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细胞—细胞外基质复合材料修复尿道缺损的实验研究

目的:本研究利用组织工程原理和干细胞技术,构建尿道组织,修复兔尿道全段缺损。对细胞与细胞外基质材料在体外的复合方法,复合细胞材料修复尿道缺损的过程及其与单纯细胞外基质材料修复效果的差异,种子细胞在植入机体后的命运转归进行初步探讨,为进一步研究奠定基础。同时初步探讨利用BMSC-FG作为填充材料(Bulking Agent,BA)治疗压力性尿失禁及膀胱输尿管返流的可行性。方法:①选择兔膀胱尿路上皮细胞、兔膀胱平滑肌细胞及兔骨髓间充质干细胞(BMSC)作为种子细胞,采用相应的培养及纯化策略,获取满足实验要求的种子细胞。并对两种可行的上皮细胞培养方案进行对比,选择更好的培养方法。利用细胞计数及MTT法对三种细胞在体外的生长增殖情况进行研究。利用脂质体转染对兔BMSC进行绿色荧光蛋白基因转染,试图获得稳定表达。②选择两种常用的泌尿外科组织工程材料——同种膀胱细胞外基质BECM和猪小肠粘膜下层SIS分别与兔BMSC及兔尿路上皮细胞进行复合  (本文共128页) 本文目录 | 阅读全文>>

武汉大学
武汉大学

复合转基因EPCs的细胞—细胞外基质复合材料在修复长管状尿道缺损中的实验研究

目的:本文研究旨在利用组织工程学原理、细胞分子生物学技术和干细胞技术等,构建一种全新的、复合了包含有广谱抗微生物活性和促血管化作用的抗菌肽LL-37的转基因血管内皮祖细胞和尿路上皮细胞、平滑肌细胞等种子细胞的新型组织工程化尿道组织,从而探索利用该生物材料修复长段管状尿道缺损的可能性。对其中涉及的转基因技术,如慢病毒表达载体的构建、质粒表达的检测、慢病毒的包装及目的细胞的代感染等方法进行探讨,为以后可能的组织工程学技术联合转基因技术奠定基础。同时,鉴于本文涉及的泌尿系组织工程学常用种子细胞,如内皮祖细胞、尿路上皮细胞等,在分离、培养和鉴定等试验方法方面尚存较多争议,遂结合自身经验探讨循外周血途径高效获取内皮祖细胞,通过膀胱黏膜的移行上皮细胞转化培养尿路上皮细胞的方法。方法:(1)慢病毒的包装和病毒滴度的检测。(2)目的基因LL-37过表达慢病毒载体的构建,并进行超纯化的去内毒素抽提,使其具有较高的安全性,同时对构建的载体PGC-F...  (本文共73页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国组织工程研究与临床康复》2008年19期
中国组织工程研究与临床康复

丝素蛋白膜对犬不同长度尿道缺损的修复效果

0引言尿道先天畸形及各种原因引起的尿道狭窄缺损是泌尿外科常见病,由于尿道黏膜组织有限,给尿道的修复带来了相当的困难。目前临床上常采用自体非尿道组织(如皮肤、颊黏膜、膀胱黏膜、睾丸鞘膜和腹膜等组织)[1]修复,并取得较好的临床效果,但仍存在感染、尿瘘、毛发生长、再狭窄、结石形成、憩室产生等并发症,常需反复治疗。这种以“牺牲健康组织去修复病损组织的治疗方式已受到严峻挑战”[2]。组织工程方法是尿道缺损修复的一个方向,并取得了突破性进展,Italiano等[3]用一种由透明质酸合成的可降解的支架材料来修复兔尿道,7个月后尿道放射学检查见移植物消失,尿道重建,再生组织在一定压力下具有良好的伸展性,组织学观察见再生尿道组织中有过度的上皮细胞形成,并有丰富的弹性纤维。Sievert等[4]用同种异体脱细胞尿道基质修复兔长达1cm左右的缺损,术后10d,上皮细胞从宿主迁移至基质支架,术后3周基质支架的尿道管腔完全由上皮细胞覆盖,3个月时可见平...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中华护理杂志》2009年03期
中华护理杂志

脱细胞尿道细胞外基质修复尿道缺损的护理

尿道先天畸形、后天损伤或因疾病需要重建尿道时,常因缺乏适当的重建材料或使用材料不当,使重建手术困难甚至失败[1]。组织工程学的兴起为泌尿系组织或器官的重建开辟了新的途径[2]。2005年10月至2007年11月,我科应用组织工程学材料——脱细胞尿道细胞外基质(extracellular matrix,ECM)(北京清源伟业组织工程生物科技有限公司提供)作为尿道替代材料治疗男性长段尿道缺损5例,取得满意疗效。现将相关护理经验报告如下。1临床资料本组5例,均为男性,年龄17-68岁,平均52岁。病程4-56个月,平均15.4个月。尿道狭窄原因:尿道外伤3例,医源性尿道损伤1例,因留置导尿管并发尿道炎1例。术前均行尿道造影显示尿道缺损部位及长度:前尿道狭窄2例、球部尿道狭窄2例、狭窄从前尿道延伸到后尿道1例。狭窄长度3-8cm,平均5cm。术前耻骨上膀胱造瘘2例,余3例最大尿流率2.3-5.5ml/s。5例患者中1例初期尿道有渗液,经...  (本文共2页) 阅读全文>>

《广东医学》2009年06期
广东医学

带蒂阴囊纵隔皮瓣在儿童外伤性尿道缺损中的应用

儿童外伤引起的尿道缺损往往病情复杂,手术治疗十分困难,而且术后并发症多,2002年2月至2007年12月我们采用带蒂阴囊纵隔皮瓣尿道成形术治疗儿童外伤性尿道缺损21例,效果满意,报告如下。1资料与方法1·1一般资料本组21例,均为男性患儿,年龄2~13岁,平均6·5岁,病程1~4年,均为外伤或车祸后骨盆骨折后尿道损伤所致,伤后12例行尿道会师术,5例行耻骨上膀胱造瘘,4例行Ⅰ期经会阴尿道吻合术;患儿中8例曾行Ⅱ期尿道吻合或成形术,4例曾行3次以上尿道手术。患儿术前均有膀胱造瘘,并通过尿道镜检或膀胱尿道造影确诊为尿道缺损,尿道缺损长度2·0~4·5 cm,其中6例合并假道,5例尿瘘,4例伴有直肠瘘或其他合并症。所有患儿双侧上尿路排泄性造影检查结果均正常。1·2手术方法取截石位,会阴部纵形或倒Y形切口,经尿道口探子指引下分离尿道直至狭窄处,经膀胱造瘘口置入尿道探子到后尿道,以食指或穿刺针从外侧触碰尿道内探子,明确方向后锐性切开狭窄段...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国实用外科杂志》1971年10期
中国实用外科杂志

带蒂皮管修复尿道缺损13例分析

带蒂皮管修复尿道缺损13例分析珠海市人民医院泌尿外科(519000)谢群夏金山许仲华我院自1995~1996年共收治尿道缺损13例,均为男性,年龄3~24岁,平均16.8岁。因为蹼状阴茎在外院手术后致阴茎中段尿道缺损1例,外伤术后感染致阴茎中段尿道完全闭塞1例,尿道下裂成型术后尿道裂开致阴茎中段尿道缺损4例,阴茎体型或阴茎阴囊型尿道下裂纠曲术后,前段尿道缺损7例。我们将尿道下裂Ⅰ期纠曲术后的部分病人也归为尿道缺损一并处理。尿道缺损位于阴茎前段的7例,位于阴茎中后段6例。缺损的长度2~5cm,平均3.5cm。手术方法:采用横行带蒂包皮内板皮管法8例,纵行带蒂包皮内板皮管法3例,带蒂阴囊纵隔皮管法1例,带蒂阴囊纵隔皮条与阴茎皮条联合成管1例。手术在基础麻醉或连续硬膜外麻醉下进行,用显微外科器械操作。手术分三步进行:(1)切除缺损部位尿道的疤痕纤维组织或炎症感染而不适合保留的组织,将近端或两端的原有尿道分别游离0.5~1.0cm。(2...  (本文共1页) 阅读全文>>

《天津中医药》2006年02期
天津中医药

异种移植物尿道缺损修复重建的实验研究

在泌尿外科领域中,由各种原因(先天性、损伤及炎症)造成的尿道部分缺损和狭窄等病理损害,一直是临床治疗难题,其中最重要的问题是修复或重建尿道的材料不够理想且来源受限。根据组织工程学原理,本课题以雄家犬尿道缺损动物模型为研究对象,以人体阴茎包皮为研究材料,制备成无细胞基质移植物,进行尿道缺损的修复重建。研究包括3部分:1)应用生物化学方法将人体阴茎包皮进行脱细胞处理,保留其胶原纤维构成的网状结构,制备出无细胞基质移植物,并完成了对无细胞基质移植物进行消毒和封存条件的研究。2)制作尿道缺损的病理模型。3)应用已制备的无细胞基质移植物,对犬尿道缺损动物模型进行修复尿道手术。观察异种移植物在雄性家犬体内的相容性、自体组织细胞生长情况和尿道修复后的功能等情况。本研究达到了预期结果,证实异种无细胞基质移植物可作为尿道缺损修复和重建的替代材料。异种无细胞基质移植物,作为缺损组织修复的生物支架材料,与宿主具有良好的相容性,可以解决种属之间的排异反...  (本文共1页) 阅读全文>>