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成人骨髓间充质干细胞对脐血CD34~+细胞的体外扩增作用

0 引言骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)作为骨髓造血微环境中的一种重要细胞成分 ,近年来成为干细胞研究领域的一大热点 .MSCs具有自我更新和多向分化潜能 ,在体外可被诱导分化为多种结缔组织及部分来源于外胚层的组织 ,形成骨、软骨、骨骼肌、腱、韧带、真皮、脂肪、骨髓基质和神经[1,2 ] .此外 ,还分泌多种生长因子支持骨髓造血 ,藉此MSCs可在体外作为滋养细胞层进行造血干 /祖细胞扩增 .自脐血 (umbilicalcordblood ,UCB)中发现造血干细胞 (hematopoieticstemcell,HSC)以来 ,脐血HSC移植用于治疗恶性及非恶性血液病日益广泛 ,但单份脐血所含的造血细胞不足以满足成人的移植所需 ,大量扩增后才能用于移植 .鉴于此 ,我们探讨了来自成人的MSCS 对脐血CD34+ 细胞的体外扩增作用 .1 材料和方法1.1 材料 正常成年男性献骨髓者 2例...  (本文共4页) 阅读全文>>

苏州大学
苏州大学

人胎盘源间充质干细胞对脐血单个核细胞体外生长的支持作用及体内移植促进造血重建的实验研究

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是目前倍受关注的一类具有多向分化潜能的成体干细胞。在不同的诱导条件下,MSCs可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。MSCs的主要来源为成人骨髓,但成人骨髓源MSCs的细胞数量及增殖分化潜能会随着年龄的增大而下降,且病毒感染率较高,此外供者MSCs的采集需行骨髓穿刺术,因而MSCs的临床应用存在很大的局限。近年的研究表明,从胎盘中可分离出MSCs,它们和骨髓MSCs一样,在合适的培养条件下具有多向分化能力。MSCs作为骨髓造血微环境中的重要组成成分,它通过分泌多种造血生长因子以及细胞与细胞间的直接接触等方式作用于造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs),因而在造血调控中发挥重要的作用。目前,MSCs已被用来体外支持HSCs扩增,体内联合HSCs移植促进造血重建。本研究在成功分离培养人胎盘源间充质干细胞(placenta-der...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

转THPO和FL膜外区基因骨髓间充质干细胞对脐血造血干/祖细胞的体外扩增研究

造血干细胞(HSCs)是指那些具有自我更新能力并能分化为所有血系细胞的干细胞。造血干细胞移植(HSCT)常被用来治疗血液系统疾病和作为血液系统恶性疾病高剂量化疗后的支持治疗。骨髓、外周血和脐带血是人类的主要造血干细胞源。由于脐带血中含有比骨髓和外周血更高比例的原始造血干细胞,目前认为脐带血是比骨髓和细胞因子动员的外周血更有前途的造血干细胞源。同时研究发现接受脐带血移植的病人的移植物抗宿主病(GVHD)的频率明显减小。单份脐带血中的造血干细胞对于重建儿童和体重较轻的成人的造血系统是足够的,但是,对于体重较大的成年人是不够的。为了解决这个问题,必须对脐带血造血干细胞进行体外扩增。本研究利用基因工程技术发展了一种独特的转双基因骨髓间充质干细胞,并利用该转基因骨髓间充质干细胞联合细胞因子对脐带血造血干细胞进行体外扩增。骨髓间充质干细胞(MSCs)是来源于中胚层的具有很强的自我更新和多向分化能力的干细胞。本研究成功地分离纯化了骨髓间充质干...  (本文共156页) 本文目录 | 阅读全文>>

吉林大学
吉林大学

人胎盘间充质干细胞的分离鉴定及其对脐血造血干/祖细胞体外扩增的支持作用

除造血干细胞外,骨髓中还存在极少量的间充质干细胞(MSC),在体外特定的培养条件下可以大量扩增,并保持其向骨、软骨、脂肪、腱、肌肉、神经及基质细胞等组织的多向分化能力。MSC 的自我更新能力和多向分化能力,使其在临床上具有巨大的治疗潜力。MSC 易于外源基因的转染和表达,MSC 携带的外源基因表达具有组织特异性,可定位于缺陷组织,如对某种基因突变所致遗传病,可分离自体 MSC,体外进行改造,敲除突变基因,导入正常基因,再回输体内。此外,MSC 通过分泌可溶性分子如 TGF-β、HGF 及细胞间接触抑制细胞或有丝分裂原引起的 T 细胞增殖,且这种抑制效果随着 MSC 参入量的增多而增强。但MSC 并不诱导 T 细胞的凋亡及无能,去除 MSC 后 T 细胞经再次刺激还可增殖。MSC 作为骨髓基质细胞的前体细胞,除可形成骨髓微环境外,还同基质细胞一样,表达多种造血相关因子。体外以 MSC 为滋养层短期培养可促进 HSPC 扩增,长期培...  (本文共105页) 本文目录 | 阅读全文>>

广州医学院
广州医学院

脐血间充质干细胞联合细胞因子支持人脐血单个核细胞体外扩增的探讨

脐血作为一种造血干细胞资源越来越受到广泛重视,但由于单份脐血中造血干细胞数量不足,不能满足大多数成人和高体重儿童造血干细胞移植重建造血及免疫功能的需要,故限制了其广泛应用。体外扩增虽然可以增加造血细胞数量,但可能导致造血干细胞分化并降低其归巢和长期造血重建能力,因此提高脐血造血干细胞体外扩增质量仍是脐血移植中亟待解决的问题。间充质干细胞作为造血微环境主要细胞成分基质细胞的前体细胞,可以分泌与造血干细胞生长发育相关的黏附分子、细胞外基质和多种细胞因子,为造血干细胞体外扩增提供适宜的微环境。随着培养技术的提高,脐血间充质干细胞有着与其他来源的间充质干细胞所无法比拟的优势。本实验研究脐血间充质干细胞对人脐血单个核细胞体外扩增的支持作用。目的探讨脐血来源间充质干细胞(UCB-MSCs)体外分离、培养和初步鉴定的方法,以及UCB-MSCs联合外源性细胞因子对人脐血单个核细胞(UCB-MNCs)体外扩增的支持作用和最佳收获时间,为配合造血干...  (本文共63页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

基质细胞衍生因子-1和血小板第4因子对脐带血干/祖细胞体外扩增及归巢相关功能的影响研究

造血干细胞移植是治疗白血病和淋巴瘤等恶性肿瘤、代谢性疾病、自身免疫性疾病及先天免疫缺陷等严重危害人类健康疾病的最有效治疗方法之一。脐带血(UCB)是继骨髓和动员外周血之后的另一种重要造血干细胞来源,它的优点是来源充足、具有很高的增殖和扩增潜能、采集不影响供者、受CMV和Epstein-Barr病毒污染机会小、移植后急慢性GVHD发生率低于成年供者的骨髓移植、可以建立脐血库随时提供移植所需要的HLA相合的干细胞。尽管UCB具有诸多优点,但是由于一份脐血所含的细胞数有限,这大大限制了其在临床的广泛应用。体外扩增是解决UCB这一缺陷的重要方法,因而优化UCB造血干/祖细胞(HSPCs)的体外扩增方案极为迫切。体外扩增的HSPCs是否具有临床应用价值取决于两个方面:一、细胞保持增殖和自我更新的能力;二、细胞保持归巢骨髓造血微环境的能力。许多扩增方案研究的重点是保持UCB HSPCs的增殖和自我更新能力,而进一步动态观察UCB HSPCs...  (本文共91页) 本文目录 | 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

脐带血干/祖细胞的体外扩增及扩增后干/祖细胞生物学特性的研究

干细胞(HSC)移植是治疗白血病和淋巴瘤等恶性肿瘤、代谢性和严重自身免疫性疾病及先天性免疫缺陷等严重危害人类健康疾病的最有效方法之一。脐带血(UCB)是继骨髓(BM)和动员外周血(MPB)之后又一HSC的来源,我们国家由于计划生育的实行和经济文化等原因,短时间内组织大规模无关供者骨髓库比较困难,因此我国UCB在HSC移植中具有尤为广泛的发展前景。UCB具有很高的增殖和扩增潜能等诸多优点,但是单份标本所含的细胞数有限,这大大限制了其在临床的广泛应用。体外扩增是解决UCB这一缺陷的重要方法,因而优化UCB造血干/祖细胞(HSPCs)的体外扩增方案极为迫切。体外扩增的HSPCs是否具有临床应用价值取决于两个方面:其一,细胞保持增殖和自我更新的能力;其二,细胞保持向BM微环境归巢功能的完整。许多扩增方案研究的重点是保持UCB原始细胞的增殖和自我更新能力,而进一步动态观察UCB HSPC在扩增过程中归巢相关功能的研究则鲜有报道。本实验室建...  (本文共122页) 本文目录 | 阅读全文>>