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甲型肝炎抗原的提取和血清学鉴定

1978年和1979年秋季甲肝流行季节,在北京郊区甲肝五个暴发点,采集患儿周围的易感者粪便,经过一个潜伏期后,选择发病者粪便提取甲肝病毒抗原,并采集患儿恢复期血清提取抗一HAvlgG,用IEM、McF、IAHA和sPRIA等方法与参考抗原和抗体进行了交叉鉴定。材料与方法 一、材料, (一)标本的采集:1.粪便:在甲肝暴发点急性肝炎患儿周围15岁以下儿童密切接触者连续采便7、10天,贮存在一2。’c。对接触者定期采血作肝功能和HB汰g检测。观察期内如接触者出现黄疽或sGpT明显升高,选择发病者粪便标本作甲肝抗原提取用。从健康儿童粪便提取正常粪便抗原作为对照。2.血清:双份血清采自急性黄疽型肝炎患儿,HBsAg检测阴性,发病7天内的急性期血清,发病3个月后的恢复期血清。 (二)参考抗原和杭体:1.参考抗原:美国国立卫生研究院提供,HepatitJ,A Ferg d 331一23一74。2.参考抗体:(1)M于1株感染的黑猩猩血清,美...  (本文共4页) 阅读全文>>

《西安交通大学学报(医学版)》1981年01期
西安交通大学学报(医学版)

从甲型肝炎流行单位患儿粪便中提取甲肝抗原(摘要)

19了9年秋,从10个甲肝流行单位共采甲肝密切接触者粪便198份,后经观察发病者三人,另从一名门诊就诊较早,黄疽期病人采集粪便一份,计共四份处于黄疽前期和黄疽早期粪便,进行粪便甲肝抗原提取,获得成功。此四名患儿均经临床和肝功检查确诊为肝炎,并用RPHA方法检测HBS九:排除了乙盯。粪便提取甲肝抗原采用Seigl氏法。用以上方法从四份粪便中均获得了甲肝抗原物质。此抗原经与医科院病毒所提...  (本文共1页) 阅读全文>>

《预防医学情报》1985年05期
预防医学情报

四川省不同疫区病毒性肝炎患者粪便中甲肝抗原检测报告

自1983年以来,先后从重庆、合川、自贡、璧山、万县、三台、南充等地区的甲肝暴发流行点中收集甲肝病人和密切接触者的粪便185份。用0.肠M,FH7.6 Tri。一盐酸缓冲浪将其分别制成10弘粪便悬液,用酶免检测法刊筛,结果6份为甲肝抗原阳性。其中5份经聚乙二醇沉淀,氯仿抽提纯化后,再用酶免检测法进行抗原定量测定,其中一份滴度高达l‘160。用美国Abbott药盒标化的甲肝棺M阳性和阴性血清各4份,分别对上述纯化抗原进行验证,结果纯化抗原均只与甲肝IgM阳性血清起反应(抗拼链抗体包被酶免法)。对这些抗原阳性病人进行血清学诊断,结果病人急性期血清甲肝lgM抗体阳性(酶免法),或恢复期血中甲肝抗体较急性期血中抗体滴度有》4倍升高(免疫粘连...  (本文共2页) 阅读全文>>

《山东医药》1990年03期
山东医药

用人胎肺细胞制备甲肝抗原

提供了有利条件。 为满足甲型肝炎(HA)的临床诊断和流行病学调查的需要,解决甲肝抗原(HAAg)供不应求的问题,本室在国内首次以人胎肺细胞代替常用的ZBS培养甲肝病毒(HAv),并将HAAg的制备方法加以改进,在生产HAAg方面取得了良好效果。 一、人胎肺细胞的制备:选择4个月胎龄发育正常经水囊引产的新鲜胎儿,取肺剪碎,加入0.25%胰蛋白酶,置4℃15~20小时,吸除消化液,加入10倍营养液,反复吹打至细胞分散为止,分装无菌瓶,置37℃培养,每3天换液l次,2~3代后即可接种病毒。 二、HAv培养:用本室自甲肝病人粪便中分离的sD一129株分别按常规法、旋转法和离心处理法进行培养,用ELIsA和IFA检测HAAg,证明旋转法和离心处理法明显优于常规法。用SD一129株感染4种不同细胞系(胎肺细胞、胎肾细胞、人肝癌传代细胞和vero细胞)培养10天后,结果胎肺细胞最敏感。 三、...  (本文共1页) 阅读全文>>

《国外医学(微生物学分册)》1978年02期
国外医学(微生物学分册)

甲型肝炎抗原与抗体(综述)

病毒性肝炎至今仍是危害人民健康的主要传染病。自从1965年Blumberg发现乙型肝炭抗原以来,乙肝的病因、发病原理及诊断防治有很大进展。相比之下,甲肝的研究则较落后。直到1973年Feinstone’首先用免疫电镜方法,自甲肝病人粪便中发现甲肝病毒颗粒,但由于实验条件要求较高,进展较慢。近2一3年来,通过对甲肝抗原的提纯与检测方法的改进,实验方法正由复杂发展为较简单,开始为更广泛的应用打下了基础,并对今后研究甲肝的发病、免疫机制及甲肝病毒的分离培养有所促进。 行甲肝时也用城猴分离出一株病毒CR326也 可被甲肝病人恢复期血清所中和,因此孩猴 是公认的甲肝敏感动物,其血清、肝和粪便 滤液都可作为甲肝抗原的来源。此外,1975 年以来,用甲肝感染黑猩猩也获得成功。 2.体外检测甲肝抗原与抗体免疫电 镜是最早应用的方法。Feinstone用甲肝病 人粪便滤液加甲肝恢复期血清,超速离心后 做电镜检查,发现病人大便中有27纤米的病 毒样...  (本文共4页) 阅读全文>>

《高技术通讯》1991年03期
高技术通讯

以甲型肝炎病毒基因全部开放读码框架在痘苗病毒载体表达甲肝抗原

甲型肝炎病毒(甲肝)繁殖慢,用其制备疫苗或抗原都受到一定限制。因而利用基因工程技术表达甲肝抗原成为目前甲肝病毒研究的一项重要内容〔‘一‘〕。作者将甲肝病毒基因的全部开放读码框架cDNA重组于痘苗病毒天坛株基因组的一个非必需区一一比nd IM片段,所获得的重组病毒命名为VMSI IllAV25。该重组病毒能表达甲肝高技术通讯1991.3.全部结构蛋白,免疫家兔后能产生甲肝中和抗体。材料与方法 一、病毒重组 l·四个甲肝HM一175毒株的不同cDNA克隆(pl王Avi3o7,pIL入v22s,pHAvl48,pHAv24)由美国Purceu教授惠赠[s],经过拼接,得到几乎全长的甲肝基因pHAv扣〕。 2.用Hael内切酶修饰该基因5’端非编码区,保留ATG上游的66对碱基,然后连同整个开放读码框架插入含痘苗病毒仪基因的PJI。质粒困的Pll启动子下游。 3.将上述质粒中的全部甲肝基因连同启动子与含痘苗病毒Hind IM片段的另一个...  (本文共7页) 阅读全文>>