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PMA、PGE_2对小鼠TNF-α基因转录调控的影响

肿瘤坏死因子(TNF,Tumornecrosis factor)是一具有多种功能的细胞因子,参与体内许多生理、病理过程,如:免疫调节、炎症、休克、杀伤肿瘤等。TNF-α主要由巨噬细胞分泌产生,有许多体内、外物质可激活巨噬细胞、诱导TNF-α基因转录表达。TNF-α的产生需经两个过程:1) 启动阶段;2) 诱出阶段。激活巨噬细胞诱导TNF-α基因表达的信号转导途径可分为两类:一类是PKC依赖的,以诱导剂PMA为代表;另一类是非PKC依赖的。两类信号转导途径作用机制及其相互关系目前仍不十分清楚,可能与它们诱导不同的转录因子有关。以往我们实验室曾对LPS诱导小鼠TNF-α基因表达及PGE_2对此的抑制作用做过研究。本文对PMA诱导小鼠TNF-α基因表达的转录调控机制及PGE_2对PMA诱导小鼠TNF-α基因表达的影响及其分子机制做了初步研究。实验结果表明:PMA可诱导P388D1细胞系分泌产生TNF-α,此作用可受到PGE_2的抑  (本文共85页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

实时荧光定量RT-PCR检测CD109、RFP和BRDT基因表达

目的:近年来,肿瘤的发病率和死亡率呈明显上升趋势,严重威胁着人类健康。常规的化疗、放疗和手术疗法仍存在着各种问题,因此迫切要求寻找新的治疗手段。肿瘤免疫治疗亦是这些新的治疗手段之一。然而研制肿瘤治疗性疫苗,其前提是需要获得特异性肿瘤抗原。肿瘤细胞是正常细胞的“非己”化。肿瘤细胞在“非己”化过程中,必然会产生一些“非己”的成分。我们把肿瘤的这种“非己”成分限定为只存在于肿瘤细胞,而正常组织细胞不具有的细胞成分,通常称为肿瘤抗原。机体免疫系统可以识别任何“非己”的成份,并通过免疫应答将其排除。近些年来,肿瘤抗原研究的重要进展之一,就是人们对肿瘤抗原递呈和免疫识别有了新的了解,认识到机体免疫系统抗肿瘤主要方式是T淋巴细胞介导的免疫排斥反应,主要是CD8~+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)通过其受体TCR识别MHCl类分子结合的肿瘤抗原肽而活化并发挥杀伤肿瘤细胞的效应,有人把这一认识概括为MHC一抗原肽一TCR模式,这里所说的抗原肽是CTL...  (本文共119页) 本文目录 | 阅读全文>>

河北医科大学
河北医科大学

hrg-1基因表达与功能研究

高血压是环境因素和遗传因素相互作用所引起的多基因疾病。血管活性肽及其受体、生长因子和细胞因子及其受体、细胞信号转导蛋白、细胞周期调控蛋白等都与高血压的发生有关,这些能影响血压的基因称为高血压相关基因。高血压相关基因(hypertension-related gene, hrg-1)是用差异显示技术对SHR和WKY大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)cDNA文库进行筛选时分离得到的一个与VSMC增殖相关的新基因,因其在SHR VSMC中表达活性降低而得名。后来发现,该基因不仅在VSMC中表达,在心、肾、脑、肺、肝、白细胞等不同组织中也有广泛分布。虽有研究揭示,转染hrg-1蛋白能抑制Raf(Raf-1)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)活性,下调抗细胞凋亡基因(bcl-2)和增殖细胞核抗原(PCNA)基因表达及抑制细胞增殖。但目前关于hrg-1基因表达产物影响VSMC增殖、迁移、分...  (本文共107页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国中医研究院
中国中医研究院

从益髓生血颗粒调控β-珠蛋白及相关基因表达探讨肾生髓理论的分子机制

本研究是在导师吴志奎研究员肾生髓理论现代研究与临床实践的学术思想指导下,以国家自然基金资助课题为依托,把中医的理论思维和前沿技术有机结合,对益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血的整体效应和疗效的分子机制进行研究。在该药取得显著临床疗效的基础上,采用ELISA、RT-PCR、激光共聚焦显微镜扫描技术、凝胶滞后试验、real-time PCR、DD RT-PCR等实验技术,从造血刺激因子的表达,β-珠蛋白基因簇LCR HS2序列DNA与蛋白质相互作用,珠蛋白基因表达调控发挥重要作用的红系特异的反式作用因子基因的表达,以及与红细胞溶血相关的铁蛋白基因表达等方面,多层次研究了益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血调控珠蛋白基因表达的分子机制,取得了有学术价值的研究结果。一、理论研究1、从肾生髓与藏精的内在关系、肾生髓与髓养骨、肾生髓通于脑以及肾生髓生血四个方面,对历代有关肾生髓理论的文献论述进行分析归纳,以期加深对经典肾生髓理论的认识。通过对近年来有...  (本文共126页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军事医学科学院
中国人民解放军军事医学科学院

埃他卡林对心肌和平滑肌ATP敏感性钾通道基因表达的调节及其组织选择性的研究

由内向整流钾通道Kir(inward rectifier potassium channel)亚基和磺酰脲类受体SUR(sulfonylurea receptor)亚基构成的ATP敏感性钾通道(ATP-sensitivepotassium channels,K_(ATP))是新型抗高血压药物——钾通道开放剂(potassiumchannel opener,KCO)的作用靶点。但是,由于已有的钾通道开放剂缺乏明确的组织选择性,虽然有效降压但却引发各种副反应,临床上亟待新型钾通道开放剂类化合物出现。埃他卡林(iptakalim,Ipt)不仅降压作用确切、平稳和持久,并且具在一定的选择性作用特征:对心率影响轻;选择性舒张小动脉而对大动脉的舒张作用无影响;不影响骨骼肌细胞K_(ATP)电流;在高血压状态下降压作用强而不引起正常血压的显著下降,并逆转高血压心血管的结构和功能重构。基于以上研究背景,本文旨在探讨药物引发功能变化后的基因表达变...  (本文共70页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

脂肪细胞分化相关因子基因表达在猪生长过程中的变化规律研究

本课题采用半定量RT-PCR法,检测了不同生长阶段杜长大猪(1kg、30kg、50kg、70kg、90kg)皮下脂肪组织中脂肪细胞分化调控转录因子—过氧化物增殖体激动剂受体(PPAγ)、CAATT增强子结合蛋白(C/EBPα)、脂肪细胞确定分化依赖因1(ADD1)和脂肪细胞分化标志性分子—脂蛋白脂酶(LPL)、脂肪细胞脂结合蛋白(AP2)和脂素(adipsin)的mRNA水平,探讨了它们的基因表达随动物体重增加的变化规律,揭示其在脂肪代谢过程中的调控作用。根据Genebank登陆的PPARγ,C/EBPα,ADD1,LPL,AP2,adipsin和内标β-actin基因序列设计引物,分别以皮下脂肪组织RNA为模板,经反转录和PCR,克隆得到了相应的基因片断并进行测序。对测序结果进行序列分析,表明得到的PPARγ,C/EBPα,ADD1,LPL,AP2,adipsin和β-actin基因序列与Genebank登陆的相应基因片断(登...  (本文共108页) 本文目录 | 阅读全文>>