分享到:

猪水疱病病毒衣壳蛋白基因自杀性DNA疫苗研究

猪水疱病(Swine vesicular disease,SVD)是猪的一种烈性传染病,其临床症状与猪口蹄疫难以区别,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病。疫苗接种是防制传染性动物疫病的最有效的手段之一,SVD灭活苗曾有效地控制猪水疱病临床症状的发生,但并没有评估它是否能降低野生病毒的传播。目前国内外尚无市售的成品SVD疫苗。从SVD的世界流行状况来看,SVD对我国有一定的威胁。冈此有必要研发一种安全、有效、经济的疫苗作为战略储备。基于甲病毒复制子的自杀性DNA疫苗是近几年发展起米的一种新型疫苗,它比传统DNA疫苗更加安全有效。用自杀性DNA疫苗免疫是增强DNA疫苗免疫效力和安全性的重要策略之一。为了研究猪水疱病病毒(SVD virus,SVDV)衣壳蛋白基因自杀性DNA疫苗的免疫原性和保护效力,评价自杀性DNA疫苗从分子水平上防制SVD的潜在应用价值。本研究克隆了SVDV HK'70株衣壳蛋白基因1BCD,并进行了测序。  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国科学院大学(中国科学院武汉物理与数学研究所)
中国科学院大学(中国科学院武汉物理与数学研究所)

新德里金属β-内酰胺酶-1的NMR研究及日本脑炎病毒衣壳蛋白表达纯化

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性问题变得日益严重,其中由耐药细菌产生的β-内酰胺酶更是人们研究的热点。2009年,在印度发现一种新型β-内酰胺酶—新德里金属β-内酰胺酶-1(NDM-1)。它能够分解除了多粘菌素和替加环素外几乎所有含β-内酰胺环抗生素,这给临床医疗带来了严重的危机。虽然结构生物学家们已对NDM-1的结构展开了研究,但详细的分子作用机制仍不十分清楚。本论文利用常规核磁共振技术以及~(19)F核磁共振围绕NDM-1的溶液结构及分子作用机制展开研究。首先,制备了 ~2H/~(13)C/~(15)N三标记NDM-1蛋白样品,利用常规三共振谱对di-Zn-NDM-1(功能态)主链信号进行了归属。在以上信号指认的基础上,利用TALOS+对di-Zn-NDM-1蛋白二级结构进行了预测,结果表明溶液中di-Zn-NDM-1的二级结构与晶体结构整体一致,含有5个α-螺旋、12个β-折叠以及loop区域。该研究对后期用NMR方法获...  (本文共69页) 本文目录 | 阅读全文>>

《病毒学报》1985年04期
病毒学报

病毒衣壳蛋白的解离和重组

在生物微观世界中,某些病毒的结构形态是迄今为止研究得比较透彻的一种。病毒的衣壳蛋白在完成其生物功能—即和病毒核酸的相互作用,而后形成包裹衣壳,是自然界中蛋白质聚合成高级结构(四级结构)的一种典型的有序模型。目前,为数不少的病毒,包括植物、动物及细菌病毒的衣壳蛋白一级结构已经阐明,因此病毒的衣壳蛋白是研究蛋白质的解离、聚合、装配和重组,蛋白质各级结构之间的关系及蛋白质和核酸之间相互作用等问题的一个极好对象。对于病毒衣壳蛋白的解离和重组过程,巳有不少研究报道、综述和专著〔1,2〕。 除细菌病毒外,绝大部分动物和植物病毒的形态可以分为螺旋对称的捧状和线状结构,廿面体对称的球状结构,以及另一种较为特殊的弹状或杆状结构。后者由于结构复杂,目前虽巳对其各组分进行分离,但体外重组还未成功。 在60年代早期,我们实验室曾经对烟草花叶病毒(TMV)衣壳蛋白的解离和聚合进行了研究〔3、6〕。同时也指出过简单的球状病毒的解离和重组的可能性,并且选择了...  (本文共5页) 阅读全文>>

《国际病毒学杂志》2006年02期
国际病毒学杂志

黄病毒衣壳蛋白研究进展

黄病毒科(Flaviviridae)包括肝炎病毒、瘟病毒和黄病毒3个属,黄热病毒属病毒简称黄病毒,包括约68种病毒,其中多数(约38种病毒)与人类疾病有关,如登革(DEN)、日本乙型脑炎(JE)、西尼罗(WN)和黄热(YF)等病毒严重影响着人类健康。黄病毒基因组为长约10kb的单股正链RNA,由单一的开放读码框(ORF)编码一多聚蛋白(polypro-tein),经病毒和宿主蛋白酶对其进行协同翻译和翻译后加工,最后形成3种结构蛋白(C、PrM和E)和7种非结构蛋白。其中衣壳蛋白C位于病毒颗粒内部,与基因组RNA共同构成病毒核衣壳。黄病毒衣壳蛋白在结构上具有一定的相似性,功能上具有多样性,它在病毒RNA衣壳化和病毒颗粒组装过程中起重要作用。一、衣壳蛋白结构的研究自然状态下的衣壳蛋白主要以两种形式存在,一种是未成熟的衣壳蛋白,存在于病毒单一开发读码框(ORF)编码的多聚蛋白中;另一种是经病毒蛋白酶NS2B/3切割产生的成熟衣壳蛋白,...  (本文共4页) 阅读全文>>

《植物病理学报》1989年04期
植物病理学报

用聚丙烯酰胺凝胶电泳病毒衣壳蛋白快速诊断瓜类作物上的三种病毒Ⅰ

对比已知病毒衣壳蛋白亚基分子量可知不同病毒的衣壳蛋白亚技分子贫有显著牛异[‘一3〕而且在几个病毒粒体形态很难区分印病毒组(球形或线形病毒组)之间及病毒组内各成员之间易于用分子量的差异加以鉴别。1971年Hill和Shephlordt“了用SDS一一聚丙烯酞胺凝胶电泳 (简称SDS一PAGE)对15种作物上分离纯化的病毒衣壳蛋白亚基分子量进行了比较,1 974年玲。11‘,6]首次提出病毒衣壳蛋白的SDS一AGE可以介为俭测植物病毒组内病毒存在的工具,1984年Miriam AIPev等工6入对侵染鳞茎笃尾叶片提取物经二次PEG沉淀后迸行SDS一AGE能检测出四种属于马铃薯Y病毒组队病毒。到目前为止,已经报道在自然条件一下,从瓜类植物上分离和鉴定的病毒有25种之多,根据这些病毒已报道氏,,分子量资料不出,病毒衣壳蛋白亚基的分子量有显著差异,因而设想用SDS一PAGF快速诊断瓜类作物病毒病是有可能的。 本试验以发生在我国葫芦科作物上...  (本文共5页) 阅读全文>>

《病毒学报》2007年04期
病毒学报

我国分离的盖塔病毒衣壳蛋白基因和3′非翻译区分子特征研究

盖塔病毒(Getah virus,GETV))是披膜病毒科甲病毒属中的一个成员,广泛分布于亚洲地区及澳大利亚北部的太平洋沿岸地区[1-5]。目前在中国已经分离到包括GETV在内的至少五种甲属虫媒病毒[4-8],其中包括在海南省分离到的1株(M1)和河北省分离到的2株(HB0215-3和HB0234)GETV[4,5]。这3株GETV分离地域和年代都有很大的差距,而以往对M1病毒基因组3′区部分核苷酸序列的分析发现其3′非翻译区(3′UTR)分别有10nt和228nt的缺失,而且包括保守的19nt区缺失[9]。而甲病毒3′UTR末端19nt保守序列对于病毒的复制和存活非常重要,是病毒存活所必须的元件[10]。衣壳蛋白基因是编码病毒衣壳蛋白的基因,对病毒粒子的形成和存活至关重要[11]。鉴于以上原因,我们对分离自我国南方和北方的3株病毒进行了衣壳蛋白全长基因和全长3′UTR区的遗传特征分析,以全面了解我国不同地域和不同年代分离到的G...  (本文共6页) 阅读全文>>