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HCMV临床病毒株的分离及其特定基因结构分析和表达研究

目的:1.分离广州地区围产新生儿感染的人巨细胞病毒(HumanCytomegalovirus,HCMV)临床病毒株;2.研究这些低传代HCMV临床病毒株基因组中的特有基因UL136~UL148的结构,分析其结构多态性与HCMV先天性感染致病的关系;3.研究HCMV临床毒株特有基因的表达情况,探讨这些基因编码产物的功能,揭示它们在先天性HCMV感染的致病机制中可能的作用。试图通过这些研究为临床低传代HCMV临床致病机制的研究奠定基础。方法:1.从广州地区先天性感染HCMV的新生儿尿液中分离野生型HCMV病毒,获取病毒DNA和RNA;2.根据GenBank公布的HCMV低传代毒株Toledo的UL136-UL148等13个基因全序列及有关文献,应用PCR技术扩增这些特有基因片段;3.应用基因克隆技术构建这些特有基因的重组质粒;4.对重组体进行测序;5.应用生物信息学方法分析这些基因结构、及其编码蛋白质的多态性;6.应用RT-PCR技  (本文共267页) 本文目录 | 阅读全文>>

《中国公共卫生》1987年01期
中国公共卫生

我国手足口病病原柯萨奇A_(16)病毒株的生物学性状

国外研究手足口病(HFMD)病原已有近三十年历史,国内由福建省流研所首先尝试病毒分离检定而未能定型”。作者等自1984年3月先后收到天津、吉林、北京和厦门等地HFMn标本,并首次证实1983~1984年北京、吉林两市流行此病由柯萨奇A:。(CoxA:。)病毒引起‘2,“’。本文进一步报导自我国HFMD病人中分离的36株coxA:。野毒株的一些生物学性状。 材料和方法 病毒株:从病人标本中分离的36株coxA:。病毒。福建流研所分离的厦门3株「‘’,北京、吉林两市25株“’,北京市卫生防疫站分离的北京市7株,以及天津市卫生防病中心送检的1株。CoxA:.参考株2株:(i)CoxA:。(G一10)株,从丹麦引进,制成20%乳鼠悬液。(2)CoxA:。(Tc)株,从澳大利亚引进,经MEK增殖。 细胞培养:原代恒河猴肾细胞(MK),本所供应。 MEK和ver。细胞,从澳大利亚引进。BOMK细胞从美国引进。 兔抗CoxA:。免疫血清,:本...  (本文共4页) 阅读全文>>

《军事医学科学院院刊》1988年04期
军事医学科学院院刊

登革2型病毒株抗原分析

近年来我国广州、海南等地连续发生登革热流行。为进一步了解阐明我国DEN一2型病毒流行来源及传播途径等问题,为登革热的预防控制提供依据,我们对近3年来(1985~1987I口88年第12卷第4期(总第56期)年)我国海南地区流行的DEN一2型病毒部分毒株进行了抗原性分析。由于登革病毒培养滴度低,制备一定量纯化抗原进行抗原分析较为困难,而用普通血清学方法又不能检测病毒抗原表位上的微细变化,故本文采用了标记分析(。ignat盯e。nalysis)法〔,,,现将其结果报告如下。材料与方法 病毒株本室于1985~1987年3年内在海南地区分离的DEN一2型病毒8株。标准株为新几内亚B株(表l),并在C6/36细胞传2代以表1标记分析所用OEN一2型病毒株病毒株来源年代地点1 9441 9851 9851 9851 9851 9861 9801 9871987新几内亚 海南 海南 海南 海南 海南 海南 海南 海南后用Iodosen方法〔,...  (本文共5页) 阅读全文>>

《微生物学报》1989年04期
微生物学报

用标记分析法对我国海南地区登革2型病毒株的抗原表位分析

近年来,我国广州、海南等地连续发生登革热流行。为进一步了解,阐明我国登革2型病毒流行来源及传播途径等问题,为登革热的预防控制提供依据。我们对近三年来(1985一1987)我国海南地区流行登革2型病毒部分毒株进行了抗原性分析。用普通血清学方法不能检测病毒抗原表位(ePi〔。pe)上的细微变化,本试验采用标记分析法[11,用单克隆抗体对海南地区登革2型病毒株进行了表位分析,现将结果报告如下。材料与方法 (一)病毒株 本室于198,一t,87年3年内在海南地区分离的登革2型病毒8株,标准株为新几内亚B株,(表l)。所分析的病毒株均在C‘/36传代3次。5肠小牛血清的OMEM作为标记分析用感染细胞培养液,”℃培养3一刊后收获病毒培养液,补加小牛血清至10%,调pH到8.。,分装后于一20℃或一70℃保存备用。 (二)单克隆抗体 本室于t984年制备的登革2型单克隆抗休川(表2)o (三)羊抗鼠坛G碘标记 羊抗鼠血清用硫酸按沉淀后经蛋白A...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国鼠类防制杂志》1989年03期
中国鼠类防制杂志

流行性出血热病毒株间抗原差异的研究——Ⅰ.病毒株的分离与鉴定

EHF地理流行病学调查发现,贵州省82县(市)中,有76县(市)鼠类等小兽携带EHF病毒帅。遵义等野鼠型疫源地和石吁等家鼠型疫瘾地内都有病例出现,流行特征和〔,临床表现不同,同类疫源地内流行强度差别甚大.我们在1985年成功地分离出贵州EHF病毒的的基础上,进行了EHF病毒株间抗原差异的研究。现将有关病毒株的分离与鉴定结果报告如下:材料和方法1。呱(_w/v)悬被,徐融,、2次,4℃8,。。。rpm30/,取上清置一70℃待用。、‘七.分离方法:取一70℃保存待用的标本液4ml,接种于生长良好的单层ver。:E。细时,37℃吸附两小时,去接种液,以Hank‘s液洗涤3次后,加Eagle尹s维持液(含2帕NCS、常规量抗菌素,pH7.4),置37℃恒温孵箱培养,隔日更换维‘持液。细胞培养14~21天后,采用自身或常规传代成次代培养‘每代细胞在传代前,‘、均涂片检查有无特异性荣光颗粒出现。取l寺异荧光强度达朴“份的细胞培养物冻融液,...  (本文共5页) 阅读全文>>

《上海实验动物科学》1989年01期
上海实验动物科学

儿童爱滋病的羊羔模型

美国病理学杂志今年1月号刊登一篇论文,论述了一种新的爱滋病动物模型,其征象与儿童中的爱滋病相似,对儿童中该病的诊断和治疗提供了若干线索。 据美国防病中心(cDc,center EOr DiseaseControl)的兽医学博士M加heal D.Lalrmore称:绵羊中有一种淋巴系间质性肺炎(LIP,lymphoid inter-stitial PneUInonia),其许多征侯十分类似儿童中的爱滋病(AIDS,acquiredl川munode老匆加n即synd卜me)。儿童与羊羔都可催患一种特殊类型的肺炎,其特征是在肺内有白血细胞增殖积聚而形成硬实的组织块,导致肺炎并引起呼吸障碍。 研究表明,羊羔中病情的发展,主要与细胞感染的病毒株有关,不同的病毒株毒力有强有弱。这种疾病原是一种绵羊慢病毒(ovine Ienti vivus),世界各地的绵羊都可自然发病。在绵羊中通过哺乳而传播,在羊羔体内保持潜伏状态,可维持多年直到绵羊成长。...  (本文共1页) 阅读全文>>