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腺病毒介导的HSV-TK基因系统联合羟基喜树碱对人膀胱癌细胞的体外杀伤作用

随着自杀基因系统对膀胱癌治疗研究的逐步深入,大家逐渐认识到自杀基因系统是一种发展前景良好的治疗方法,但是也存在着局限性。为了弥补基因治疗的不足,本实验对TK基因、HCPT、TK基因联合HCPT对人膀胱癌T-24的体外杀伤作用进行比较,为自杀基因联合化疗药物治疗膀胱癌提供一定的实验依据。1材料与方法1.1材料人膀胱癌细胞株T-24细胞购自上海中国科学院细胞库,HEK293细胞、含有TK、GFP基因的复制缺陷腺病毒均由本科保存。RPMI1640培养基、DMEM培养液购自Gibco公司,GCV、5-FC购自Sigma公司,羟基喜树碱针剂由湖北黄石飞云制药有限公司出品。MTT购自美国MBCHEM公司,凯基细胞凋亡周期检测试剂盒(Cat:KGA-511,512)购自南京凯基生物科技发展有限公司,胎牛血清为杭州四季清公司产品。根据GenbankS56903和V00470TK基因DNA序列,由奥科公司分别设计并合成TK上下游引物,TK:上游:...  (本文共4页) 阅读全文>>

《生命科学研究》2005年03期
生命科学研究

高强度聚焦超声对人膀胱癌细胞的生长抑制作用及机理研究

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,以美国为例,2002年有56500例新诊病例犤1犦.当前对膀胱癌的治疗仍以手术为主,术后辅以灌注化疗等其它方法犤2犦.高强度聚焦超声(high intensity fo-cused ultrasound,H IFU)是一种无创性局部治疗肿瘤的新型超声加热技术,被称为无创性超声切除(noninvasive ultrasound ablation,N U A)或聚焦超声外科(focused ultrasound surgery,FU S),其在癌症治疗方面不仅有确切的疗效,而且还有其它治疗手段无法比拟的独特优势,是当前肿瘤治疗领域的研究热点之一犤3,4犦.引起细胞凋亡的因素很多,如紫外线(U V)、γ射线、治疗性超声波(U LS)等,但尚未见H IFU诱导癌细胞凋亡的研究报道.不同的因素诱导细胞凋亡的信号传导途径不同.有研究认为,治疗性超声波不依赖P53介导,通过对细胞膜和D N A的损伤作用而诱导...  (本文共5页) 阅读全文>>

《浙江大学学报(自然科学版)》1989年06期
浙江大学学报(自然科学版)

鞭枝藻与其突变体提取液对人膀胱癌细胞生长的影响

近几年来,一些学者发现在某些单细胞微生物中具有非常相似于高等脊椎动物多肽激素的物质,这引起了人们的极大兴趣。例如在大肠杆菌(一Eschenchi—a c—ol!)中发现胰岛素(Le Roith,D.等,1981年)【。】,存某些细菌中含有TSH(甲状腺刺激激素)等。胰岛素是几乎所有癌细胞体外培养所必须的…种生长因子(Growth factor),其它激素对不同癌细胞各具有特异的刺激生长作用【‘】。这类物质是否可能存在于光合自养的低等藻类中呢?我们通过研究某些藻类提取液对癌细胞体外培养生长的影响试图探索这个问题。本文对层珲鞭枝藻(M—astigocladus laminosus)的野生型与突变体进行了初步的有关研究。我们之所以对这种藻类感到兴趣,是由于:1)它是蓝藻,微生物学家称之为蓝细菌(Bluebacteria)~与细菌比较接近。2)它是嗜温温泉藻类,它的最适代谢温度相近于人体和其它脊椎动物的体内温度。第6期 钱凯先等:鞭枝藻...  (本文共7页) 阅读全文>>

中国协和医科大学
中国协和医科大学

RB_1抑癌基因对人膀胱癌细胞抑癌作用的体外研究

RB_1是从视网膜母细胞瘤中发现并克隆出的第一个人类肿瘤抑制基因。近年来的研究发现,用RB_1转染人类视网膜母细胞瘤,骨肉瘤、肺癌、前列腺癌等细胞系,这些瘤细胞的癌性特征,如停泊非依赖性生长及致瘤性等均受到不同程度的抑制甚至消失。使该基因展示了一种肿瘤治疗的前景。膀胱癌是人类泌尿生殖系最为常见的恶性肿瘤,近年来开展的肿瘤基因治疗的研究,为治疗膀胱癌开辟了新的途径。本实验旨在研究RB_1基因对膀胱癌的抑癌效果,探索其在膀胱癌基因治疗中的应用。将RB_1基因组装于以CMV为目的基因起动子、neo基因为筛选标志的PCMU-neo DNA质粒载体。采用电穿孔方法,将重组后的质粒DNA PCMV-neo-RB_1,导入RB基因功能失活的膀胱癌细胞系HTB9-5637,用G418筛选转化克隆。经过对转化细胞的研究,发现其生长速率减低,停泊非依赖性生长特性消失,接种裸鼠皮下无致瘤性。流式细胞计检测其S期细胞明显减少。经Northern印迹分析...  (本文共77页) 本文目录 | 阅读全文>>

浙江大学
浙江大学

RGD肽抗纤维连接蛋白介导人膀胱癌细胞化疗抵抗作用及其机制的研究

膀胱移行细胞癌(Bladder transitional cell carcinoma,BTCC)是我国泌尿系统最常见的恶性肿瘤,严重危害人民的身体健康。近年来,手术方法不断改进,灌注药物日益更新,但膀胱肿瘤术后5年复发率仍高达50~70%。提高化疗药物的敏感性是延长BTCC病人无瘤生存时间和改善生存质量的途径。我们的前期体外实验证实纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)介导了BTCC的多药抵抗(Multidrug resistance,MDR),是导致膀胱癌化疗效果下降的原因之一。本研究分二部分:第一部分,探讨外源性精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽(Arg-Gly-Asp peptide,RGD肽)是否可在体外减少甚至逆转FN介导的人膀胱癌5637细胞化疗抵抗;第二部分,探讨人BTCC肿瘤细胞化疗抵抗过程中,FN和RGD肽对细胞凋亡相关蛋白表达的影响。本研究旨在为FN拮抗剂RGD肽应用于BTCC的治疗提供理论及实验依据,并了...  (本文共86页) 本文目录 | 阅读全文>>

广西医科大学
广西医科大学

二氯乙酸对人膀胱癌细胞生长及相关功能的影响

目的:研究二氯乙酸(DCA)对人膀胱癌T24细胞株的增殖、侵袭迁移能力的影响及其可能的机制,为DCA的抗肿瘤治疗提供理论依据。方法:以人膀胱癌T24细胞株为本实验的研究对象,在合适的条件下进行培养孵育。取处于对数生长期的人膀胱癌T24细胞株的培养基中加入含不同浓度的DCA,采用MTT法检测DCA对人膀胱癌T24细胞增殖能力的影响。采用Giemsa染色检测膀胱癌T24细胞克隆形成;细胞划痕和Transwell实验检测膀胱癌T24细胞的迁移侵袭能力的变化。采用Hoechst33258荧光染色观察人膀胱癌T24细胞株并计数凋亡细胞。采用Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、E-cadherin、Slug、Snail、vimentin及N-cadherin的蛋白表达水平。结果:MTT结果发现人膀胱癌T24细胞株在不同浓度的DCA(0 mM、1.25 mM、2.5 mM、5 mM、10 mM、20 mM、4...  (本文共71页) 本文目录 | 阅读全文>>