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抗人前列腺癌PSA scFv-TAT-MION的制备及其在荷人前列腺癌裸鼠模型的MR分子成像研究

目的:1.制备抗人前列腺癌PSA scFv-TAT多肽并进行相关分析;2.制备单晶体氧化铁纳米化合物(MION)并对其进行相关检测;3.制备MR分子探针scFv-TAT-MION并进行相关分析;4.分析scFv-TAT-MION对荷人前列腺癌裸鼠移植瘤模型MR分子成像的效果及其意义。方法:1.应用快速翻译系统(RTS)将E487 scFv基因质粒表达为scFv-TAT肽,对后者进行电泳分析、免疫沉淀反应、Western Blotting分析及免疫荧光染色分析。2.应用共沉淀法,将Fe~(2+)和Fe~(3+)制备成氧化铁纳米粒子后与PAMAM树形分子偶联,形成单晶体氧化铁纳米化合物(MION)。对MION进行透射电镜和红外光谱等分析,并进行活体(新西兰大白兔)MR检测。3.制备MR分子探针scFv-TAT-MION,并对其进行透射电镜观察和红外光谱分析。4.建立荷人前列腺癌裸鼠模型,并应用scFv-TAT-MION对其进行MR分  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

新型抗凋亡分子hPEBP4作为人前列腺癌治疗靶点的实验研究

前列腺癌是欧美国家男性最常见的恶性肿瘤之一,在我国也有上升趋势。对于晚期及转移的前列腺癌,目前还没有有效的治疗方法。凋亡是很多化疗药物发挥作用的机制,如果凋亡途径发生异常,将会导致一些肿瘤细胞对化疗药物不敏感。因此,如何提高药物的凋亡诱导率,降低副反应,增强肿瘤细胞对药物的敏感性成为目前研究的热点。磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine-binding protein,PEBP)蛋白是一类能与磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)结合的蛋白。该家族的所有成员都含有与PE结合的保守区域(PBP)。hPEBP4为本实验室从人骨髓基质细胞中克隆到的新型磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族成员。RT-PCR结果显示hPEBP4在前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌等肿瘤细胞中高表达。在乳腺癌细胞MCF-7中的研究表明hPEBP4能通过抑制Ras/Raf/MEK1/ERK1/2途径、JNK活化和PE...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

第二军医大学
第二军医大学

基于美国样本资料的Partin tables用于国人前列腺癌病理特征预测的准确性研究

目的:应用外部数据验证并比较Partin tables及Partin tables Update预测前列腺癌根治术后病理特征的准确性。方法:2000年6月至2005年12月,167例临床局限性前列腺癌接受前列腺癌根治术。应用Partin tables及其Update预测器官局限性癌、包膜侵犯、精囊侵犯及淋巴结转移的发生概率。采用ROC曲线下面积的方法检验Partin tables预测术后病理特征的准确性。两ROC曲线下面积的比较采用非参数法检验。结果:应用Partin tables预测器官局限性癌、包膜侵犯、精囊侵犯及淋巴结转移发生率的ROC曲线下面积分别为0.685、0.655、0.798及0.742;应用Partin tables update预测上述相应病理特征的ROC曲线下面积分别为0.639、0.603、0.713及0.641。通过对预测精囊侵犯的两条ROC曲线下面积进行非参数检验,显示Partin tables up...  (本文共92页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

人前列腺癌细胞特异性结合短肽的筛选及鉴定

为了给针对人前列腺癌细胞不同位点的靶向药物设计提供实验依据,本研究以人前列腺癌细胞系PC3M细胞为靶细胞,人正常前列腺细胞及PC3细胞为吸附细胞对噬菌体7肽库进行差减筛选,得到多个人前列腺癌相关结合短肽和人前列腺癌高转移相关结合短肽。通过细胞ELISA实验、免疫细胞化学实验及DNA测序对其结构与功能进行了的鉴定;研究了其对于肿瘤细胞的生物学行为的影响;应用RT-PCR技术钓取人前列腺癌高转移相关结合短肽拟似的蛋白;应用WesternBlot方法回钓PC3M细胞表面与人前列腺癌高转移相关结合短肽结合蛋白质的大小及分布。结论如下:差减筛选获得8个人前列腺癌相关结合短肽和14个人前列腺癌高转移相关结合短肽,其均具有对PC3M细胞的高效率的靶向性;人前列腺癌高转移相关结合短肽可能在结构和功能上拟似了人体内自然状态下存在的含有SPTWSFL序列的未命名蛋白质和APLP2蛋白;通过蛋白回钓得到PC3M细胞表面和人前列腺癌高转移相关结合短肽结...  (本文共84页) 本文目录 | 阅读全文>>

南华大学
南华大学

IFN-γ下调EphA2抑制人前列腺癌PC3细胞迁移、侵袭及血管生成拟态形成

目的:探讨干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)对人前列腺癌PC-3细胞迁移、侵袭及血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)形成的影响及其机制。方法:以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,用不同浓度干扰素-γ处理(分别加10、100、1000μg/L)。划痕实验和侵袭实验分别评价PC3细胞的迁移和侵袭能力;三维培养观察PC3细胞血管生成拟态(VM)形成能力;RT-RCR检测PC3细胞中上皮细胞激酶2(Erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma-A2,EphA2)m RNA表达水平;免疫印迹(Western Blot,WB)检测PC3细胞中EphA2蛋白表达。结果:1.划痕实验结果显示,不同浓度(10μg/L、100μg/L和1000μg/L)的IFN-γ对不同作用时间点(24 h、48 h和72 h)的人前列腺癌PC3细胞的迁移距离均具有缩短...  (本文共60页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中华泌尿外科杂志》1990年30期
中华泌尿外科杂志

人前列腺癌cDNA文库的构建

从前列腺癌患者的经尿道电切标本中提取总RNA,再通过高效的cDNA合成技术构建人前列腺癌的cDNA文库,为进一步开展前列腺癌分子病因学的研究奠定基础。材料和方法一、前列腺癌标本的获得62岁男性患者,经前列腺穿刺活检证实为前列腺腺癌,Gleason评分为7分(4+3),骨扫描示有多发骨转移,B超及CT示盆腔多处淋巴结转移,分期为D2,T4N1M1。经LHRH激动剂(Zoladex)治疗1年后症状恶化,行姑息性经尿道电切及双侧睾丸切除术。切除之组织块立即以液氮处理,-80℃冻存。二、生化试剂Isogen试剂及OligotexTMdT30试剂盒为罗氏株式会社产品,OligodT18,RNA酶抑制剂(RNasin),莫洛尼鼠白血病病毒(MMLV)逆转录酶,RNA酶H,大肠杆菌DNA多聚酶Ⅰ,T4DNA聚合酶,T4DNA连接酶,λgt10去磷酸化臂,噬菌体体外包装系统,BiogelA50m层析柱,菌株C600hfl-,显色剂和诱导剂I...  (本文共4页) 阅读全文>>