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大鼠肝细胞核游离型RNA聚合酶的体外转录活性测定

真该细胞RNA的转录生成是1个由多种成份参加的复杂过程,其确切机制不尽清楚。RNA PoI是参与真核细胞内RNA转录生成过程的主要酶,国外不少学者报道,此酶是以两种形式存在于细胞核内,即①与染色质(或DNA)模板紧密结合的(c1]romatin or template—en—gaged or bOUnGI)形式和②游离的(free)形式。真核细胞在受到激素或药物等刺激后,这两种类型的酶均发生活性变化。关于这两种类型的聚合酶在结构和功能上的相互关系及转录过程中的意义尚不十分清楚。本文作者在大鼠肝细胞核体外转录体系基础上,测定了游离型RNAPoI的活性,对研究真核转录器的组成和转录的机制.揭示真核基因表达在转录水平上的调节有一定意义。1材料与方法1.1材料 实验动物为健康雄性Wastar系大鼠,体重250~300g。 主要试剂;多聚脱氧腺嘌呤一胸腺嘧啶核苷酸(Poly[d(A_T)])和口一鹅膏草碱(a—amanitin,Boehr...  (本文共4页) 阅读全文>>

《自然杂志》1987年10期
自然杂志

大鼠肝细胞高密度脂蛋白受体及其调控的研究

不少资料表明,高密度脂蛋白(HDL)与肝细胞的相互作用是HDL通过逆向转运机制而起抗动脉粥样硬化作用的关键步骤之一〔11.但迄今对肝细胞HDL受体的存在尚有异议,有关其调节困素了解更少.我们在培养的大鼠肝细胞表面发现的确存在着不同于LDL受体的高亲和性、可饱和性HDL受体(最大结合容量:”7.sng/mg细胞蛋白,解离常数:19.9仲g/ml).用高脂血清孵育肝细胞可增加其HDL受体活性. 进一步研究枯否细胞对肝细胞HDL受体的调控.结果表明,静脉注射单核巨噬细胞刺激剂酵母多糖(:ymosan,3mg/1009体重,每周两次,共两周)以刺激枯否细胞,对应用普通饲料大鼠的肝实质及非实质细胞的1”IeeHDL代谢影响不大,但可使高脂饲料大鼠肝实质细胞对娜I一HDL的结合、摄取及降解分别增加幻%、17%及盯%,非实质细胞则分别增加13%、9%及17%,并促进胆汁中胆酸及胆固醇的排泄,上述改变均具有统计学意义.应用培养的大鼠肝细胞单层,...  (本文共2页) 阅读全文>>

《解剖学杂志》1987年03期
解剖学杂志

补肾助阳药对甲减大鼠肝细胞结构和组织化学变化的影响

甲状腺机能减退症(简称甲减)的中医辨证多属阳虚,临床选用补肾助阳药进行治疗。肝脏的结构和功能状态与甲状腺的功能状态密切相关。补肾助阳药能提高去甲状腺大鼠肝组织的氧耗t’1,为探讨补肾助阳药改善甲减状态的原理,本实验着重从组织学、组织化学和亚微结构等方面观察常用的补肾助阳方药龟龄集和右归丸对甲减大鼠模型肝脏的影响。材料与方法 wistar雌性大鼠178只,体重230士309。分批实验,短批分为四组:(1)正常对照组(简称正常组,46只):自来水自由认水。(2)甲减造型组(简称甲减组,43只):以40mg%的他巴哇(上海第十一制药厂出品)水溶液代替自来水饮水。(3)龟龄集组(45只):以40mg%的他巴哇水溶液代替自来水饮水,同时每天定量予以0.89%的龟龄集(山西中药厂出品)饲料饼干,平均每天每只动物摄入约40 mg龟龄集。(4)右归丸组(45只):以40 mg%的他巴哇水溶液代替自来水饮水,同时每天定量予以16.79%的右归丸(...  (本文共5页) 阅读全文>>

《卫生毒理学杂志》1989年02期
卫生毒理学杂志

应用大鼠肝细胞原代培养作为短期致突变测试体外介导活化系统的研究

大多数致突变物或玫痛物需在体内经生物转化才能成为具有活性的作用物。因此,致突变试验中采用适当的活化系统就至关重要。A二e。等〔1〕在1973年把肝微粒体酶活化系统应用于体外致突变试验中,用来偷测许 多种化合物,获得满意的效来。但该活化系友存在如下缺点:1.微粒体酶只是肝细胞代谢酶系的一部份,仅依靠这些酶难以保证致突变物代谢活化过程的完整性,2.有些前致突变物需经非微粒体代谢途径才能转化为活峰物,3.该系统需补充高水平的外源辅因子,但是这是非生理性的,酶促反应过程可甜因此受到干扰;‘4.缺乏降解与灭活酶系,、故生物转化过程及转归与体内不尽相同。 因此,人们多年来一直试图建立更为理想的活化系统。由于肝肚是体内代谢功能最活跃的器官,其细胞被选为体外培养的活化沪系统,而且效果良好。为了进一步探索肝细咆在常用体外致突变试验使用的可能性,本研究利用了原代培养的大鼠肝细胞作活化细袍,以中国地鼠肺V79细胞和鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型突变株TA...  (本文共5页) 阅读全文>>

《中国应用生理学杂志》1989年01期
中国应用生理学杂志

不同发育年龄大鼠肝细胞及其溶酶体对急性低氧的应答

我们曾经报道了移人高原的大鼠子一代成体,在24h高原低气压低氧时,表现出以血清转氨酶、肝溶酶体酸性磷酸酶活力升高及肝糖原、蛋白质含量下降的肝细胞病理变化和代谢异常的现象〔”。此种低氧效应在不同种动物之间有相似的规律存在,在损伤程度上有种的差异性‘2,。.本文旨在探讨动物年龄与此种低氧肝细胞损伤效应间的关系:。 材料和方法 实验用wistar大鼠系北京引入本所后的子六代。分四个年龄组二以10、35、75和570天鼠分别代表新生、幼年、成年和老年期大鼠。除老年组均为雌性外,其它三组雌雄兼用。低压舱内模拟海拔高度S000m和8000m,并设2300m组(西宁地区海拔高度)作对照比较。实验前将各年龄组大鼠随机分配,动物在舱内可随意进食与饮水,10天鼠随母鼠一同进舱。动物进舱后以14Qm/min的速度升至各实验高度。低氧暴露24h后,取出动物,迅速断头采血,取肝,进行各项指标测定。10天鼠三只合为一个样本,其它各年龄组一只一个样本。 检测...  (本文共7页) 阅读全文>>

《河南师范大学学报(自然科学版)》1989年02期
河南师范大学学报(自然科学版)

大鼠肝细胞的快速分离和原代培养

1引言 啮齿类(大、小鼠)的肝细胞由于功能复杂,细胞器比较完备,能代表哺乳类正常肝细胞而且在实验室内容易得到,是组织学家和经典细胞学家常用的实验材料。传统研究方法是制成切片进行显微镜水平和电镜水平的各项研究。将分离的肝细胞进行培养的实验方法虽然早在五十年代就已开始,但是真正发展起来则是在七十年代里,Seglen等山对分离的化学条件(酶,pH值,离子成份等)进行了充分研究以后。正常肝细胞培养现在日益受到重视是因为能用它研究:细胞周期的调控,致癌因子对正常细胞的影响,细胞分化功能的表达,激素与受体的相互作用,表面抗原等重大生物学问题。本文试图建立一种比较稳定的和规范化的分离和培养大鼠肝细胞的技术。2材料和方法 解剖动物和灌洗肝脏的方法参照page和Garrey川,Horriog团等,但是作了一项主要改进,是精确安排解剖动物和灌洗肝脏的程序,使肝细胞缺营养的时间尽可能缩短。用胶原酶分离肝细胞的方法是参照Seglentl],Furuka...  (本文共7页) 阅读全文>>