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RT-PCR对水中肠道病毒灭活效果及机制的评价研究

本实验在建立水中脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV)消毒实验细胞感染模型的基础上,分别通过逆转录PCR(RT-PCR)、蚀斑计数试验(PFUA)和免疫印迹试验(DIBA)检测热力、紫外线、氯、碘4种理化消毒因子处理后PV 1 Henan株的核酸完整性、感染性和抗原性灭活指标,旨在重点探讨逆转录PCR(RT-PCR)应用于水中PV消毒效果评价时其方法的先进性和指标的代表性、安全性以及不同消毒因子的消毒机制。为扩大RT-PCR的检测范围,本实验通过广谱引物半套式PCR(GP-PCR)检测了水中4种10型共4株肠道病毒及甲肝病毒、轮状病毒,以期评估PCR应用的广泛性,为此,本实验按以下三个部分进行。第一部分 水中脊髓灰质炎病毒消毒实验细胞感染模型的建立。Ⅰ.病毒株与细胞系的筛选实验。比较5种PV 1毒株在5种细胞系中增殖3~7天后的细胞病变作用(CPE)、半数组织培养感染量(TCID_(50))、蚀斑计数(PFUA)及免疫印迹  (本文共88页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
华中农业大学

肠道病毒71型基因组研究和SARS冠状病毒结构蛋白的鉴定与分析

本文对肠道病毒71型(SHZH03毒株)进行了全基因组序列测定,利用巴斯德毕赤酵母系统表达了肠道病毒71型外壳蛋白VP2,对SARS冠状病毒的核蛋白(N)和突起子糖蛋白(S)进行了鉴定与分析,研究结果如下:1.肠道病毒71型(SHZH03毒株)全基因组序列测定对肠道病毒71型(entetovirus 71,EV71)中国(深圳)分离株SHZH03基因组建立了覆盖全基因组的8个首尾重叠的克隆,并在此基础上对全基因组(未包括多聚腺苷酸尾)的7406个碱基进行了核苷酸序列的测定和分析。结果表明,SHZH03株基因组具有典型的肠道病毒71型的基因组结构,在编码区没有核苷酸的缺失和插入;在5'UTR和3'UTR区,SHZH03在核苷酸序列和长度上和其它EV71有差异,存在缺失和插入。核苷酸同源性比较结果表明,在P1区,SHZH03株与台湾流行株(TW2086、TW2272)的同源性较高,为87.9~92.5%;与新加坡流行株SIN5666...  (本文共109页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国人民解放军军事医学科学院
中国人民解放军军事医学科学院

新型病原体的探索研究

在科学飞速发展的今天,医学研究水平已经达到了很高的水平。但人们与感染性疾病的斗争一直没有停息,不断有新的病原微生物被发现和研究清楚,对新型病原体的研究一直是生物医学的热点话题。从生物进化的角度来说,人们不可能永远穷尽对病原微生物的研究,人类的肌体在与病原微生物的斗争中,相互依赖,相互促进,相互竞争,共同发展,呈现螺旋式的上升,这是所有生物发展的共同规律。所以,研究病原微生物对人体本身的研究和认识会有很大的促进作用。对病原微生物研究的另一个意义在于其对人体的危害,在临床上许多病因不明的感染性疾病,由于其认识不清,往往给病人带来了巨大的痛苦和沉重的经济负担。并且这种不明原因的疾病有逐渐增多的趋势。从理论上来说,新型病原微生物的研究有很大的难度,一方面是由于其目前医学研究的手段还达不到发现这样病原微生物的要求。人们不知道未知病原体的大小和结构有哪些特殊性,用已知的方法、知识和理论去研究它,必然有一定的盲目性;另一方面,可能一些病原微生...  (本文共70页) 本文目录 | 阅读全文>>

《解放军医学院学报》2018年08期
解放军医学院学报

婴幼儿肠道病毒组学研究进展

人类肠道中栖息着细菌、真菌、病毒以及原生生物群落,这些微生物和宿主共同组成复杂的肠道微生态系统,影响着人类健康[1]。肠道病毒对人体健康的影响,主要通过肠道病毒间的相互作用、肠道病毒与宿主以及其他细菌间的相互作用决定的[2]。最近的研究表明,健康婴幼儿的肠道在不同发育阶段有着不同的病毒组。此外,在婴幼儿发育过程中,诸多因素如分娩方式、饮食、环境等均可影响肠道病毒组的组成[3]。本文针对当前婴幼儿的肠道病毒组学研究进展、婴幼儿肠道病毒定植的影响因素及婴幼儿肠道病毒组的功能等相关研究进行综述。1婴幼儿肠道病毒组肠道病毒组学是指肠道中的真核RNA病毒、DNA病毒及噬菌体组成的复杂群落与宿主相互作用的总和[4-5]。一个多世纪前,病毒作为人类肠道内病原微生物已经渐渐被人们所熟知,如引起婴幼儿腹泻的病毒-轮状病毒、诺如病毒、肠腺病毒、星状病毒等[6-8]。这些病毒微粒能够被早期发现是由于这些病毒能够在体外培养。由于病毒具有整合功能,宿主基...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中华医院感染学杂志》2016年23期
中华医院感染学杂志

神经特异性烯醇化酶表达与重症肠道病毒71型感染患儿预后的关系

肠道病毒71型是一种微小病毒科病毒群,最早由美国加利福尼亚州医学研究院自婴儿粪便标本中分离而出,是引起幼儿手足口病的主要病原体之一[1-2]。肠道病毒71型具有极高感染率和致病率,多发于夏季和初秋季节,主要通过粪-口传染。临床上发现,重症肠道病毒71型感染患儿常表现出明显的神经系统症状,神经特异性烯醇化酶存在于人神经组织中,活性较高,被证实与神经内分泌肿瘤密切相关[3-4]。本研究以医院收治的重症肠道病毒71型感染患儿血清神经特异性烯醇化酶浓度为研究重点,旨在明确其对预后评估的价值,现报道如下。1资料与方法1.1临床资料选取2014年2月-2015年6月医院收治的重症肠道病毒71型感染患儿76例,其中男44例,女32例,年龄12个月~5岁,平均(3.2±0.4)岁。纳入标准:(1)肠道病毒71型感染,并伴有呕吐、头痛、易惊、眼球震颤等神经系统受累症状。(2)所有患儿家属均知情同意。(3)经本院伦理委员会批准同意。排除标准:(1)...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国现代药物应用》2016年23期
中国现代药物应用

感染肠道病毒71型的手足口病患儿相关免疫状态变化

手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)属于常见疾病,主要由肠道病毒感染所致,在全球多个国家与地区均暴发和流行[1],我国近几年多个省份频发,且以儿童为主[2],需加强重视。阎岩等[3]研究发现EV71是造成手足口病的主要病原体,该病毒是一种细小RNA病毒,有明显嗜神经与嗜皮肤性,诱发疾病后可表现出不同症状。轻度症状仅有疱疹性咽峡炎或自限性手足口病;重度症状则可为脑脊髓炎、脑膜脑炎、神经源性肺水肿和脑干脑炎等[4]。本文就EV71引起的手足口病患儿细胞因子、体液免疫和细胞免疫的变化进行研究,以期发现疾病严重程度与免疫功能状态的关系。具体报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料 选取辽宁省本溪市中心医院2012年6月~2016年6月收治的80例确诊为EV71感染所致的手足口病患儿的血液样本作为研究对象,年龄6个月~9岁,患儿均经临床表现、分型和治疗等确诊符合手足口病相关诊断标准[5],并排除其他慢性疾病...  (本文共2页) 阅读全文>>