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粟酒裂殖酵母蛋白质细胞定位载体的构建

[目的]构建用于研究粟酒裂殖酵母蛋白质细胞定位的载体。[方法]将gfp+和nmt1+启动子基因克隆到pJK148质粒中,构建含有GFP的表达载体,并利用野生  (本文共3页) 阅读全文>>

北京协和医学院
北京协和医学院

粟酒裂殖酵母种内天然变异的基因组学分析与遗传学应用

粟酒裂殖酵母作为单细胞模式生物,在生物学基础研究领域一直扮演着重要的角色。研究者们基于该物种开发了很多便于分子生物学和细胞生物学研究的良好的遗传操作工具,不过大部分遗传操作技术的开发都只集中于粟酒裂殖酵母实验室菌株,研究者们通常也只利用实验室菌株探索生命体的分子机理。随着二代测序技术的开发和普及,研究者们开始关注粟酒裂殖酵母的群体基因组学和遗传学的应用。他们获得野生粟酒裂殖酵母菌株研究该物种核基因组多态性。他们的研究发现粟酒裂殖酵母并没有清晰的种群结构。我们实验室一直对粟酒裂殖酵母的演化历史很感兴趣,我们决定利用粟酒裂殖酵母的线粒体基因组进一步探索该模式生物的进化历程。本论文从菌种保藏中心获得了 38株粟酒裂殖酵母菌株,利用Tn5打断基因组技术进行全基因组建库并进行二代测序。同时我们下载了之前研究上传的161株野生粟酒裂殖酵母的二代测序数据。我们一共获得了 199株粟酒裂殖酵母菌株的二代测序数据,并且对199株粟酒裂殖酵母菌株的...  (本文共149页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北农业大学
东北农业大学

胆碱和裂殖壶菌油对鸡蛋中二十二碳六烯酸富集的影响

本试验系统研究了饲粮添加胆碱和裂殖壶菌油(Schizochytrium Oil,SO)对高峰期产蛋鸡卵黄二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)富集的影响,旨在提高饲粮DHA向卵黄富集的效率,包括五部分。试验一饲粮裂殖壶菌油水平对鸡蛋中DHA富集的影响。选用28周龄海兰褐蛋鸡450只,按产蛋率相近原则分5组(SO_0、SO_(0.25)、SO_(0.50)、SO_(1.00)和SO_(1.50)),每组6重复,每重复15只鸡,饲粮分别添加0、0.25%、0.50%、1.00%和1.50%SO,预饲7天,正试期56天。研究表明:随饲粮SO剂量升高,卵黄颜色呈线性增加(P0.05),卵黄n-3多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acid,PUFA)和DHA含量二次曲线提高(P0.05),n-6 PUFA含量呈线性极显著降低(P0.01);与对照组相比,SO_(1.50)组的n-3 P...  (本文共112页) 本文目录 | 阅读全文>>

中南大学
中南大学

依地福新抑制粟酒裂殖酵母细胞胞质分裂机制的研究

第一章依地福新对粟酒裂殖酵母细胞胞质分裂的影响【背景与目的】:依地福新为人工合成的抗肿瘤醚酯类药物,它能抑制肿瘤细胞分裂,但并不抑制核的裂解,导致细胞聚集在G_2/M期,形成多核细胞,随后通过凋亡促使细胞死亡。也有报告指出,依地福新处理过的细胞能经历完全的细胞周期,但不能进行分裂,使细胞聚集在G_0/G_1期,形成四倍体或八倍体细胞。然而,依地福新抑制肿瘤细胞的胞质分裂的机制仍然不清楚。人体细胞与酵母细胞在生长周期存在着相似性。许多有关人体细胞的研究成果都是首先通过研究酵母细胞发现的。癌症细胞本质上来源于机体正常细胞。由于在细胞分裂的不同阶段受各种因素的影响,导致其出现分化和增殖的异常,从而使人们在利用癌细胞进行有关研究时带来许多困难。而以粟酒裂殖酵母作为研究对象,易于进行细胞学操作、具有明显的细胞周期,且生长迅速、易于培养。因此本研究以粟酒裂殖酵母作为实验材料,探讨依地福新(edelfosine,ET-18-OCH_3,1-O...  (本文共135页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江师范大学
浙江师范大学

新型二氧化碳膨胀乙醇提取裂殖壶藻油脂的工艺研究

二氧化碳膨胀乙醇(CO_2-expanded ethanol,CXE)是一种将压缩CO_2加到乙醇中,导致液相急剧膨胀,从而形成的混合流体,具有扩散速度快、溶解能力可调的特点。由于其操作温度低、压力适中,能够较好地保护热敏性、易氧化物质的生理活性,CXE作为一种新兴的优良介质,广泛应用于天然产物分离和化学反应。基于相平衡性质,本文将CO_2-乙醇二元体系划分为两相区、亚临界区及超临界区,考察了在不同相平衡状态下CXE提取裂殖壶藻油脂的能力和效率,并与传统的有机溶剂提取、超临界CO_2萃取进行对比。最后从理化性质、脂肪酸组成及抗氧化活性等方面,综合评估不同提取方法得到的油脂品质。主要研究内容如下:(1)优化了有机溶剂提取裂殖壶藻油的工艺。首先采用索氏提取法、酸热法、超声波辅助提取法三种常见方法从微藻干粉中提取油脂,确定油脂含量。然后,以温度、超声功率、液固比为影响因素,通过中心组合设计,对超声波辅助提取进行了响应面优化,得到最佳提...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

厦门大学
厦门大学

裂殖壶菌LU310的遗传改造及苹果酸对DHA合成的影响机制研究

对提高裂殖壶菌二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)发酵产量的传统研究大多集中于菌种筛选、培养基优化和发酵策略的调控上。随着基因工程技术的发展,从基因水平上调控DHA合成途径的代谢流,已受到越来越多的关注。利用基因工程技术改造裂殖壶菌的DHA合成途径,相比于传统手段,主要优势在于能够从根本上提高裂殖壶菌的DHA产量,而无需增加额外的发酵成本。然而,目前DHA的合成机制仍处于探索阶段,因此要从基因水平上调控DHA合成途径的代谢流还面临不少的挑战。本文以裂殖壶菌LU310为研究对象,构建了裂殖壶菌基因敲除体系,并成功实现了目的基因的敲除,该体系可用于敲除DHA合成途径竞争代谢支路的限速酶,促使相关代谢流向DHA合成途径,从而提高裂殖壶菌的DHA发酵产量。基于此,本文又构建了裂殖壶菌的基因过表达体系,并成功实现了丙二酸单酰转移酶(MAT)的过表达。摇瓶发酵显示,MAT过表达菌株的生物量、总油脂产量、DHA产...  (本文共94页) 本文目录 | 阅读全文>>