分享到:

簇毛麦cDNA文库构建及小麦抗病相关基因克隆与功能分析

小麦白粉病是由白粉病菌(Erysiphe graminis Dc.f.sp tritic Marchal)引起的世界性真菌病害,培育抗性品种是控制白粉病的有效途径。上世纪八、九十年代我国原有的抗白粉病小麦品种大部分都含有Pm8抗源,但是随着白粉菌生理小种的不断变化,Pm8已经逐渐失去了抗性,寻找和利用新的白粉病抗性基因对于我国小麦生产有重要意义。南京农业大学细胞遗传所培育的6VS/6AL易位系带有的抗白粉病基因Pm21抗性强、抗谱广,因此对Pm21基因及白粉病抗性相关基因进行克隆具有重要的意义。构建cDNA文库是基因克隆的基础,但是由于小麦基因组庞大,所需文库含克隆数太多,后续筛选工作较为复杂,所以本研究以Pm21基因供体物种簇毛麦(2n=14,VV)为材料构建了白粉菌诱导的簇毛麦叶片cDNA文库。此文库包含30万个重组克隆,平均插入片段为1.6kb,用本研究克隆到的谷胱甘肽还原酶(Ta-GR)基因,蓝铜结合蛋白基因(BCB)和  (本文共142页) 本文目录 | 阅读全文>>

四川大学
四川大学

恒河猴肝脏cDNA文库构建及部分凝血相关因子的遗传分子研究

恒河猴(Macaca mulatta)是在进化亲缘关系上仅次于黑猩猩和人的灵长类动物,广泛应用于生物医学研究的各个领域。随着移植科学的发展,猪-恒河猴移植已成为了猪-人异种移植研究中重要的动物模型,但由于猴与人仍然存在一定的进化差异,猪到猴异种移植的实验结果是否也同样真实反映了猪的异种器官组织在人体内的情况是非常值得关注的问题。动物模型研究发现凝血紊乱是目前阻碍异种移植的最大障碍之一,其主要原因可能是超急性排斥引起的免疫损伤和供受者凝血系统分子不匹配,但具体机制还不清楚。因此,深入了解恒河猴凝血相关基因的特点和遗传背景,比较恒河猴凝血系统与人和猪的差异,有助于更加有效地建立动物模型,研究异种移植凝血紊乱的机制以及可能的防治措施,更准确地理解和应用恒河猴动物模型的实验结果,使安全有效的异种移植真正走向临床应用。cDNA文库的构建是分子生物学领域的一项重要技术,应用cDNA文库筛选和克隆新基因,是一条快速而有效的途径。但如何快速高效...  (本文共270页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

水貂脾脏cDNA文库构建及MuLu-DRA基因克隆与多态性分析

主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)是脊椎动物中发现的编码组织相容性抗原的高度多态、紧密连锁的基因群,在免疫应答中起重要作用。由于其在动物抗病性能上发挥着重要作用,成为人类及畜牧业发展中的一个重要的研究课题。水貂是我国毛皮动物饲养的主要品种之一,水貂皮是高档裘皮,在我国已有50多年的养殖历史。毛皮动物养殖的关键因素是疾病的预防,而通过免疫来达到这一目的是最有效的手段之一。但目前对水貂免疫机制等方面的研究还比较薄弱。本研究通过构建cDNA全长文库,为水貂的功能基因的克隆、分析奠定基础;通过对水貂MuLu-DRA基因的克隆及多态性分析,为进一步研究水貂的群体进化、抗病相关候选基因的克隆提供理论数据。(1)本研究通过SMART(Switching Mechanism At 5’end of the RNA Transcript)技术构建了美国短毛黑水貂脾脏全长文库。大肠杆菌X...  (本文共98页) 本文目录 | 阅读全文>>

《江苏农业学报》2018年01期
江苏农业学报

家福捕鸟蛛毒腺cDNA文库构建及其毒素-16序列和活性分析

近年来随着研究的不断深入,蜘蛛毒素的重要性日益显现。蜘蛛毒素的专一性和高效性使其成为潜在的新型药物、离子通道工具试剂和杀虫剂等领域重要的原料来源[1-2],其在农业生物技术、神经生物学、蛋白质化学、天然药物开发等领域广泛应用。由于蜘蛛毒液分泌量很少,且其毒液是由很多性质不同、含量差异很大的成分组成的混合物,除了几个主要成分外,大多数成分在粗毒中含量很低,因此很难获得足够的单体毒素用于相关研究[3]。随着分子生物学的发展,利用毒腺c DNA文库的构建结合基因工程表达的方法可以有效解决毒素来源问题。近十年来,已经构建了很多有毒动物毒腺c DNA文库[4-9],获得了大量的编码毒素的ESTs序列。疼痛是世界医学面临的重大难题,也是急需攻克的顽固性疾病。目前,这种疾病严重影响到数百万人的生命[10]。研究发现电压门控钠通道的改变与炎性疼痛和神经病理性疼痛密切相关[11]。能阻断这些钠通道亚型的成分具有开发成为治疗疼痛的药物分子的潜能。由...  (本文共9页) 阅读全文>>