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HSPC016基因重组工程菌发酵研究

毛乳头为毛囊底部含血管的间充质成分[1] 。毛乳头细胞在胚胎毛囊的发育及成年毛囊的周期性生长过程中具有十分重要的作用。因此毛乳头细胞是毛囊研究的中心环节之一[2 ] 。我们已用抑制性消减杂交技术成功地建立了一个凝集性生长状态下的人毛乳头细胞差异表达基因cDNA文库[3] 。造血干细胞 (hematopoieticstem/ progenitorcell,HSPC)相关基因HSPC0 16是我国复旦大学学者在人造血干细胞中发现的新基因[4 ] ,我们首次发现了HSPC0 16作为上调表达基因在凝集性生长状态人毛乳头细胞差异表达cDNA文库中的表达[3] ,并已成功地将HSPC0 16基因克隆 ,构建了表达良好的HSPC0 16基因重组工程菌。为了获得一定量的HSPC0 16蛋白 ,需通过重组菌的繁殖发酵 ,一方面要提高发酵菌体数量及目的蛋白HSPC0 16的表达量 ,同时需兼顾节省原料、降低成本。本研究拟通过对培养基的选择、葡萄糖...  (本文共3页) 阅读全文>>

《第一军医大学学报》2005年03期
第一军医大学学报

重组人血管内皮细胞生长因子工程菌高密度发酵工艺研究

血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能特异性促进血管内皮细胞增殖并增加血管通透性,在血管发生和血管生成中起重要作用[1]。VEGF作为血管生成的一种直接效应分子,已被用于冠心病防治的实验研究,在缺血性疾病的治疗方面具有潜在的临床应用价值[2]。由于基因转录水平和剪切方式不同,VEGF 至少有5种亚型,分别为VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF189和VEGF206。由121个氨基酸组成的VEGF121缺乏外显子6和7编码的氨基酸,不具有肝素亲和力,因而在缺血环境中具有比VEGF165更强的分散作用[3]。由于VEGF天然来源非常有限,产量甚微,远不能满足临床应用的需要,因此利用DNA重组技术生产VEGF势在必行。本研究所已成功实现了VEGF121在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达(另文发表),为了满足VEGF121规模化生产的需要,我们对...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中学生物教学》2003年11期
中学生物教学

对“工程菌”解释的商榷

现行高中生物教材 (选修 )P .61对“工程菌”的注释为 :用基因工程的方法 ,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系一般称为“工程菌” ,如含有人胰岛素的大肠杆菌菌株 ,含有抗虫基因的土...  (本文共1页) 阅读全文>>

《食品工业科技》2008年11期
食品工业科技

α-葡萄糖苷酶工程菌发酵条件的研究

α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,EC3·2·1·20)是一种限制性水解酶[1],其来源广泛,性质各异。多数α-葡萄糖苷酶表现出分解能力,在α-葡萄糖苷、寡糖和葡聚糖的非还原末端切开α-1,4糖苷键,释放出葡萄糖,可用于生产单糖以作为能源和碳源利用[2、3];一些α-葡萄糖苷酶则表现出明显的转苷活性,可以将游离的葡萄糖残基转移到糖类底物上形成α-1,6-糖苷键,例如:Talaromyces dupont、iAspergillus niger、Aspergillus nidulans所产的α-葡萄糖苷酶不仅能水解麦芽糖成为葡萄糖,同时也能催化其产生α-1,6糖-苷键,生成异麦芽糖和潘糖等[3]。具有转苷活性的α-葡萄糖苷酶已经被应用于工业上生产异麦芽低聚糖和改变糖类分子以改善其化学性质和生理功能,并且α-葡萄糖苷酶的转苷作用在基因调控糖类利用方面具有重要的作用[4]。本实验室选育的黑曲霉M-1菌株能产生一种转苷活性很强的...  (本文共3页) 阅读全文>>

《中国生化药物杂志》2007年01期
中国生化药物杂志

重组人白细胞介素15工程菌高密度发酵条件探讨

人白细胞介素15(IL-15)是1种多功能的细胞因子,可以促进淋巴细胞、NK细胞的增殖分化和调控,诱导免疫球蛋白分泌,促进骨骼肌细胞的分化和肌浆蛋白重链的积累,对体内骨骼肌纤维生长及逆转肌萎缩有一定作用。IL-15可促进体内血管形成,与肿瘤转移关系密切[1-3]。现已发现IL-15在机体天然免疫状态的维持中占有十分重要的地位,尤其是对NK细胞的促分化效应和功能调节引起学术界极大关注[2-4]。IL-15在美国已进入Ⅱ期临床试验,用于以肌萎缩症和系统性黏膜炎为主的多种疾病的治疗,但IL-15在组织中含量甚微,远不能满足科研与临床的需要。重组人IL-15(rhIL-15)的问世,推动了IL-15的基础与临床应用研究。为获得高纯度、高生物学活性的rhIL-15,我们在本室已构建的基因工程rhIL-15高效表达菌株的基础上[5-6],对影响工程菌生长和目的蛋白质表达的条件进行了优化,建立了稳定、高效的rhIL-15工程菌发酵工艺。1材料...  (本文共3页) 阅读全文>>

《生物技术通讯》2002年04期
生物技术通讯

重组人碱性成纤维细胞生长因子工程菌的发酵工艺研究

成纤维细胞生长因子(fibroblastgrowthfactor,FGF)是一组具有调控细胞增殖分化功能的蛋白分子犤1犦,而碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是人们研究的较多的FGF之一。我们自1994年开始着手该项目的调研、立项,随后从中国人外周血单个核细胞中克隆出人bFGF的基因片段,在大肠杆菌中获得稳定高效表达,并向中国专利局申报了生产及应用专利。bFGF是一种体内广泛存在,含量极微的生物活性物质,可以促进多种细胞的增殖分化,具有促进各种软组织损伤修复的作用,可用于创伤、烧伤、溃疡等的治疗,可以促进毛细血管的生长分化和侧支循环的建立,有利于改善局部组织的微循环。它还参与胃溃疡的愈合过程以及心肌梗塞的修复过程;还可以促进神经组织的再生,加速神经损伤的修复犤2犦,因而具有很大的药物开发价值。利用发酵工艺获得大量载有bFGF基因的工程菌,进而纯化出纯品bFGF是目前获得临床用bFGF的主要方式。本文即报道适于bFGF基因工程菌高...  (本文共3页) 阅读全文>>