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柯萨奇B3病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达

柯萨奇B3病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达刘哲伟,冯燕玲,张霆,韩玉龙,马官福,张建成(首都儿科研究所北京中感染与免疫中心实验室北京100020)摘要本文通过融合柯萨奇B3病毒(CVB3))VP1基因与人凝血酌基因,仗CVB3的VP1在大肠杆菌中得到稳定的表达。经蛋白扫描仪等测定,表达的融合蛋白占菌体可溶性蛋白的11%左右。表达的VP1产物勺抗CVB3VP1单克隆抗体和小鼠抗CVB3血清产生较强的免疫反应,与天然的CVB3蛋白抗原性相同。应用无关单抗和载体质粒对照均呈现阴性反应。应用表达的VP1作为抗原,我们对临床部分急性病毒性心肌炎患者血清进行了特异性IgM免疫印迹法检测,其结果与组织培养的CVB3制备的蛋白抗原对患者血清的特异性!IgM反应基本一致。采用基因上程方法制备CVB3抗原产最高,易纯化,免疫原性没有改变。故可以试用表达的VP1抗原代替目的有实验室感染危险的病毒培养及抗原制备方法,快速、特异地诊断CVB3感染。关键词...  (本文共7页) 阅读全文>>

《中国免疫学杂志》2007年09期
中国免疫学杂志

柯萨奇B3病毒VP1基因在原核中的表达及其临床意义

柯萨奇病毒(Coxsackievirus)于1958年在美国柯萨奇地区分离出,属小RNA病毒,可引起从上呼吸道到中枢神经系统感染的许多疾病[1,2]。该病毒分为A、B两组,其中柯萨奇B组病毒(Coxsackievir-us group B,CVB)属于小RNA病毒科的肠道病毒属,有6个血清型,是引起人类病毒性心肌炎、无菌性脑膜炎和新生儿全身性感染等疾病的主要病原,可在世界各地散发或暴发流行,近年来其发病呈显著上升趋势。研究表明,柯萨奇B组病毒VP1基因是能诱导机体产生体液免疫的优势抗原,病毒感染后可以很快诱导人体产生特异性IgM抗体[3,4]。目前临床实验用的病毒培养抗原方法,存在着制备困难、产量低、易感染等缺点,因此,寻求安全、高效、快速的检测手段就显得尤为重要。采用柯萨奇病毒B3的中国分离株,逆转录其VP1基因克隆入原核表达载体PQE-30,表达柯萨奇病毒B3的VP1结构蛋白,并用纯化表达产物对临床感染性病毒性心肌炎急性期病...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国城乡企业卫生》1996年06期
中国城乡企业卫生

致腹泻性大肠杆菌疾病的防治

人自降生到社会以来,生活在自然界,就时时处处与细菌打交道。这些细菌中的绝大多数对人无害,甚至是有益的。其中,与人们打交道时间最长,为数最多的当属大肠杆菌。 由于大肠杆菌的菌体抗原(0抗原)不同,目前可以把它分成170多种类型,即大肠杆菌0一1型到0一17。型。后来又发现有些型的大肠杆菌可以引起婴幼儿腹泻,表现为绿色便或蛋黄样便,人们开始认识有的大肠杆菌型是可以致病的。 近些年来,随着对腹泻病的研究发现,还有些型有大肠杆菌能产生肠毒素,这种毒素使肠细胞大量分泌液体,导致成人发生腹泻,出现发烧、腹痛、呕吐;有些型的大肠杆菌能产生溶血素,引起出血性肠炎,便中带血,腹痛、呕吐、发热;有些类型的大肠杆菌,能侵入肠粘膜细胞内,使局部细胞坏死,形成肠壁小溃疡,出现腹痛、脓血便、发热,很像痢疾。所有这些,在许多地区从腹泻患者中检出的病菌,大肠杆菌竟占到第二位和第三位,这些大肠杆菌可成为感染性腹泻的重要致病菌。到目前为止,人们已经发现有五类与人类...  (本文共1页) 阅读全文>>

《畜牧兽医科技信息》1997年15期
畜牧兽医科技信息

美研制出检查大肠杆菌新方法

美国劳伦斯·伯克雷国家实验室的科技人员,研制出一种检查大肠杆菌的生物膜材料。此种材料遇到大肠杆菌时可快速的由蓝色变为红色,用其可检测食品及肉类中的大肠杆菌。其制造的原理是:研究人员复制了肠细胞表面的受体分子,并将其混人一种连接类脂分子的长链中,形成新型的、通常颜色呈蓝色的膜材料。当大肠杆菌和部分细胞表面受体分子结合后,打断了类脂分子和另一部分...  (本文共1页) 阅读全文>>

《生物学通报》1961年10期
生物学通报

分子生物学研究的好材料——大肠杆菌(上)(形态结构及生理生化)

分子生物学研究的好材料——大肠杆菌(上)(形态结构及生理生化)辛明秀(北京师范大学生物学系100875)摘要大肠杆菌(Escherichiacoil)是我们了解得最清楚的原核生物,它为分子生物学的发展做出了巨大的贡献。本文简要介绍大肠杆菌的细胞壁、细胞膜、细胞核、质粒、核糖体、鞭毛等结构与功能以及大肠杆菌的产能方式和生化反应。关键词大肠杆菌,细胞结构,产能代谢,生化反应大肠杆菌(Escherichiacolt)在自然界分布很广,是人和动物肠道中的正常菌群。正常情况下一般不致病,但它是条件致病菌。大肠杆菌是单细胞原核生物,具有原核生物的主要特征:细胞核为拟核,无核膜,细胞质中缺乏象高等动植物细胞中的线粒体、叶绿体等具膜结构的细胞器,核糖体为705,以二分分裂繁殖。大肠杆菌为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌。其大小为:0.5~0.sumXI.0~3.opm。周身鞭毛,能运动,具致育因子的菌株还具性菌毛。1形态结构1.1细胞壁位于大肠杆菌...  (本文共3页) 阅读全文>>

《陕西医学检验》1997年02期
陕西医学检验

O─157:H7大肠杆菌的实验室签定及临床意义

O-157大肠杆菌作为一种致病菌被认识是在1982年。这一年美国首次发生了由O-157大肠杆菌引起的食物中毒,此前它一直被看作为非致病菌,而且非常罕见。1982年以后。由其引起的食物中毒在美国频频出现,在英国、加拿大、澳大利亚等发达国家也接连不断发生.1993年美国发生的一次波及700余人的感染性暴发惊动了国会.从此,由其引发的病例纳入了报告系统,至今,美国已记载了此病菌引发的暴发流行60多起.今年以前,日本也已发生8起这类暴发,均因规模不大而未予重视.然而今夏之疫的规模、持续时间、传播范围,都创下了0-157:H7侵扰人类的最高记录.1983年Riley等是由2起暴发性出血性结肠炎(hermorrhassccolitis,HC)患者粪便中检出但未确认为致病菌的0!57:H7大肠杆菌,能产生Vero细胞毒(VT),也引起Hela细胞病变。稍早和同期一些文献报告产生VT的另一些大肠杆菌血清型,称为产Vero细胞毒大肠杆菌(VTEC...  (本文共3页) 阅读全文>>

《甘肃畜牧兽医》2019年05期
甘肃畜牧兽医

大肠杆菌的研究综述

大肠杆菌(E.coli),是动物肠道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定条件下引起疾病[1]。大肠杆菌的血清型能够引起人体或动物胃肠道感染,主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的,除胃肠道感染以外,还会引起尿道感染、关节炎、脑膜炎以及败血型感染等。1 大肠杆菌的种类1.1按致病作用分类目前国际公认的分类,主要有六个种类的大肠杆菌,即能够致使胃肠道感染的肠道致病性的大肠杆菌(EPEC)、肠道产毒素性的大肠杆菌(ETEC)、肠道侵袭性的大肠杆菌(EIEC)、肠道出血性的大肠杆菌(EHEC)、肠集聚性的大肠杆菌(EAEC)以及近年来发现的肠产志贺样毒素同时具有一定侵袭力的大肠杆菌(ESIES)[2]。另外,还有能够致使尿道感染的尿道致病性的大肠杆菌(UPEC),以及最新命名的肠道集聚性的黏附大肠杆菌(EAggEC)[3]。1.2按溶血性分类根据大肠杆菌的感染性状能否产生溶血素和有无溶血的能力,可将大肠杆菌分为两大类:即溶血性的...  (本文共3页) 阅读全文>>