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胶体制备与纯化

1引言英国化学家T·Graham发现一些物质,如无机盐能以高扩散速度穿透半透膜,而其他物质则难以甚至不能穿透半透膜。当蒸发溶剂时,这些物质不会形成晶体,而是形成粘性胶体状态。因此,根据此现象,Graham把物质分为两类:前一类称为类晶质(crystalloid),后一类称为胶体(colloid)。随着科学的发展,人们发现这种分类并不合适,许多结晶材料也可以在适当的介质中形成胶体特征的体系。2胶体的制备在胶体形成原理的指导下,设计了许多制备方法。其主要方法分类介绍于下:2.1沉淀法通过各种方法控制沉淀反应速率可以制得各种均分散胶体。取适量的HAuCl4稀溶液,用K2CO3溶液中和后,加人少量的白磷,可以得到半径的为lnm的高分散度的球形金溶胶。剩余的HAuCl4用甲醛还原,甲醛要在极其缓慢的条件下加入,以使所还原的金就在原有晶核上聚集,从而避免有新的晶核生成。由于第一阶段生成一定数目的晶核,第二阶段又是有规律的增长和聚集,因此,可...  (本文共2页) 阅读全文>>

集美大学
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诺如病毒和札如病毒胶体金法检测试纸的研究

诺如病毒和札如病毒主要对人致病,是引起人非细菌性急性胃肠炎疾病的主要病原体,被合称为人杯状病毒。这两种病毒具有较强的传染性,尤其诺如病毒,可以通过污染食物、水、蔬菜等多种传播方式引起腹泻流行或者集中爆发疫情。现在,人杯状病毒已是继轮状病毒之后第二大引起婴幼儿急性腹泻散发的病原体。为此,许多发达国家或地区都在加大对该病毒的研究和预防控制力度。所以,建立快速便捷的检测方法尤为必要。本论文以诺如病毒和札如病毒为研究对象,通过构建多表位抗原,制备抗体,并利用胶体金免疫层析技术,建立诺如病毒和札如病毒快速检测方法。主要的研究结果如下:1.诺如病毒抗体的制备与纯化:通过IPTG诱导BL21/pET32a/HuNoV菌株原核表达,利用亲和层析方法纯化得到34kDa的重组融合蛋白。将重组融合蛋白免疫BALB/c小鼠,获得了小鼠多抗血清;经五免后测定血清效价达到10000,再经过细胞融合、克隆,筛选得到4株单抗细胞株。选择其中两株进一步制备腹水生...  (本文共95页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
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犬血清弓形虫IgG抗体快速诊断金标试纸条的研制

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的以孕妇(畜)流产、弱胎、畸胎、死胎和儿童(幼畜)生长受阻、死亡等为特征的一种人畜共患病。该病广泛存在于世界各地,弓形虫宿主范围广泛,人和犬为其中间宿主,都存在一定的感染率,据报道人的弓形虫感染与养犬存在一定关系。目前,国内外学者已建立多种检测弓形虫抗原或抗体的方法,如病原学检测、间接血凝检测、间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、PCR检测等,但这些方法操作较复杂、费时长且需要一定的仪器设备,在临床推广应用中受到一定的限制。因此,建立一种简易、快速、特异性强的检测方法,专用于犬弓形虫病的血清学诊断与流行病学调查,不仅有助于了解犬感染情况,同时对于阻断弓形虫由犬向人的传播也有重要的意义。本研究用弓形虫速殖子腹腔感染昆明小鼠分别制备了弓形虫可溶性抗原和代谢分泌抗原,并用制备的代谢分泌抗原免疫健康犬获得了犬弓形虫阳性血清;采集健康犬的血清,用...  (本文共67页) 本文目录 | 阅读全文>>

东北农业大学
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传染性胰腺坏死病毒胶体金免疫层析试纸条的研制

传染性胰坏死病病毒(Infectious pancreatic necrosis virus)是一种严重的病毒性传染病,它对鳟鱼及蛙鱼的幼鱼有特别明显的传染性及致病性,高致病性毒株可在两个月内导致70%的幼鱼死亡。该病主要危害鲑鳟鱼类的幼鱼,死亡率高达90%以上。传染性胰坏死病病毒是通过鱼卵垂直传播的,已经被感染过的鱼自身已存在抗体,可以抵抗病毒的再次侵袭,但是这些鱼会将自身的病毒感染给其他鱼类,造成的扩散常给鱼类养殖业带来灾难性的损失,是各国进出口鱼的检测对象。本研究将抗IPNV单克隆抗体腹水和抗IPNV VP2重组蛋白多抗血清结合双抗体夹心原理建立一种检测IPNV的胶体金免疫层析试纸条。将金标抗体喷涂在金标垫上,IPNV VP2多抗与山羊抗鼠IgG二抗均喷涂于硝酸纤维素膜上分别作为检测线与质控线,试纸条的两端分别为样品垫与吸收垫。利用辛酸-饱和硫酸铵法纯化血清抗体以及单克隆抗体腹水。纯化后血清抗体的浓度为10.014mg/m...  (本文共63页) 本文目录 | 阅读全文>>

华中农业大学
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鸡传染性法氏囊病抗体快速检测试纸条的研制及初步应用

鸡传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)引起的一种鸡的急性、高度接触性传染病,给世界各国的家禽养殖业带来了巨大损失。自IBDV发现至今,新的变异株及超强毒株的出现,使得传统疫苗已不能控制其流行,这进一步增加了该病的防制难度。开展血清抗体检测是防制该病的重要措施之一,目前IBD血清抗体检测方法主要有琼脂凝胶扩散法、微量血清中和试验法及酶联免疫吸附试验法。但这些方法由于费时或成本高等因素的制约,主要用于实验室检测,不适合基层检测。因此,研制一种适合基层兽医或养殖个体进行快速检测IBD血清抗体的方法,对防制IBD是必要的。本研究运用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测鸡传染性法氏囊病血清抗体的胶体金免疫层析方法,取得了如下成果:1.IBDV结构蛋白(VP2)基因的原核表达及表达蛋白的纯化和免疫活性鉴定...  (本文共65页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西大学
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奶牛肝功能酶检测与乳房炎白色念珠菌快速诊断试纸条研究

易于采样、便于疾病检测的手段对维护奶牛产后健康和奶牛场经济效益至关重要。肝功酶检测不仅对奶牛产后肝脏机能正常与否可以提供直接参考依据,也可对体脂过度动员引起酮病等重要代谢疾病提供参考依据。乳房炎的真菌性病原在广西部分奶牛场不易治愈,诊断也非常困难。本研究:第一,探索奶牛泌乳早期部分肝功能酶在血浆与乳清中的活性及其相关性,评价能否用乳清代替血浆进行肝功酶检测。其目的在于寻找便于监控奶牛产后肝功能状况的途径。第二,对奶牛乳房炎微生物病原调查中对奶牛影响最大的一种真菌性病原一白色念珠菌,进行快速诊断试纸条检测方法研究,旨在建立乳房炎白色念珠菌快速诊断方法。第一部分丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)是重要的肝功能代谢酶,在动物的肝脏疾病检测中发挥重要的作用。本试验通过监测健康奶牛血液和牛奶中的ALT、AST、GGT及ALP活性,并探讨其相关性。方法:选取广西某规模...  (本文共195页) 本文目录 | 阅读全文>>