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植物启动子研究进展

随着分子生物学等学科理论及技术的日益发展,基因工程广泛应用于各行业中,而启动子作为转基因中重要的顺式调控元件起到了至关重要的作用。启动子是位于基因上游的5′端侧翼区域且能够与RNA聚合酶及一些反式作用因子识别与结合的一段特异的DNA序列[1-5]。启动子是基因转录的调控中心,对启动子的深入研究不仅有利于掌握控制基因转录模式以及调控机制,还有助于调控外源基因的表达。1启动子的内部结构启动子区域分核心启动子区与上游启动子区2个部分。核心启动子区又称为近端启动子区,是指位于距离转录起点35bp左右区域范围。此区域包含一些重要的功能元件,能够准确的定位转录起点及方向,是基因调控的关键基础[6]。该部分主要包括转录因子TFIIB识别位点(BRE)、起始因子(Inr)、TATA-box和下游启动子元件(DPE)[6-7]。上游启动子区又称远端启动子区,是指位于核心启动子区距其转录起始位点几百至上千个核苷酸不等的上游。该部分主要包含了与下游基...  (本文共4页) 阅读全文>>

西南大学
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蜡梅非特异性脂转移蛋白基因nsLTP家族成员克隆及其抗逆功能分析

植物非特异性脂转移蛋白(nonspecific lipid transfer protein,nsLTP)是一类广泛存在于高等植物中的碱性小分子蛋白,编码nsLTP的基因在许多植物中都以基因家族的形式存在,如拟南芥、大麦等。nsLTP成员具有不同的生物学功能,主要涉及角质合成,用以调节脂质储藏的分解代谢的β氧化、体细胞胚胎形成、植物信号转导、参与植物有性生殖、花粉发育、对病原物的防御以及对生物和非生物胁迫的应答等。明确不同成员在植物抗性形成方面的作用,对于调控植物抗性和利用基因工程改良植物抗性有重要意义。本论文克隆得到了蜡梅脂转移基因家族4个成员,并进行了启动子分离工作,利用生物信息学、荧光定量PCR、原核表达等方法对获得的蜡梅脂转移蛋白基因家族成员抗逆性的差异进行了分析,主要结果如下:1蜡梅nsLTP基因家族4个成员的克隆与分子特征分析在已构建的蜡梅花cDNA文库及EST分析的基础上,通过对文库cDNA克隆全长测序,得到了4个...  (本文共150页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
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玉米低温和干旱诱导型启动子的克隆及功能分析

低温、干旱等逆境是影响植物生长发育的主要非生物胁迫因子,严重的影响植物的产量。每年全球主要农作物的产量损失约有50%是由非生物胁迫导致的。玉米是我国三大粮食作物之一,属于逆境敏感型植物,生育期内极易受低温、干旱、盐渍等多元逆境胁迫的干扰和伤害,解决玉米生产中严重的多元逆境胁迫问题,提高玉米产量,除了常规育种技术以外,基于基因遗传转化的生物育种技术是一个重要的选择。通过转基因技术提高玉米抗逆性是有效应对逆境挑战的根本途径,而分离、克隆抗逆关键基因是解决这一重要问题的核心与关键,克隆和组建逆境交叉诱导型启动子是进行玉米多抗基因转化实现分子育种目标的重要保障。诱导型启动子可根据需要在植物特定的发育阶段、组织器官和生长环境下,诱导基因的大量表达,应答外界环境的变化。避免了植物营养的不必要浪费。近年来,为了提高植物的抗逆性,许多启动子和抗逆基因被克隆,但是玉米的逆境诱导型启动子研究较少。本研究从玉米中分离了低温、干旱诱导型启动子(LsP)...  (本文共59页) 本文目录 | 阅读全文>>

西北农林科技大学
西北农林科技大学

苹果不同PGIP启动子差异元件的功能研究

实时荧光定量PCR结果分析表明:PGIP1和PGIP2基因在苹果叶片中的表达量受苹果褐斑病菌、水杨酸和茉莉酸甲酯的诱导。为了研究苹果PGIP启动子响应苹果褐斑病菌、水杨酸和茉莉酸甲酯诱导的区域以及响应的元件,将‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’苹果PGIP1和PGIP2基因全长启动子及5’缺失片段与GUS基因融合,转化拟南芥,通过检测GUS基因在转基因拟南芥叶片中的表达水平,分析在拟南芥白粉病、水杨酸和茉莉酸甲酯诱导处理下,苹果PGIP1和PGIP2基因启动子的活性变化,筛选出不同诱导的响应元件,研究苹果PGIP基因启动子元件的功能,探讨苹果PGIP基因抗病表达的机制。主要结果如下:1.启动子元件分析发现‘秦冠’和‘太平洋玫瑰’苹果PGIP1启动子含有茉莉酸甲酯响应元件CGTCA-motif/TGACG-motif(-763~-759bp),PGIP2启动子含有3个水杨酸响应元件TCA-element(‘秦冠’:-1594~-1585bp...  (本文共47页) 本文目录 | 阅读全文>>

沈阳农业大学
沈阳农业大学

垂花百合花青素基因 ANS 启动子的克隆及功能分析

百合是世界著名多年生观赏花卉,其花枝挺拔、花型优美、花香迷人、花色丰富,深受世界人民喜爱,因此在鲜切花市场占有重要地位。虽然百合花色现有粉红色系、橙色系、白色等颜色,但蓝紫色百合花始终是人们向往的品种。花青素广泛分布于植物体内,可以使植物呈现红、蓝、紫、浅粉等颜色。其中花青素合成酶(anthocyanidin synthase, ANS,又称leucoanthocyanidin dioxygenase, LDOX)是花青素合成末期的关键酶,它可以将无色的花青素催化成有色的花青素,并且在大多数植物的花中特异性表达。因此研究花青素合成酶基因(ANS)启动子可以为通过基因工程手段改变花色奠定重要基础。本研究采用的植物材料是垂花百合花被片,垂花百合是我国原生种,其花被卷曲呈紫红色。我们将现有的LcANS基因启动子通过缺失的方法探究其上顺式作用元件的功能。主要结果如下:1.采用染色体步移法克隆得到垂花百合ANS基因启动子序列,通过生物信息...  (本文共82页) 本文目录 | 阅读全文>>

海南大学
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荔枝多酚氧化酶基因启动子克隆与功能初步分析

荔枝(Litchi chinensis Sonn.)果实采后快速褐变,限制着荔枝产业的发展。采后生理学证实,酶促褐变是果皮褐变的主要原因,其中多酚氧化酶在褐变中起主要作用。前期研究表明,荔枝PPO基因表达与果皮褐变相关,但关于PPO基因的分子生物学研究尚待进一步深入。本研究在前期研究基础上克隆了荔枝PPO基因部分启动子序列,分析其部分顺式作用元件,探讨了不同品种PPO基因启动子序列差异,并初步研究了该启动子调控GUS基因在荔枝叶片、果皮和种子中的表达差异,以期为进一步揭示PPO基因表达与果皮褐变关系,通过生物技术培育荔枝耐贮品种等提供提供依据。采用接头PCR和热不对称交错PCR相结合,克隆获得妃子笑荔枝果皮PPO基因启动子序列1048bp。 NCBI-BLASTn分析表明,该启动子与葡萄PPO基因启动子序列相似性为73%。序列分析表明,该启动子转录起始位点可能位于ATG密码子上游-102bp处;在ATG密码子上游-149bp和-...  (本文共64页) 本文目录 | 阅读全文>>