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大熊猫与金黄地鼠体外异种受精的研究

陈大元等研究了大熊猫精子(198叼和卵予(1988)之后,于1989年接着发表了大熊猫精子的体外获能和异种穿卵的超显微结构研究,阐明了大熊猫精子体外获能后顶体反应开始的标志是顶体双层外膜发生囊泡化,而这种囊泡化是通过顶体双层外膜分散性地自我融合而形成的,它不同于Barros(296,)、Frank一in等(z,20)尽及Ya五昭ima小i和Nod。(197。‘)所谓由质膜和顶体外膜之间发生多处融合而成的观点。在进行大熊猫精子穿金黄地鼠卵的实验中,发现大熊猫精子的顶体内膜(包括顶体延伸部的内膜)能与金黄地鼠卵的卵黄膜融合,而底精子头穿人卵内,因此证明大熊猫精子体外获能成功。但是大熊猫精子进人卵后的命运如何?至今国内外从来没有报道。本文针对这个问题试图研究大熊猫精子穿人金黄地鼠卵后的变化及异种精卵之间的相互关系。当然这项研究不是为了创造一种非熊猫非鼠的奇怪物种,而是由于大熊猫活体卵子极难获得,只好以金黄地鼠卵为模型,进而为研究大熊猫...  (本文共7页) 阅读全文>>

《动物学报》1991年04期
动物学报

文昌鱼受精机理研究——受精卵的超显微结构

文昌鱼胚胎发育在40、50年代已为胚胎学家重视,我国胚胎学家童第周先生及其合作者用文昌鱼为材料进行了系列实验胚胎学研究。但由于文昌鱼不易获得,亦不易饲养,所以有关文昌鱼的研究尤其是受精的研究文献资料至今寥寥无几,还不如海胆的研究,至于研究文昌鱼卵受精的超显微结构,在国内、外可能还是首次。 材料和方法 文昌鱼采自青岛沙子口海域,在实验室水缸中饲养,6月底至7月初性成熟,文昌鱼为雌雄异体,成熟的雌体卵巢为桔黄色,雄体精巢呈乳白色,在近黄昏时发情,获得的雌雄个体分别放入有新鲜海水的培养缸中,片刻雄体排精,雌体产卵,进行人工授精。授精后分两组取材:一组,受精卵分别以1秒一50分钟固定;二组,授精后3分钟用秋水仙素(简称col)25拌mol/L和细胞松弛素B(简称Ca)2叩mol/L处理20分钟后固定。固定液采用Flood配方,由25%戊二醛:10%甲醛(由多聚甲醛新配制成):。.2mol/L二甲肿酸钠缓冲液:过滤海水配比按l:l:2:6...  (本文共7页) 阅读全文>>

《动物学研究》1993年03期
动物学研究

红鲫与湘江野鲤杂交的受精细胞学研究

SO年代初,湖南帅范大学牛物系与湖南省湘阴县东湖渔场协作,用红鲫(arassius auratus)作母本、湘江野鲜(Qprinu。(、alpio )作父本进行杂交育种,获得了具有明显杂交优势的杂种一代(命名为湘鲫)(刘掏等,1986),后来又繁殖出杂种-二代、二代等。经染色体检查,初步发现杂种一代是:_:倍体(Zn—100),个别是三倍体(3n—150)‘,杂种三代是异源四倍体“”。为了探索鲫鲤杂交优势形成及杂种染色体加倍的原理,作者于1989年至1991年进行了红鲫卵子与湘江野鲤精子杂交的受精细胞学研究。现将这一工作整理报道于卜 材 料 与 方 法 受精卵在 18—20℃水温中经人工授精获得。从受精到受精后 5 min,每隔 2 min取材一次,受精后 10 min取材一次,以后每隔 5 min取材一次,直至受精后60 min。所取材料用 Bonn氏液或 Smith氏液固定,酒精脱水,二:甲苯透明,石蜡包埋。切片厚8—10 ...  (本文共8页) 阅读全文>>

《山西医科大学学报》2011年05期
山西医科大学学报

受精卵最佳显微注射时间的探索

转基因技术最初由Gorden等在20世纪80年代初创立的,经过近半个世纪的发展,已成为当今生物技术研究的热点。近10多年来,与核移植技术的结合,转基因效率大大提高,携带有不同外源基因的不同种类的转基因动物迅速增加[1]。在畜牧生产领域,通过转基因技术培育家畜新品种是转基因技术应用的重要体现,在我国这方面已经引起了广泛关注。转基因技术的核心是将外源基因通过不同的方法导入小鼠受精卵,然后产生携带外源基因的小鼠品系。制作转基因动物的方法有很多,其中显微注射法是应用最广泛,重复性最高的方法。该方法是利用显微操作系统和显微注射技术将外源基因直接注入实验动物的受精卵原核,使外源基因整合到动物基因组,再通过胚胎移植技术将整合有外源基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发育,进而得到转基因动物[2,3]。显微注射法制备转基因动物的技术环节中,影响成功率的因素比较多,其中得到大而清晰的受精卵雄性原核是影响显微注射成败的关键。不同品系的小鼠,遗传背景不...  (本文共4页) 阅读全文>>

《中国海洋大学学报(自然科学版)》2005年06期
中国海洋大学学报(自然科学版)

太平洋牡蛎雄核发育卵中核行为的细胞学观察

雄核发育是指卵子的遗传物质失活而只依靠精子DNA发育成胚胎的1种发育方式。由于雄核发育二倍体后代染色体的基因位点均处于纯合状态,因而可用于快速建立纯系[1-3]、进行遗传分析[2]。雄核发育技术与精子冷藏技术相结合还可以成为物种保护的重要手段[4]。在许多鱼类品种如泥鳅(Misgurmus anguilli-caudatus)[5]、虹鳟(Salmo gairdneri)[2-3,6]、马苏大麻哈鱼(Oncorhynchus masou)[1]、鲤鱼(Cyprinus carpioL.)[7]、大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)[8,9]中已相继成功诱导出雄核发育二倍体。由雄核发育单倍体诱导产生二倍体的主要方法为利用温度、压力刺激或化学诱变剂阻止第1卵裂,但已有的报道表明通过这种方法获得二倍体的存活率极低[1,3,5]。此外,关于雄核发育卵子发育早期的细胞学方面的研究进行得很少,雄核发育的机制并不清楚。...  (本文共6页) 阅读全文>>

《国外畜牧科技》1994年01期
国外畜牧科技

嵌合体鸡及其在基因组操作中的应用

在哺乳动物,利用显微注射等方法,把外源基因导入受精卵的雄性原核,再把经遗传修饰的合子移植到受体母畜体内,使之发育成转基因后代己获成功。然而在禽类,由于其生殖解剖及生殖生理比较独特,因此把外源DNA导入其基因组的技术,还存在着一系列问题,如处死法获得单细胞卵子、受精时多精入卵的干扰使雄性原核不易识别以及把卵子重新移入母鸡输卵管内等过程中。致使在哺乳动物中已经广泛应用的转基因技术,不适合在禽类中应用。 为了解决禽类基因组操作中的间题,本研究根据胚胎细胞接受外源基因的能力和供体胚盘细胞在受体胚胎种系(germline)中整合的能力,建立了一个使外源基因进入家禽基因组的替代方法(图1)。现己建立了一套体外操作系统,可使胚胎最大限度地整合外源DNA,并容易地从经转染齐血理的细胞群中,筛选出遗传修饰细胞(ge,etieally modi-fied cells);另外,还建立了一套体内操作系统,可连续生产能高频率地传递遗传修饰基因的种系嵌合体...  (本文共3页) 阅读全文>>