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猪水疱病病毒衣壳蛋白基因自杀性DNA疫苗研究

猪水疱病(Swine vesicular disease,SVD)是猪的一种烈性传染病,其临床症状与猪口蹄疫难以区别,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病。疫苗接种是防制传染性动物疫病的最有效的手段之一,SVD灭活苗曾有效地控制猪水疱病临床症状的发生,但并没有评估它是否能降低野生病毒的传播。目前国内外尚无市售的成品SVD疫苗。从SVD的世界流行状况来看,SVD对我国有一定的威胁。冈此有必要研发一种安全、有效、经济的疫苗作为战略储备。基于甲病毒复制子的自杀性DNA疫苗是近几年发展起米的一种新型疫苗,它比传统DNA疫苗更加安全有效。用自杀性DNA疫苗免疫是增强DNA疫苗免疫效力和安全性的重要策略之一。为了研究猪水疱病病毒(SVD virus,SVDV)衣壳蛋白基因自杀性DNA疫苗的免疫原性和保护效力,评价自杀性DNA疫苗从分子水平上防制SVD的潜在应用价值。本研究克隆了SVDV HK'70株衣壳蛋白基因1BCD,并进行了测序。  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因片段的原核与真核表达

兔瘟(Rabbit hemorrhagic disease,RHD)又称兔病毒性出血病,是由兔出血病病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)引起的一种急性高致死性兔传染病,研究该病对于经济学和生态学均具有重大意义。该病的特征病变表现为肝脏坏疽、出血和高死亡率。RHDV属于嵌杯病毒属,病毒粒子直径30-40nm,仅有一个较大的衣壳蛋白(60kDa),基因组长7.5kb,为单股正链RNA,并含有一个长2.2kb的亚基因组RNA。由于兔出血病病毒不能在现有的细胞系中培养,重组DNA技术成为获得病毒蛋白及其特征研究的重要手段。目前尚需要建立一个检测PHDV疫苗免疫后的抗体效价的方法,而这一方法的基础就是要获得RHDV核衣壳蛋白作为包被抗原。通过RT-PCR方法从感染RHDV的家兔肝脏中获得了RHDV VP60基因的cDNA序列,命名为VP60-A,并将其克隆到载体pUC19中进行测序。序列分析显...  (本文共140页) 本文目录 | 阅读全文>>

《植物病理学报》1989年04期
植物病理学报

用聚丙烯酰胺凝胶电泳病毒衣壳蛋白快速诊断瓜类作物上的三种病毒Ⅰ

对比已知病毒衣壳蛋白亚基分子量可知不同病毒的衣壳蛋白亚技分子贫有显著牛异[‘一3〕而且在几个病毒粒体形态很难区分印病毒组(球形或线形病毒组)之间及病毒组内各成员之间易于用分子量的差异加以鉴别。1971年Hill和Shephlordt“了用SDS一一聚丙烯酞胺凝胶电泳 (简称SDS一PAGE)对15种作物上分离纯化的病毒衣壳蛋白亚基分子量进行了比较,1 974年玲。11‘,6]首次提出病毒衣壳蛋白的SDS一AGE可以介为俭测植物病毒组内病毒存在的工具,1984年Miriam AIPev等工6入对侵染鳞茎笃尾叶片提取物经二次PEG沉淀后迸行SDS一AGE能检测出四种属于马铃薯Y病毒组队病毒。到目前为止,已经报道在自然条件一下,从瓜类植物上分离和鉴定的病毒有25种之多,根据这些病毒已报道氏,,分子量资料不出,病毒衣壳蛋白亚基的分子量有显著差异,因而设想用SDS一PAGF快速诊断瓜类作物病毒病是有可能的。 本试验以发生在我国葫芦科作物上...  (本文共5页) 阅读全文>>

中国科学院大学(中国科学院武汉物理与数学研究所)
中国科学院大学(中国科学院武汉物理与数学研究所)

新德里金属β-内酰胺酶-1的NMR研究及日本脑炎病毒衣壳蛋白表达纯化

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性问题变得日益严重,其中由耐药细菌产生的β-内酰胺酶更是人们研究的热点。2009年,在印度发现一种新型β-内酰胺酶—新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)。它能够分解除了多粘菌素和替加环素外几乎所有含β-内酰胺环抗生素,这给临床医疗带来了严重的危机。虽然结构生物学家们已对NDM-1的结构展开了研究,但详细的分子作用机制仍不十分清楚。本论文利用常规核磁共振技术以及~(19)F核磁共振围绕NDM-1的溶液结构及分子作用机制展开研究。首先,制备了 ~2H/~(13)C/~(15)N三标记NDM-1蛋白样品,利用常规三共振谱对di-Zn-NDM-1(功能态)主链信号进行了归属。在以上信号指认的基础上,利用TALOS+对di-Zn-NDM-1蛋白二级结构进行了预测,结果表明溶液中di-Zn-NDM-1的二级结构与晶体结构整体一致,含有5个α-螺旋、12个β-折叠以及loop区域。该研究对后期用NMR方法获...  (本文共69页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国家禽》2017年18期
中国家禽

禽白血病病毒衣壳蛋白表达载体的构建及应用

禽白血病病毒(ALV)首次被发现、分离和报道至今已有100多年历史[1]。近年来,ALV的宿主呈现扩大化趋势,起初主要在肉鸡群中感染,后来在蛋鸡和地方品种鸡中流行,近期在野鸭中也发现ALV基因片段[2,3]。由此可见,ALV从未停止过进化和变异。根据ALV的抗原性、宿主范围等,鸡的外源性ALV主要分为A~E和J 6个亚群[4]。近几年在中国大陆也出现了K亚群的报道[5]。ALV主要结构蛋白由pol、env和gag基因编码,其中gag基因主要编码p27、p12、p15和p19四种非糖基化结构蛋白。病毒的衣壳蛋白p27,约占病毒总蛋白量30%,在各亚群之间的同源性很高,是一段具有很高保守性的基因,是ALV的群特异性抗原[6],常作为ALV排毒检测的指标。根据以往的报道,病毒编码蛋白在病毒与宿主互作中发挥重要作用。PANG等[7]发现ALV p27蛋白在小鼠的巨噬细胞中抑制LPS刺激TNF-α的合成。高雁妮等[8]发现ALV p27在...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国兽药杂志》2017年01期
中国兽药杂志

细小病毒衣壳蛋白功能研究进展

细小病毒可以感染鸟类及哺乳动物,病毒在细胞核内增殖,某些细小病毒(如:腺病毒、疱疹病毒)需要辅助病毒的辅助才能增殖[1-2]。另一些细小病虽然能自行复制,但必须依赖有丝分裂过程中的聚合酶。细小病毒通常能凝集红细胞,但小鹅瘟病毒(Goose parvovirus GPV)不能凝集红细胞,仅能凝集黄牛精子。根据宿主特异性细小病毒科可分为两个亚科:细小病毒亚科(Parvovirinae)和浓核病毒亚科(Densovirinae),前者的宿主主要是脊椎动物,后者的是节肢动物。2014年国际病毒分类委员会将该科病毒重新分类,现被分为8个属:Amdoparvovirus、Aveparvovirus、Bocaparvovirus、Copipar-vovirus、Dependoparvovirus、Erythroparvovirus、Protopar-vovirus、Tetraparvovirus[3]。其中Erythroparvovirus属...  (本文共6页) 阅读全文>>