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甲壳胺复合物固定化酶的催化反应机理研究

甲壳胺复合物固定化酶的催化反应机理研究张长德,王玲治,江英彦/(北京石油化工学院,北京,102600)(中国科学院化学研究所,北京,100080)摘要本文以天然高分子甲壳胺与羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸的两种氢键复合物为载体固定葡萄糖氧化酶和纤维素酶。对其酶促反应的米氏常数K_m进行了分析、提出了氢键复合物固定化酶的催化反应机制,还通过红外光谱和透射电镜研究了这两种复合物固定化酶的结构。关键词甲壳胺;羧甲基纤维素钠;聚丙烯酸氢键复合物;固定化酶ThemechanismofCatalyticReactionofImmobilizedEnzymebyChitosanComplex¥ZhangChangde;WangLingzhi;JiangYingyan(BeijingPetrochemicalCollege,Beijing,102600,China)(InstituteofChemistry,Academia,Sinica,Beiji...  (本文共4页) 阅读全文>>

《离子交换与吸附》1940年50期
离子交换与吸附

固定化酶技术及其进展

固定化酶技术及其进展卓仁禧,罗毅,陶国良(武汉大学化学系,武汉430072)摘要本文综述了固定化酶技术的研究现状。酶是一类生物催化剂,能够催化构成细胞代谢的所有反应,生物体内形形色色的化学反应均是在酶催化下进行的.同一般催化剂相比,酶有以下几个特点:①催化效率高;②专一性强;③反应条件温和;④酶的活性是可调节控制的.虽然酶在生物体内能够催化许多化学反应,但用作工业催化剂仍存在缺陷.因为酶是由蛋白质组成,其高级结构对所处的环境十分敏感.一般情况下,对热,强酸,强碱,有机溶剂等均不够稳定,在反应中容易失活.而且酶中常带有杂蛋白及有色物质,造成产物分离提纯困难,限制了酶促反应的广泛应用.本世纪六十年代发展起来的酶固定化技术既克服了上述不足,又在一定程度上保持了酶特有的催化活性,从而成为生物技术中最为活跃的研究领域之一”-”.经过三十多年的研究和发展.固定化酶技术已取得了长足的进步,先后开发了多种固定化方法和性能多样的载体材料,取得了丰...  (本文共6页) 阅读全文>>

《国外医药.合成药.生化药.制剂分册》1994年04期
国外医药.合成药.生化药.制剂分册

固定化酶──回顾与展望

自然状态的酶被用于食品工业已有几百年历史,且近来在医药工业及化学工业方面也有应用。通过各种众所周知的实验手段,如传统的X一射线及较新的核磁共振(NMR),它们的结构及作用方式正渐渐地被阐明。用现代遗传工程方法已经可以大量生产酶,且对它们的初级结构进行修饰,从而改变它们的某些物理化学和生物学性质,使酶更适合于工业生产与广泛地应用。人们对固定化酶的应用越来越感兴趣。1971年在美国新罕布什尔州Henniker召开的首届酶工程会议上将“固定化酶”这个术语定义为:被局限在某表面的特定区域上的、并且保留了它们的催化活力,可以反复、连续使用的酶。”生物催化剂固定化的主要优点有:容易进行反应及控制,产物容易回收纯化以及反应器的选择范围较广。但也有以下缺点如:失活、单位体积活力降低、反应底物和产物的扩散受到限制以及生产费用增加。首例工业化应用固定化酶是1967年由二mbata及其同事在日本TanakeSe玫aku公司实现的,他们将固定化米曲霉(...  (本文共4页) 阅读全文>>

《食品工业》2018年05期
食品工业

共固定化酶的制备及其在奶香基料制备中的应用

共固定化酶是将两种或两种以上的酶固定于同一载体内形成共固定化系统的一种技术[1]。与普通的固定化酶相比,共固定化酶可充分发挥不同酶的特点,同时将其催化特性结合起来,充分体现协同作用,提《食品工业》2018年第39卷第5期高催化效率。同时缩短反应时间和减少反应步骤,实现连续化生产,能够更好的控制产品品质[2-3]。将共固定化酶技术应用于奶香基料的制备,不仅能简化反应工艺,还能将价格昂贵的酶重复利用,以降低生产成本。1 材料与方法1.1 材料与试剂多美鲜无盐黄油,市售;乳清粉,广州市日锋畜牧有限公司;脂肪酶A12-K、脂肪酶MER、蛋白酶MSD,阿玛诺天野酶制剂商贸(上海)有限公司;AB-8、X-5大孔树脂,沧州宝恩吸附材料科技有限公司。海藻酸钠、戊二醛、壳聚糖、乙醚、无水乙醇、KOH、CaCl2、邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示剂等:市售,分析纯。1.2 试验方法1.2.1 大孔树脂负载壳聚糖膜交联法称取0.1 g壳聚糖溶于100 mL质...  (本文共6页) 阅读全文>>

《现代化工》2016年12期
现代化工

吸附-交联固定化酶的制备及表征

脂肪酶(lipase,EC 3.1.1.3)是一类特殊的酰基水解酶,可以在油/水界面上催化各种有机反应,并且反应条件温和,具有高度的特异性,使得其在生物技术领域非常受欢迎,如可以用来合成催化酯化、水解、醇解等反应,生产多类化学品如功能性油脂、表面活性剂、食品添加剂等。但是游离酶在使用中对环境要求十分苛刻,容易失活,稳定性差,难以重复利用,同时昂贵的价格也限制了其在酶催化领域的应用[1-3]。通过将脂肪酶进行固定化可以有效改善这些不足。传统的固定化方法包括吸附法、包埋法、交联法和共价结合法,每种方法都有其各自的优点和缺陷[4]。吸附法反应条件温和,能够最大程度地保留酶的活性,但是在实际应用中,吸附法固定化的脂肪酶由于酶与载体之间的作用力弱,随着反应的进行,酶分子很容易从载体上脱落,使固定化酶的稳定性较差[5-7]。而交联法是通过在酶分子间形成共价键来完成固定化,因此交联法的结合力强,稳定性高,可以多次重复使用[8-10]。交联法中...  (本文共5页) 阅读全文>>

《过程工程学报》2016年06期
过程工程学报

尺寸均一温敏固定化酶的制备及其在蛋白质酶解中的应用

蛋白质组学是一门后基因组学时代兴起的学科,广泛用于癌症的识别与治疗、疾病的预测等[1,2].蛋白质鉴定是蛋白质组学研究中极具挑战性的关键环节[3].目前,常用的鉴定方法是基于质谱的鸟枪法(Shotgun),将目标蛋白质进行酶解得到肽段混合物,采用液相色谱-质谱联用技术对多肽混合物进行分离和分析,将所得数据与理论蛋白质数据库进行匹配,鉴定蛋白质[4],其中酶解过程是基础而关键的步骤.传统的酶解过程基于溶液酶解法[5],存在酶解时间较长、酶自身易酶解、无法回收利用等问题.近年来,固定化酶以其较好的稳定性和重复使用性等特点而得到快速发展,并用于蛋白质酶解过程中.多种材料可作为固定化酶载体,如纤维素、多糖类、纳米硅、玻璃珠、聚苯乙烯等[6].但由于亲水性载体难富集待测样品,而疏水性载体易对蛋白质和肽段产生非特异性吸附,造成检测结果不理想[7].智能响应型载体材料的亲疏水性可根据需要调节,在实际应用中十分有优势.温度是蛋白质酶解过程中最方...  (本文共7页) 阅读全文>>