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孕妇血浆胎儿DNA检测及其在产前诊断中的应用

产前诊断是预防遗传病的重要手段。目前,产前诊断所使用的材料一般是通过羊膜穿刺术等损伤性手段获取,这些方法对母儿有一定的危险性。孕妇外周血中胎儿细胞的发现为非损伤性产前诊断带来希望,但仍存在操作复杂、仪器试剂昂贵、胎儿细胞含量低等一些无法克服的问题,限制了其在临床产前诊断中的应用。1997年有学者发现在母体血浆中存在着游离胎儿DNA[1],这一发现为非损伤性产前诊断开辟了新的途径。本研究以母体血浆中提取的DNA为材料,通过PCR扩增Y染色体上的特异序列检测胎儿DNA的存在及其消长规律,并应用21号染色体的4个短串联重复序列(STR)位点为遗传学标记,检测孕妇外周血浆中的胎儿父源特异性序列,以鉴定女性胎儿DNA的存在。1对象和方法1.1对象选择2002年3~12月在青岛市市立医院、青岛市计划生育研究所就诊的不同孕周(6~40周)孕妇63例,各取外周血2 mL(ACD抗凝),孕妇年龄24~30岁。其中,孕早期18例,孕中期30例,孕晚...  (本文共3页) 阅读全文>>

中南大学
中南大学

孕妇血浆中游离胎儿DNA的检测及其在产前诊断中的临床应用

目的:检测孕妇血浆中的游离胎儿DNA,并探讨其在胎儿性别鉴定产前诊断中的可行性,寻找一种非创份性产前基因诊断的新方法。方法:用微柱吸附分离法提取34例妊娠13~28周和12例妊娠29~40周的孕妇血浆中的游离胎儿DNA,应用巢式PCR技术扩增其胎儿Y染色体上的胎儿性别决定基因SRY,并用半巢式PCR方法扩增X染色体的FMR1基因上的ATL1特异序列作为内参照基因。结果:28例孕男胎的孕妇血浆中有26例经巢式PCR扩增出SRY基因。18例孕女胎的孕妇血浆中有17例经巢式PCR只扩增出ATL1基因,有1例扩增出SRY基因。灵敏度和特异度分别为92.9%(26/28)和94.4%(17/18),准确率93.5%(43/46)。结论:(1)孕妇外周血游离胎儿DNA可用于胎儿性别鉴定的产前诊断。(2)巢式聚合酶链反应检测母体血浆中游离胎儿DNA的灵敏度高,特异性强和准确率高,作为一种非创伤性产前基因诊断的方法可望应用于临床。  (本文共51页) 本文目录 | 阅读全文>>

《实用医学杂志》2014年08期
实用医学杂志

孕妇血浆游离胎儿DNA检测在产前诊断中的应用

唐氏综合征(Down′s syndrome,DS)是人类最常见的染色体疾病,每年的发病率为1/600~1/800[1]。患儿常表现为智力低下、生长发育障碍等严重临床症状,迄今尚无有效治疗手段,是目前产前筛查和产前诊断的主要目标。自从Chiu等[2]在孕妇母体血浆和血清中检测出胎儿来源的游离DNA,为利用孕妇血浆进行非侵入性产前诊断提供了一条崭新的途径和方向。随后的研究报道[3-4],应用高通量基因测序技术可以用于产前筛查21、18、13三体综合征。国内目前也有相关的报道[5-8],但都是小规模实验性质报道。本研究中首次报道应用高通量基因测序技术检测3 695例母体血浆胎儿游离DNA的产前筛查结果,分析胎儿染色体拷贝数是否存在异常,对筛查高危孕妇行羊膜腔穿刺及脐血穿刺术进行胎儿染色体核型分析进行确诊,分析其临床应用中的价值和存在的问题。1资料与方法1.1一般资料研究对象为2011年8月至2013年8月在武汉市妇女儿童医疗保健中心门...  (本文共3页) 阅读全文>>

青岛大学
青岛大学

孕妇外周血中胎儿DNA的检测及其在产前诊断中的应用

目的 检测孕妇外周血中游离胎儿DNA,并探讨其在Rh母儿血型不合产前诊断中应用的可行性,寻找一种非创伤性产前基因诊断的新方法。方法 应用套式聚合酶链反应技术,①对170例妊娠12~40孕周的健康初孕产妇血浆、血清中游离胎儿DNA进行特异性检测,扩增的基因为Y染色体短臂上单拷贝基因片段DYS14基因;②对13例Rh血型阴性的妊娠18~2 0孕周的健康初孕产妇血浆中游离胎儿DNA进行特异性扩增,扩增的基因为RHD基因的第7外显子。结果 ①140例妊娠男性胎儿的孕妇中有108例检测出DYS14基因电泳带。其中75例血浆标本中有17例妊娠男性胎儿的未检测出DYS14基因电泳带,检出率为77.3%(58/75),65例妊娠男性胎儿的血清标本中有15例未检测出DYS14基因电泳带,检出率为76.9%(50/65),血浆、血清平均检出率为77.1%(108/140)。30例不同孕期的妊娠女性胎儿的血浆和血清标本中有2例检测出DYS14基因电泳...  (本文共43页) 本文目录 | 阅读全文>>

《国际检验医学杂志》2015年11期
国际检验医学杂志

孕妇血浆游离胎儿DNA检测在无创产前诊断中的应用价值研究

随着国内医疗技术条件的提高和对遗传性疾病认识的加深,孕妇对产前检查的重视程度越来越高。以往国内主要是通过羊水穿刺、绒毛膜活检或脐静脉穿刺术等方法进行产前检查,由于检查方法都有一定的创伤性,给孕妇和胎儿都带来了感染、出血等风险,严重者甚至流产[1-2]。而进行血清标记物或超声波检测虽无创,但灵敏度较低。如何通过无创检查对胎儿进行产前基因诊断一直是临床医务工作者努力攻破的课题[3]。自国外第一次证实孕妇血浆中存在胎儿的游离DNA开始,一种新的非创伤性产前检测方法诞生了[4]。为进一步验证孕妇血浆游离胎儿DNA检测在非创伤性产前诊断中的价值,本院采用聚合酶链反应(PCR)技术对孕妇外周血浆中游离胎儿DNA的性别决定基因(SRY)进行检测,并通过ATL1基因鉴别胎儿的性别。现将研究结果报道如下。1资料与方法1.1一般资料按照随机双盲对照原则选择2011年1月至2013年12月在本院妇产科就诊的46例孕妇作为研究对象,孕龄13~40周,平...  (本文共2页) 阅读全文>>

青岛大学
青岛大学

孕妇外周血胎儿DNA的检测及其在Down's综合征产前诊断中的应用

目的:检测孕妇外周血中游离胎儿DNA及其消长规律,探讨应用孕妇血浆和血清中胎儿DNA对Down's综合征产前诊断的可能性。方法:①应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)对孕妇外周血中游离胎儿DNA的SRY基因进行检测分析。②应用PCR技术、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色等技术对8例正常对照个体外周血DNA、11例Down's综合征患者外周血DNA、63例孕妇外周血胎儿DNA的21号染色体核心区(21q22.1-21q22.2)内及其附近的4个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点的D21S11、D21S1411、D21S1412、D21S1414进行多态性检测和分析。③用4个STR多态位点对Down's综合征高危孕妇外周血胎儿DNA进行多态性检测和分析。结果:①在怀男胎的孕妇血浆和血清中,从孕7周到分娩后2h内都可检测到胎儿特异性SRY基因。不同妊娠时期...  (本文共38页) 本文目录 | 阅读全文>>