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胰岛素原的基础和临床研究

胰岛素原的基础和临床研究上海市内分泌研究所(200025)骆天红综述陈家伦审校摘要:本文综述了人胰岛素原的基本特性、测定方法及其与NIDDM、IDDM、胰岛素瘤、家族性高胰岛素原血症以及心血管疾病的关系。关键词:胰岛素原(hPI);免疫反应性胰岛素(IRI)Steiner等人于1967年发现了胰岛素原(Proinsulin,PI)其分子量约为9000,含有86个氨基酸,是一单链多肽,包含胰岛素的A链、B链以及含有35个氨基酸的连接肽。人、猪、牛的胰岛素原氨基酸顺序基本相同,只是C肽部分有所不同个由于不同种系的胰岛素相差很小,因而常规的抗胰岛素抗体能和不同种系的胰岛素及胰岛素原起交叉反应,同样,抗胰岛素原抗体也能和不同种系的胰岛素及胰岛素原起交叉反应。进入80年代以后,随着单克隆抗体技术的发展,已制备出胰岛素原的特异性抗体,它能特异地识别胰岛素原而不和胰岛素或C肽起反应。1胰岛素的基因结构及其表达与转录后加工人类胰岛素基因位于11...  (本文共4页) 阅读全文>>

南京医科大学
南京医科大学

胰岛素抵抗与心血管危险因素的临床流行病学研究

血脂紊乱、高血压、高胰岛素血症、肥胖特别是中心性肥胖、葡萄糖耐量异常等心血管危险因素经常在个体中聚集,被称为胰岛素抵抗综合征,胰岛素抵抗被认为是上述危险因素聚集的共同病理生理基础。但是,传统的检测外周循环中胰岛素的放射免疫方法是建立在多克隆抗体的基础上,特异性较差,与血清的胰岛素原有交叉反应,被称为免疫反应性胰岛素。部分研究表明,外周循环中胰岛素原水平与心血管危险因素的关联比真胰岛素强。因此,以真胰岛素为基础数值的胰岛素抵抗指数、胰岛素原水平与心血管危险因素的关系值得进一步研究。第一部分:单克隆抗体酶联免疫方法检测真胰岛素、胰岛素原方法的建立本研究分别采用双单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验方法来检测外周循环中的真胰岛素、胰岛素原的含量,在方法学中引入了生物素-亲和素放大系统,该方法具有较高的灵敏性与较好的特异性。1、单克隆抗体酶联免疫方法检测真胰岛素方法的建立该方法是建立在酶免疫分析方法的基础上的,采用了两种与胰岛素特异结合的小鼠...  (本文共157页) 本文目录 | 阅读全文>>

北京中医药大学
北京中医药大学

开郁清热方改善2型糖尿病β细胞功能的临床和实验研究

胰岛素抵抗、β细胞功能不全是2型糖尿病发病(T2DM)的根本原因,胰岛素抵抗只有在β细胞功能不全的基础上才引起发病。近年来对β细胞分泌功能的研究越来越受到重视。胰岛素生成、胰岛素分泌和2型糖尿病的核心问题:β细胞。β细胞的数量和质量决定了β细胞的功能状况,而β细胞的功能既体现在胰岛素分泌的时相变化上,又表现在所分泌的胰岛素的数量和质量上。在T2DM的发生过程中,由于胰岛β细胞凋亡增加,使其功能降低,可能是导致糖尿病发病的机制之一。导师多年从事糖尿病的临床与科研工作,特别关注现代糖尿病的研究进展,应用开郁清热法治疗肥胖T2DM是导师治疗2型糖尿病的重要学术思想之一。开郁清热方是在开郁清热法的指导下,针对肥胖T2DM的主要证型肝(胆)胃郁热证化裁大柴胡汤加减而来,前期研究初步证实此方可以改善2型糖尿病β细胞功能,本研究为阐明其作用机理做深入研究,从临床观察和动物实验两方面研究开郁清热方对T2DM胰岛素分泌的时相、分泌胰岛素的数量和质...  (本文共132页) 本文目录 | 阅读全文>>

《南通大学学报(医学版)》2005年01期
南通大学学报(医学版)

人胰岛素原C肽基因高效表达载体的构建

糖尿病是一种常见的代谢内分泌疾病。随着患病人数的迅速增加 ,糖尿病已成为严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题 ,影响糖尿病患者生命和生活质量的主要危险因素是糖尿病慢性并发症。胰岛细胞分泌多种激素 ,除胰岛素以外其他激素对于预防糖尿病急、慢性并发症的发生也起着至关重要的作用。近年来研究表明 ,C肽是防止糖尿病并发症的一种关键物质 ,可有效改善和延缓 1型糖尿病的慢性并发症[1] 。1 材料与方法1 .1 材料 1 .1 .1 质粒和细菌 克隆载体 PUC1 8购于大连宝生物工程有限公司 ,表达载体 p MAL- c2 E购于美国纽因伦公司 ;宿主菌 TOP1 0和感受态细胞 BL2 1( DE3)分别购于北京天为时代生物技术公司和美国纽因伦公司 ,大肠杆菌 BL2 1 ( DE3)基因型为 F-,omp T,hsd SB( Rb-,m B-) ,dcm,gal,λ( DE3) ,plys S,Cmr。1 .1 .2 主要试剂 限制...  (本文共3页) 阅读全文>>

《生物化学与生物物理学报》2003年10期
生物化学与生物物理学报

人胰岛素原C肽固相合成的改进

Idoy等[1] 报道人胰岛素原C肽有改善I型糖尿病鼠血管神经病变的功能 ,Johansson等[2 ,3 ] 给予C肽联合胰岛素治疗可使糖尿病人减少尿白蛋白排泄率 ,改善肾功能和自主神经功能障碍。体内外数据显示 ,C肽可能在胰岛素分泌物的调节中起作用。高鑫等[4,5] 研究结果显示 ,人胰岛素原C肽可防止糖尿病鼠所致肾小球细胞外基质积聚导致系膜扩张 ,改善糖尿病肾病变之形态与功能作用 ,这为探索糖尿病慢性并发症的治疗提供了新的途径。糖尿病病人由于并发血管神经病变致残致死 ,目前尚无有效药物。国内外研究显示 ,人胰岛素原C肽具有治疗糖尿病血管神经病变的潜在价值。我们曾报道了用固相法以BOC谷氨酰胺α羧基偶联PAM树脂合成人胰岛素原C肽[6] 。本实验利用谷氨酸γ羧基与MBHA树脂 (4 甲基二苯甲基胺 )偶联作固相逐步合成法制备了人胰岛素原C肽 ;同时也用固相法合成了人胰岛素原C肽类似物即C端延伸一个赖氨酸的人胰岛素原C肽K ...  (本文共4页) 阅读全文>>

《北华大学学报(自然科学版)》2002年05期
北华大学学报(自然科学版)

胰岛素原转化酶基因克隆及序列测定

1 材料和方法1 .1 材  料人胰腺组织 :尸解 ;RNA抽提试剂 :Trizol(GIBICO) ;引物合成 :上海内分泌研究所合成 ;逆转录Kit,克隆载体PGEMT AEASY ,测序Kit:Promega;Gold Taqase :PE公司 ;EcoR Ⅰ内切酶 :华美生物公司 .1 .2 方  法1 )RNA抽提 :胰腺组织取出后 ,迅速用液氮冷冻并制成匀浆 ,然后根据操作说明 ,用Trizol提取总RNA ,溶于 2 0 μLDEPC处理的H2 O中 ,通过1 %甲醛琼脂糖凝胶电泳检测RNA .2 )cDNA第一链合成及PC2基因的扩增 :取总RNA 5 μL ;Oligo(dT) 1 5 :0 .5 μg ;Rnasin :2 0u ;dNTP :1mmol/L ;AMV :1 5u ,总体积 2 0 μL ,混匀后 ,2 5℃ ,1 0min ;42℃ ,1h ;99℃ ,5min .PC2基因的扩增 :根据P...  (本文共2页) 阅读全文>>

《中国实用内科杂志》1981年20期
中国实用内科杂志

胰岛素原的临床应用

胰岛素原(PI)于1982年由美国Lily公司研究所首次应用DNA重组技术在生物合成人胰岛素中,同时合成的人胰岛素原(HPI)经动物试验与临床观察证明有降血糖作用,从而引起关注,在国际研究领域中对PI进行了多项观察。1胰岛素原降糖作用与临床应用PI是由86个氨基酸组成的多肽,在胰岛β细胞核内合成为成熟的mDNA,转运到细胞质成为前胰岛素原,储存于高尔基体继续加工形成86肽胰岛素原,再储存在胰岛β细胞的分泌颗粒中,在转化酶的作用下形成51肽胰岛素和31肽C肽,但仍有2%~6%胰岛素原及其中间产物。由于PI生物半衰期较胰岛素长,外周血中PI及其中间产物可达到总的免疫反应性胰岛素的15%左右,在Ⅱ型糖尿病和胰岛素瘤病理情况下这一比例还会提高,甚至达到50%~60%。1983年以来对PI的降糖作用陆续进行了基础与临床研究,发现其有效血浓度介于普通胰岛素与中效胰岛素之间,但其降低血糖效果按同一浓度比普通胰岛素明确降低。更多的基础研究证明,...  (本文共2页) 阅读全文>>