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骨髓增生异常综合征患者的基因表达谱研究

骨髓增生异常综合征(MDS)包括一组获得性克隆性造血干细胞疾患,是在临床上分析排除难治性贫血、后天特发性铁粒幼细胞贫血、白血病前期、潜袭型白血病等疾病特点的基础上,界定出来的一个独立疾病实体。造血细胞发育异常(dysp1asia)或称病态造血所致的贫血和具有转化为白血病的高风险性是MDS的基本特征。由于病态造血累及的造血细胞系列和严重程度轻重不一,因此MDS患者的骨髓细胞成分和临床表现呈现极大的异质性。有些患者早期甚至没有明显的病态造血表现。虽然染色体的异常可以为诊断提供依据,但染色体异常的检出率偏低,因此不少病例常难以确诊或导致误诊。骨髓增生异常综合征(MDS)的发病机制目前仍不清楚,一些假说认为,MDS的发病是一个多步骤,多因素共同作用的过程。细胞毒素或自发的突变引起造血干/祖细胞的损伤,在其他因素的协同作用下,这类细胞获得生长优势或受到进一步的影响。这些因素主要通过影响细胞生长,分化及细胞周期相关的基因的表达,如错配修复基  (本文共90页) 本文目录 | 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

骨髓增生异常综合征患者的基因表达谱研究

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干细胞的克隆性疾病,表现为全血细胞减少、骨髓病态造血,患者高风险转化为急性白血病,被认为代表着白血病发生的前期过程。根据骨髓中原始细胞和铁粒幼细胞比例、外周血单核细胞数量,FAB协作组将MDS分为(1)难治性贫血(RA);(2)伴有铁粒幼细胞的难治性贫血(RAS);(3)原始细胞增多的难治性贫血(RAEB):(4)转化中的RAEB(RAEBt):(5)慢性粒单核细胞白血病(CMML)。迄今为止,形态学异常仍然是诊断MDS的重要标准。然而,由于各系细胞病态造血表现轻重不一,有些患者仅表现为单系异常如特发性大红细胞性贫血、单纯性中性粒细胞减少或血小板较少甚至没有明显病态造血现象,这些“早期MDS”或“not yet MDS”有时与巨幼细胞性贫血(MA)、缺铁性贫血(IDA)等增生性贫血和慢性再生障碍性贫血(CAA)难以鉴别。染色体异常为疾病的克隆性提供了诊断性依据,但其检出率仍不高。因此,...  (本文共80页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军医进修学院
中国人民解放军军医进修学院

白血病细胞WT1基因的表达机理

WT1基因位于染色体11P13上,被认为是一个肿瘤抑制基因,编码产生一种具有锌指结构的转录因子,在正常造血及白血病的发生和发展中起着重要作用。WT1基因表达能部分地抑制维甲酸或维生素D3诱导的白血病细胞系的分化过程。WT1基因在正常骨髓及外周血中的CD34~+CD33~-细胞中表达,但表达水平很低;多数急性白血病均有WT1基因表达,慢性粒细胞白血病慢性期及慢性淋巴细胞白血病细胞无表达。基因启动子区DNA甲基化水平在基因表达调控中起着重要作用,DNA超甲基化常抑制基因表达,文献报告一些实体瘤WT1基因发生了甲基化,但并未影响其表达;白血病细胞WT1基因启动子区DNA甲基化水平以及甲基化与WT1基因表达的关系尚未见文献报告。我们在甲基化敏感PCR(MS-PCR)的基础上进行改良,结合内切酶消化的新技术对白血病细胞系WT1基因启动子区DNA的甲基化水平及DNA超甲基化对WT1基因表达的影响进行了研究,在此基础上又进一步研究了去甲基化处...  (本文共79页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军事医学科学院
中国人民解放军军事医学科学院

Pten基因敲除小鼠转录上调新基因pdd87的功能研究及Pten缺失的胚胎成纤维细胞的蛋白质组分析

Pten作为第一个被发现的具有磷酸酶功能的抑癌基因,是目前肿瘤研究的热点基因之一。本研究工作是在已建立的Pten基因敲除胚胎成纤维细胞系MEF1/Pten-/-和MEF2/Pten-/-及基因芯片法识别PTEN调控的未知基因研究的基础上开展的,目的是对Pten基因敲除胚胎成纤维细胞系的特性进行进一步鉴定及研究一个在Pten基因敲除胚胎成纤维细胞中高表达的新基因pdd87的功能。首先,我们对引进的Pten基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞系MEF1/Pten-/-和MEF2/Pten-/-细胞中PTEN的表达情况及其细胞周期变化进行了研究。试验结果表明PTEN在Pten基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞中不表达,而在正常胚胎成纤维细胞中PTEN是正常表达的,以它们为实验模型进一步研究PTEN的功能是可靠的。Pten基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞系MEF2/Pten-/-与MEF1/Pten-/-相比其S期细胞比例更高。两个细胞系的AKT信号转导通...  (本文共81页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军事医学科学院
中国人民解放军军事医学科学院

两条新的肺癌转移相关基因的获取、鉴定与功能研究

肿瘤细胞转移能力的获得是多种基因的结构、功能和表达情况改变积累的结果。Filder提出的肿瘤异质性学说以及Wessinman提出的将细胞表型与其基因结构及表达的特征相联系的表型克隆思想为认识这些差异基因提供了基础。因此,在本研究中,我们应用基于表型克隆原理的抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)技术,以源于同一母系但具有不同转移能力的一对肺巨细胞癌细胞株为模型,寻找与肺巨细胞癌转移促进相关的基因,并对其中的两条基因进行生物功能验证和作用机制的初步探讨。在SSH实验中,以具有高转移能力的人肺巨细胞癌细胞株PLA-801D为实验方,以不具转移能力的细胞株PLA-801C为驱动方进行杂交,将杂交产物经PCR扩增、纯化后连接至pGEM-Teasy载体并转化JM109大肠杆菌,最终得到了566个含有cDNA差异表达片段的单克隆细菌菌落。经PCR确认这些细菌克隆中含有长度在250-...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>

复旦大学
复旦大学

KIAA0008基因与肝细胞癌侵袭表型的关系及其机制研究

目的 KIAA0008基因是复旦大学肝癌研究所(以下简称“我所” )前一时期通过基因芯片技术发现的与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)侵袭转移潜能高度相关的候选基因之一,可能在HCC侵袭转移中起重要作用。本课题进一步验证此基因与HCC侵袭转移潜能的关系,并探讨其作用机制。 方法 用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测27例HCC手术标本中KIAA0008基因的表达水平,并采用更精确的荧光定量实时RT-PCR(Real-time RT-PCR)作定量分析;27例HCC中有23例伴有相邻无瘤肝组织标本,5例还伴有肝内转移灶标本;根据临床病理学指标,将27例HCC分为高、中、低侵袭性三组,对不同侵袭性HCC之间KIAA0008基因的表达水平进行比较分析。为验证HCC临床标本中的检测结果,采用实时RT-PCR检测我所建立的遗传背景相同,而侵袭转移潜能逐级升高的三株HCC细胞系(MHCC97L、MH...  (本文共103页) 本文目录 | 阅读全文>>