhEPO对高糖损伤视网膜神经细胞活力的影响,同时采用免疫细胞化学半定量方法,检测不同浓度rhEPO处理后高糖损伤神经细胞中Bcl-2蛋白的表达水平。结果:免...  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
中南大学

重组人促红细胞生成素对大鼠视网膜神经元缺血再灌注损伤的保护作用

目的:制作Sprague-Dawley(SD)大鼠视网膜缺血再灌注(Retinal ischemia-reperfusion,RIR)损伤模型,探讨腹腔内注射重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rHuEPO)对缺血再灌注损伤所致的大鼠视网膜神经元损伤的保护作用和其对热休克蛋白72(heat shock protein72,HSP72)表达的影响及其相互关系。方法:首先选择18只SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、RIR组,各6只,采用前房灌注的方式建立大鼠视网膜缺血再灌注损伤(RIR)模型,灌注压为110mmHg,维持时间为1小时。摘除眼球作视网膜病理切片观察以及采用免疫组织化学法和原位末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(TUNEL)技术检测视网膜细胞的凋亡情况,同时对视网膜凋亡细胞进行计数并作统计学分析。随后选择78只SD大鼠,随机分组:正常组6只,EPO治...  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>

第三军医大学
第三军医大学

重组人促红细胞生成素对大鼠急性高眼压视网膜缺血再灌注损伤后视网膜神经节细胞保护作用的研究

目的建立大鼠视网膜急性缺血再灌注模型,研究重组人促红细胞生成素(Recombinanthuman erythropoietin,rhEPO)对急性高眼压缺血再灌注后视网膜神经节细胞(Retinalganglion cells,RGCs)存活率和视功能恢复的影响及其对诱导型一氧化氮合酶(induciblenitric oxide synthase iNOS)蛋白表达的影响。探讨rhEPO对RGCs保护的可能作用机制。为临床治疗视神经损伤提供新的思路。方法1.建立急性高眼压视网膜缺血再灌注模型,应用荧光金逆行示踪技术观察节细胞存活率,并采用闪光视觉诱发电位(Flash visual evoked potential,F-VEP)方法观察rhEPO对视功能恢复情况影响。2.免疫组织化学检测急性高眼压缺血再灌注后iNOS蛋白的表达并观察rhEPO对iNOS蛋白表达的影响。结果1.rhEPO使伤后1天、4天、7天、14天RGCs的存活率分...  (本文共52页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军医进修学院
中国人民解放军军医进修学院

整合素β1、αvβ3在脱离及复位兔视网膜中的表达变化

整合素家族是组织中最重要的细胞粘附分子。它们可以与细胞外基质中的蛋白质分子(如纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等)、可溶性配体(纤维蛋白原等)或者邻近细胞表面的相应受体结合,介导细胞-细胞外基质及细胞-细胞间的粘附作用。作为一类重要的膜表面受体,整合素还具有信号转导功能,能联系细胞外微环境与细胞内代谢活动,从而对细胞生长、创伤修复及肿瘤发生、发展、转移等起到重要的调节作用。本研究的目的是建立兔孔源性视网膜脱离和复位模型,在此基础上研究兔孔源性视网膜脱离及复位后不同时间整合素β1和整合素αvβ3在神经视网膜和色素上皮细胞表达的动态变化,同时观察整合素β1和整合素αvβ3在培养人色素上皮细胞损伤愈合模型中的表达变化。本研究共分为四部分:第一部分,是建立兔视网膜脱离和复位模型,并对其进行临床观察和大体病理学研究。我们在兔玻璃体内注射透明质酸酶后用毛细玻璃管成功制作了孔源性视网膜脱离和复位模型。病理学观察显示:脱离7天的视网膜光感受器外节结构紊...  (本文共92页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

骨髓间充质干细胞向视网膜样结构诱导分化的体外和体内研究

视神经萎缩是世界范围内造成不可逆性盲目的主要原因之一。而导致视网膜神经节细胞损伤的青光眼、造成视网膜神经上皮层损害缺血性视网膜视神经病变如:糖尿病性视网膜病变和高血压性视网膜病变等是导致视神经萎缩的主要眼病。对于视网膜神经上皮层已严重受损的疾病,目前的治疗办法局限于视神经保护上,但这种办法不足以长期保存患者的有用视力。国内外学者为此应用多种办法制作眼缺血再灌注的动物模型。采用的治疗策略包括输注生长因子或细胞因子以减缓视网膜细胞的调亡、移植视网膜神经节细胞以重建视网膜的神经网络等。干细胞生物学的快速发展又为视网膜损伤治疗开辟了一条新的途径。用于眼内移植的干细胞包括胚胎干细胞、胚胎视网膜干细胞、成体视网膜干细胞、神经干细胞等。近几年骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)由于其具有多向分化潜能,可以取材于患者自体骨髓,移植排斥反应弱而成为干细胞研究的热点。尤其是BMMSC...  (本文共97页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

自由基、活性氧在视网膜光损伤中的作用及机理研究

年龄相关性黄斑变性(ARMD)是老年人致盲的主要原因,一些研究提示ARMD可能与视网膜长期累积的光化学损伤有关,推测视网膜光损伤的机理之一为视网膜组织吸收光能量,启动光动力学反应,产生自由基、活性氧,攻击视网膜组织引起脂质过氧化(LPO),并认为LPO在ARMD的发生发展中可能起重要作用。但迄今为止,视网膜LPO与视网膜抗氧化能力是否与年龄相关文献中未见报导,视网膜自由基、活性氧致伤理论尚缺乏直接证据,有关视网膜光损伤后自由基、活性氧的种类、来源、以及对视网膜组织的损伤特点还未完全弄清楚。为此,本文在以下三个方面对与ARMD有关的视网膜光损伤的自由基、活性氧机理进行研究:1.为了解视网膜LPO和抗氧化能力与年龄的关系,采用硫代巴比妥酸比色法与化学发光法,检测不同月龄大鼠视网膜LPD产物丙二醛(MDA)和相当于超氧化物歧化酶(SOD)活性的抗氧化能力。结果显示:大鼠视网膜MDA含量和相当于SOD活性的抗氧化能力随年龄增加分别呈升高...  (本文共121页) 本文目录 | 阅读全文>>