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小鼠卵慢速和快速降温及玻璃化冻存的比较研究

小鼠卵慢速和快速降温及玻璃化冻存的比较研究季维智,陈建春,商恩缘,杨上川,门红升,邹如金(中国科学院昆明动物研究所,昆明细胞库昆明650223)摘要本文用4种冷冻模式:慢速降温(SL),超快速降温(Q1)和防冻剂组成不同的玻璃化法(R-FVM和MVM)对昆明小鼠卵进行冷冻保存的比较研究,并用体外受精技术检测冷冻复苏卵的受精能力。SL和R-FVM的存活率分别为55.1±1.2和65.9±7.9,显著高于Q1(24.2±7.3)和MVM(4.5±2.4)其受精率分别为72.8±1.8和73.9±0.4显著高于Q1(58.6±11.2)和MVM(41.5±8.5),而与对照组(77.5±3.9)相似。结果表明:1)慢速降温程序(SL)和同时含有渗透性和非渗透性防冻剂的玻璃化法(F—RVM)较适宜昆明小鼠卵的冻存;2)同时考虑冻存过程中的冰晶损伤和渗透压损伤是获得较好冻存结果的关键。关键词昆明小鼠,卵母细胞,冷冻保存自人精子细胞冷冻保存...  (本文共7页) 阅读全文>>

《生理学报》2004年03期
生理学报

整合素介导小鼠卵内钙离子增加

在受精所致的卵激活事件中,卵内游离Ca2+升高既是卵激活的早期事件,同时ca2+又作为一种信号因子进一步诱发卵内其它功能活动{’}。整合素跨膜信号传递受体与其配体结合可介导阵az+]i的变化在许多细胞都得到了证明12]。哺乳动物卵膜存在多种整合素亚基。在小鼠等哺乳动物,a6、p,作为精子受体在精卵结合、融合中发挥重要作用I3]。哺乳动物精子膜上存在整合素配体受精素(fertilin)、纤连蛋白(fibroneetin,Fn)及玻连蛋白(vetrineetin,Vn)等,这些配体的活性片段都包含特定氨基酸精一甘一天冬氨酸(RGD)序列。连接了RGD肤的免疫珠可结合到卵的表面;RGD肤由于其竞争作用可抑制精、卵间的结合。然而,用RGD月太作用于卵,研究整合素介导卵内钙离子增加的作用,最近才在爪蟾及牛卵得到证明I4,5,,整合素介导卵C盯‘增加是否具有普遍性及其机制还有待研究。本实验采用RGD肤、Fn及抗整合素a6、p,的单克隆抗体作...  (本文共6页) 阅读全文>>

《中国科学(C辑:生命科学)》2004年03期
中国科学(C辑:生命科学)

整合素介导小鼠卵内骨架蛋白的重组

整合素作为跨膜信号转导受体通过与配体结合,可引发一系列细胞内的信号传递事件.在整合素介导的跨膜信号转导过程中,细胞内骨架蛋白的作用在许多细胞已经得到证实[1~4].Clark等人[5]根据众多的研究结果,提出了整合素介导跨膜信号转导的功能模式,即整合素通过其膜外段与相应配体结合,膜内段则与细胞内骨架蛋白发生联系.当整合素的膜外段结合了相应配体后,膜内段也结合到包括a-actinin,talin,tensin,viculin,paxillin等在内的骨架蛋白复合物,并通过这些骨架蛋白与肌动蛋白连接.这些蛋白质分子的复合体作为进一步联系其他信号蛋白的网络参与信号传递而调节细胞的功能[5,6].许多动物卵膜存在特异的整合素亚型,众多的实验已经证明了卵膜的整合素参与精、卵间的结合、融合.然而卵膜的整合素通过与其配体结合是否也导致卵内骨架蛋白的重组,从而参与卵的激活尚未得到充分的研究.本研究用整合素配体的活性片段RGD肽作用于小鼠卵,用抗...  (本文共5页) 阅读全文>>

《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2017年02期
浙江大学学报(农业与生命科学版)

外源性亚精胺对鼠卵巢生殖激素受体基因表达的影响

亚精胺是广泛存在于动物、植物和微生物体内的一种多胺,可通过介导雄性动物精子发生,以及雌性动物卵泡发育、卵子发生和排卵活动,进而参与调控动物的繁殖过程[1-2]。多胺能通过与多种生殖激素建立复杂的反馈联系,进而参与调控动物繁殖[3]。多胺在维持卵巢类固醇激素水平和生成过程中具有重要作用[4]。雄性动物体内的多胺合成受到雄激素的调节[5]。FASHE等[6]研究发现,多胺合成受阻时,卵巢性激素含量显著降低。赵越超[7]研究发现,性激素可通过其受体途径影响鼠子宫内多胺代谢。大量研究证实,雄激素在治疗男性不育症上具有重要作用,亚精胺在不育男性精浆中的含量明显比正常男性低[8-10],推测亚精胺可能通过作用于雄激素及其受体来参与调控雄性动物的繁殖功能。而在雌性动物中,亚精胺是否与雄激素受体(androgenreceptor,AR)存在直接或间接的作用还未有研究报道。促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FS...  (本文共6页) 阅读全文>>

《生殖与避孕》2011年12期
生殖与避孕

小鼠卵子胞膜在显微穿刺中存活的膜特性因素研究

卵子显微注射技术在生物医学研究中已应用广泛,如卵胞浆内单精子显微注射(ICSI),核移植和冻融精子卵胞浆内显微注射等[1]。小鼠的遗传信息资源丰富,其卵子和胚胎能高效简便获得,且易于在体外培养,因此小鼠卵子是一种理想的研究材料。但是,早期科学研究表明[2-4],小鼠卵子在被显微注射时极易崩解,因此常规进行小鼠ICSI是极端困难的。直到1995年Kimura等建立小鼠卵子Piezo-ICSI技术后[5],小鼠卵存活率得以显著提高。此后,Wakayama等将该技术成功应用于小鼠核移植及其干细胞的建系[6,7],并报道经Piezo-ICSI核移植后的小鼠卵存活率高达94%~100%、成囊率达38%~69%[8]。因此,Piezo-ICSI技术的应用促进了小鼠卵子显微注射相关研究的发展。尽管如此,多个报道称该技术的应用效果不稳定。2000年Pennisi和Zhou等2个研究小组利用Piezo技术进行小鼠卵核移植[9,10],只能达到39...  (本文共6页) 阅读全文>>

《生殖与避孕》2004年03期
生殖与避孕

整合素α_5、α_6、β_1在人、小鼠卵的表达及其与卵成熟的关系

哺乳动物完成受精过程必须首先依赖于精、卵膜上具互补关系的特异分子间的相互作用而发生结合和融合[1,2]。在已经发现的候选分子中,整合素及其配体的作用越来越受到重视[3~5]。已有的研究表明,在一些动物及人的精子有特定的整合素配体如纤连蛋白(Fn)、玻连蛋白(Vn)及受精素(fertilin)的表达,并且这些分子的表达与精子的功能状态有关[6~11]。许多动物包括小鼠、金黄地鼠、猪、牛以及人卵也相应地表达多种整合素亚型。尽管不同种族动物卵表达整合素的亚型不同,但许多动物卵都有α5、α6、β1亚基的表达[5,12]。然而,在卵的不同成熟阶段,这些整合素亚基的表达有无差异,不同动物卵整合素亚基的表达是否具有相似性还缺乏充分的研究。本研究拟用小鼠及人卵进行免疫组化染色,共聚焦显微镜观察小鼠及人生发泡(geminal vescle,GV)期及成熟期卵整合素亚基α5、α6、β1的表达,为整合素参与受精及卵的激活提供间接的证据,并为进一步研究...  (本文共6页) 阅读全文>>