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非同位素标记DNA探针初步研究

随着DNA重组技术的发展,核酸分子杂交 成为当今分子生物学研究中应用最广泛的一项技术。目前在我们实际办案中,核酸分子杂交多 采用高比活放射性同位素“ZP标记探针及放射 自显影检测方法,这是一项灵敏度高,效果好 的分析手段。但由于32p存在半衰期短、制备的探针无法长期保存、价格昂贵、有碍工作人 员的健康及放射性废物难以处理等弊端,使DNA检验技术的推广受到一定限制,因此对非放射性标记的探针和检测系统的研究逐渐开展起来。1981年美国耶鲁大学Word小组首先合成了生物素化的脱氧啼咤核昔三磷酸,缺口平移反应完成生物素标记探针〔’〕;1 988年澳大利亚Aeiaside大学合成了光生物素,不用酶可直接标记探针,受到人们重视〔2〕;同年西德Boeh-:ing。r Mannh。im公司推出了一种以地高辛为标记物的非放射性标记试剂盒。 我们采用英国Amersham公司生产的非放射性标记及检测试剂盒,将辣根过氧化物酶 (HRP)标记在以一珠蛋白...  (本文共4页) 阅读全文>>

《Science in China,Ser.B》1990年06期
Science in China,Ser.B

ENHANCEMENT OF THE SALT EFFECT ON THE CONFORMATION OF M. L. DNA MOLECULES BY METHYLATION

1 .IN丁获。Due叭。N Gene expression can be regulated by many means.The tranoeriptional regulationof genes 15 dependent on the interaetion between RNA polymerase,topoisomerase andDNA template.Tlie aetivity of RNA Polymerase and topoisomerase 15 related ro theconeentration of salt.The reasoni、that the conformationo王RNA polymerase,toPo-isomerase and DNA template are ehanged by salt.He et al.[‘1 have studied the ejfeetof salt...  (本文共7页) 阅读全文>>

《Nuclear Science and Techniques》1990年04期
Nuclear Science and Techniques

A PIXE METHOD TO STUDY BIOLOGY AT THE DNA LEVEL

.IN .TRODUCI飞ON Partiele IndueedX一ray Emission(PIXE)has been widely used in thestudy ofbiology and medieine,espeeially to analyse traee elements of hair,tissues and eellsl,,,].The reeently develoPed miero一PIXE teehnique has been aPPlied to sean a eell to getthe elemental distributions of the eell with the beam sPot of价1拜m or evensmallerl手匀.But there are few papers on the applieation of PlxE in the study of bio-logy d...  (本文共5页) 阅读全文>>

《癌变.畸变.突变》1991年S1期
癌变.畸变.突变

THE MUTAGENICITY OF DRUGS AND THEIR EFFECT ON DNA CIRCULAR DICHROISM

C i rcu I ar d i chr-o i sm(CD J i s a r-e I i ab I e,sens i t i ve arld conven i ent Methods for- ana I ys i 13g the ef fect0f dru D 。 wh i c t ca ated i nt t he.qs Oil NA h i n er 1 0DNA mo I ecu I e or formed DNA comp l ex a rld COU I dcha rlae the confor'rrlat ior'i of DNA and a I te r-theCD spectra. ^^utaqeni ci ty 0f 19 drU9s weretested. wh i I e t he i广 ef fectS on CD spect r-a ofDNA were aI s0 rrleasuI'-ed.Th...  (本文共1页) 阅读全文>>

《老年学杂志》1992年04期
老年学杂志

DNA修复功能的研究近况

脱氧核糖核酸(DNA)是生命遗传的物质基础,它与组蛋白和非组蛋白共同组成细胞核内染色质的主要成份。自然环境中的一些有害因素(如核辐射、某些化学物质等)能造成DNA损伤,导致人体衰老,产生各种疾病,如放射病、遗传病及肿瘤等,因此,研究DNA的损伤与修复,具有十分重要的理论和实践意义。本文简要介绍近年来国内DNA损伤与修复能力的研究概况,并联系衰老进行讨论。DNA损伤的形式 所谓DNA损伤包括任何一种不正常的DNA分子结构n}。细胞内环境如温度或pH等变化会使DNA受损伤,而细胞外环境如uV,X,Y线、中子及a,p带电粒子的照射使DNA更易遭受严重损伤ch现将DNA损伤的基形式简要概括如下: 一、碱基损伤 (一)心陡二聚体的形成由250^-310nm紫外线照射所致。二聚体形成的后果就是碱基失突变,阻断DN人的复制,这也是紫外线之所以能杀菌和致突变的原因‘,:’) (二)碱基的烷基化单功能烷化剂会使DNA碱烷化...  (本文共3页) 阅读全文>>

《河南肿瘤学杂志》1992年04期
河南肿瘤学杂志

Z-DNA的研究进展

基因活性的调控是当前生命科学的前沿课题之一。不少分子生物学家和物理化学家试图从DNA的构象转换来阐明基因开启与关闭的原因。发现DNA有A、B、c、x、z等不同构象。其中,对B和z两种构象及其相互转换研究得最多。B一DNA即watson一crick模型,通常描述的右旋双螺旋构象,人们最为熟悉,而z一DNA是1 979年由Rieh发现.研究进展很快。兹就z-DNA的结构特点、生成条件、检测方法及其生物学功能综述如下。 一z-DNA的结构特点 Lz一DNA的线性结构特点‘’一‘’嗓吟与啥吮交替序列是z一DNA形成的基本条件。最有利于z一DNA形成的序列是d(GC)。,(n)3)。其次是d(GT)。·d(CA)。序列。最不利于z一DNA形成的序列是d(AT)。.这可能与A一T碱基对中氨基缺乏,不能在螺旋沟内与水分子形成氢键,而使附近水分子呈无序状态有关。至今尚未发现d(AT)。的z型构象,而其在一定条件下呈x型DNA构象。真核细胞中的d...  (本文共3页) 阅读全文>>