分享到:

哈茨木霉生物防治相关蛋白酶的基因克隆及功能研究

哈茨木霉(Trichoderma harzianum)是重要的生物防治菌,能够通过产生水解酶降解植物病原菌的细胞壁,抑制植物病原菌生长,现已开始应用于植物病害的生物防治中。其水解酶的研究对充分发掘哈茨木霉(T. harzianum)的生防潜力有重要意义。以往关于哈茨木霉(T. harzianum)水解酶的研究多集中于几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶,而关于蛋白酶的生物防治功能研究则少有报道。本文以哈茨木霉(T. harzianum)菌丝体时期诱导cDNA文库为基础,利用SMART RACE技术克隆了哈茨木霉(T. harzianum)枯草杆菌蛋白酶基因sl41、ss10及天冬氨酸蛋白酶基因sa76的cDNA序列及DNA序列。cDNA序列提交GenBank ,序列号分别为DQ910533、EF063644和EF063645。通过生物信息学分析手段对cDNA文库进行筛选,获得了哈茨木霉(T. harzianum)天冬氨酸蛋白酶asp8  (本文共152页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北林业大学
东北林业大学

哈茨木霉ACCC30371菌株转录组构建及生防相关基因功能研究

木霉菌对多种植物真菌病害具有优良的生物防治效果,为了研究木霉的生物防治机理,木研究首先构建了哈茨木霉ACCC30371菌株的转录组,获得高质量的Unigene基因,之后对转录组获得的与生物防治相关的基因进行生物防治功能分类;进一步筛选到两条生物防治功能基因刺激植物响应蛋白基因epl1和蛋白酶基因ss,并对之进行了功能研究。研究结果如下:以1/2PD、MM(含葡萄糖10g/L)、N饥饿、C饥饿、以及1%植物病原真菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、链格孢菌(Alternaria alternata)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、金黄壳囊孢菌(Cytospora chrysosperma)细胞壁研磨粉分别诱导培养哈茨木霉ACCC30371,构建转录组,获得4Gbp数据,其中96.68%的数据测序错误率不高于1%,以此标准进行数据统计,共得到25013条Unigene,平均长度为113...  (本文共135页) 本文目录 | 阅读全文>>

《哈尔滨工业大学学报》2002年06期
哈尔滨工业大学学报

对哈茨木霉转化子菌体形态观察及抗药性测定

许多术霉如哈茨术霉(r hat。m,¨z”t)、绿色木霉(r口洲如)、钩状木霉(r hamatum)是植物病原菌的寄生菌或拈抗菌.植物病原菌,L防冈了(biological contrI)l agent,BcA)哈茨术霉是一种潜在的用于防治植物病原真菌如丝核菌、疫霉菌、腐霉菌的生物防治菌,它能产生一系列儿丁质酶和8一l,3一葡聚糖酶.这些酶类可以降解植物病原真菌细胞壁,从而抑制病原菌的孢子萌发,并引起菌丝和孢子的崩解。卜’.哈茨木霉早在198l年,朋于防治李属果树银叶病(c^rJn矗ro肿re“m『J“r『J“reum)的木霉制剂已在西欧商品化生产。。;20雌纪80年代以来,木霉分子生物学研究已取得取大进腱,这不仪刈‘木霉分类学、生态学、生瑚生化及遗传学是很大的促进,而且刈‘术霉在jf农业乍产中的应用有着重要意义.fH木霉菌对内吸性杀菌剂如苯并咪唑类杀菌剂异常敏感,致使它无法住综合防治体系中与苯并咪唑类杀菌剂一起使.}_}j对病...  (本文共5页) 阅读全文>>

《江西农业大学学报》1980年20期
江西农业大学学报

哈茨木霉液体培养技术研究

哈茨木霉液体培养技术研究陈卫辉1赵培洁1许炫玉1王慧中2单德芳浙江省中药研究所,杭州310023;2杭州师范学院,杭州310012;3浙江省桐乡市植物检疫站,桐乡314500)摘要报道利用虫草头孢发酵废液为母液制成的组合培养液培养哈茨木霉,其培养效果明显优于文中所用的其他培养液,为工业化生产木霉创出了一条新路子。关键词虫草头孢废液;哈茨木霉;培养分类号Q503木霉(Trichoderumspp.)被认为是最有希望的生物防治因子[1]。据统计全世界25个国家和美国43个州的生物防治课题中,大约34%是有关木霉的研究。木霉属中应用最多的为哈茨木霉(T.harziarum),常用剂型为麦麸制剂[2]。哈茨木霉一般先通过PDA培养基进行一级培养后,再将孢子洗脱后植入麦麸中进行二级培养,因而其培养周期长、成本高。在一定程度上一级培养技术制约了哈茨木霉的规模生产。近年来,液体培养技术在微生物培养中应用较多,但尚未见有关哈茨木霉液体培养技术...  (本文共4页) 阅读全文>>

《云南农业大学学报》1989年02期
云南农业大学学报

哈茨木霉拮抗白绢病菌机制的研究

哈茨木霉(Trich口de洲a harzianum)用于防治茉莉花白绢病,在江苏、浙江一带茉莉花产区曾有较好的防治效果〔’,”。本文报道了关于哈茨木霉拮抗白绢病菌机制的初步研究结果。材料和方法LI菌株 哈茨木霉(T.harzianum)82菌株及茉莉花白绢病菌(Sclerotiu州ro价il’)菌株均由我校李良先生提供。1.2平皿拮抗作用 挑取白绢病菌菌丝一小块放人PDA培养基平板中央,然后同时或待白绢病菌长满平面,在距白绢病菌丝块2.scm处等距离点植4点木霉菌,于25℃培养,逐日观察抑菌作用。1.3重寄生作用L3.1取新鲜的白绢病菌菌核用0.1%升汞表面消毒后,接种木霉抱子悬浮液一滴,然后移人培养皿内灭菌的吸水纸上,于25℃保湿培养.1.12在前述用于观察拮抗作用的PDA平板上,挑取木霉和白绢病菌菌丝混集(交接)部分的菌丝块和开始腐烂的白绢病菌菌核,直接镜检或对菌核作徒手切片后镜检。结果2.1平皿拮抗作用同时接种白绢菌和木霉...  (本文共2页) 阅读全文>>

湖南农业大学
湖南农业大学

哈茨木霉(Trichoderma harzianum)发酵液中对豇豆具促生活性物质的研究

本论文研究主要分为两部分。在第一部分中,着重研究了哈茨木霉T_(2-16)菌株的筛选方法和其高效发酵液的获得途径,以及该发酵液在豆科作物上的应用。主要内容有:从不同生态区作物根际土壤中,利用诱捕法获得木霉菌株228株,从中筛选出一株对作物病原菌拮抗活性强、拮抗谱广、生长活力强的菌株,经鉴定为哈茨木霉(T. harzianum),编号为T_(2-16)。利用该菌株在筛选出的发酵培养基和培养条件下获得的发酵液,对长豇豆(Vigna sesquipedalisWight)进行防病试验,结果发现该发酵产物除对豇豆立枯病、枯萎病具有较好的防治作用外,对豇豆的生长也表现出明显的促进作用。田间应用表明,该发酵液对豇豆增产效果最高可达16.8%,并能提高豆荚的品质。此外,该发酵液在菜豆(Phaseolus vulgaris)、花生(Arachis hypogaea)、大豆(Glycine max(L.)Merr上应用也表现出较好的促生效果,其中...  (本文共135页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国农业科学院
中国农业科学院

农杆菌介导哈茨木霉转化系统优化及突变体分析

哈茨木霉是一种重要的生防真菌,从基因水平研究木霉菌关键基因的功能,可以加速对其生长、生防、产孢机理的认识,为开发高效、稳定的生防制剂提供理论依据。利用分子标签技术获得突变子己成为功能基因克隆的有效方法,农杆菌介导的真菌遗传转化是当前获得突变子的最优方法之一。因此,本论文进行了农杆菌介导哈茨木霉转化体系研究,初步构建了哈茨木霉T-DNA插入突变体库,对突变子进行系统分析,取得如下结果:1.农杆菌介导哈茨木霉转化系统的优化及T-DNA插入突变体库构建针对转化过程中8个关键因素对农杆菌介导哈茨木霉转化效率的影响建立了高效的哈茨木霉转化体系:IM培养基中AS浓度为200μM,农杆菌诱导时间为6h,农杆菌菌液浓缩4~5倍与浓度为106个/mL的木霉孢子悬液等体积混合,400μL混合液涂布到含200μM AS、pH为5.3、铺有滤纸的共培养基上,24℃共培养48h。在该转化条件下农杆菌EHA105对哈茨木霉的转化效率为60~150个转化子/...  (本文共118页) 本文目录 | 阅读全文>>