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日本血吸虫肝门型童虫在体外培养中的生长、发育和产卵

在载体内对血吸虫生殖产卵的研究已有报导“),但深入地研究血吸虫生殖的生理和生化过程,需要应用体外培养技术(“’。迄今人工转变的日本血吸虫和曼氏血吸虫童虫均能在体外培荞到产卵阶段,但产出的虫卵无活性‘3’;成虫在体外培养中生殖器官比童虫更易变性。为了建立适甩于血吸虫生殖生理和抗产卵药物等研究峋体外培养系统,本文观察了载体内18d龄白洲干门型童虫在不同培养基中活动、生长、发育和产卵。 材料与方法 一、培养基 1。兔血清无菌穿ililJ健康家兔心脏,采取血液,制备血清。 2.影细胞(gliost eell)悬液经Earle’s液洗涤的红细胞加3倍体积的。.38%NaCI溶液,混匀后置冰槽中冰浴10min。然后放入3500~4000r/min离心机中离心8一10min。经处理的红细胞即为影细胞,其颜色变浅,体积增大。将影细胞移夕、RP入在卜1640培养基内保存于4℃冰箱中,供2周内使用(‘’5)。 3.合成培养基①841谙养基‘“’;迄...  (本文共5页) 阅读全文>>

《动物学报》1985年03期
动物学报

日本血吸虫尾蚴及童虫的生理学比较

血吸虫尾蝴生活于淡水中,侵人宿主皮肤后则是血清组织液的环境,它必须迅速适应宿主的组织环境才能生存,说明在这一瞬间,虫体发生了极快的生理变化。因此,有关尾坳在钻穿宿主皮肤前后的一些生理特点的研究,不仅有助于了解血吸虫如何发生感染,而且对血吸虫病的预防研究将会提供有益的基本知识和线索。为此,我们比较了尾蝴及新转变为童虫的钻腺内含物的组织化学、体壁的组织化学、对抗血清的反应、对不同介质的效应以及对小鼠的感染力。材料和方法 一、尾黝来源及童虫制备人工感染安徽大陆品系日本血吸虫的湖北钉螺,经光逸出法获得尾物。新转变的童虫系从尾蟠钻穿人工装置离体小鼠皮肤后收集的石或2斗小时童虫。, 二、组织化学反应显示尾拗或童虫钻腺内含呼及体壁的组织化学按作者等(‘98叼报告的方法,将尾拗及童虫的标本在同一染色缸中进行反应,并作对照。「‘,」 三、尾拗套膜反应(匕H幻取人工感染日本血吸虫6周的家兔新鲜血倩,按常规对尾拗及童虫简时比较CHR,另以生理盐水代替...  (本文共6页) 阅读全文>>

《国外医学(寄生虫病分册)》1987年01期
国外医学(寄生虫病分册)

小鼠IgG抗体亚型对日本血吸虫童虫的杀伤作用

作者研究了在补体存在下,日本血吸虫感染的小鼠血清中IgG抗体各亚型对日本血吸虫童虫的体外杀伤作用。 童虫来源:日本株日本血吸虫尾勤经IOR小鼠腹部游离皮片接种了3小时后收集童虫,并用含有青、链霉素的NCTC109液洗5次备用。另取ICR、BALB/。及Co7BL/6小鼠,各感染日本血吸虫尾坳30条之后第4、8、12周取血,制备血清,灭活补体后得免疫血清(IMS),贮于一80℃。同时由正常对照组小鼠以同样方法获正常鼠血清(NMS)。将IMS按Ey等人方法用A蛋白一SePharose柱分部,所得IgG:、IgG:.、I酮,b及I四。再经亲和层析柱纯化,其纯度用免疫扩散法鉴定。将纯化的I郊结合到血吸虫童虫裹面的方法为:96孔板上每孔加50条童虫,再加入占总体积10终的IMS或NMS纯化IgG。室温中放置1小时后洗5次,经异硫氰酸荧光抗体法示踪,在荧光显微镜下可见每种只含有纯化.〔四亚型...  (本文共1页) 阅读全文>>

《国外医学(寄生虫病分册)》1987年02期
国外医学(寄生虫病分册)

在体外人嗜酸粒细胞对埃及血吸虫童虫的抗体依赖的杀伤

抗体依赖的、补体非依赖的杀伤较敏感。作者同意David等(1 980)、0七teseu等(1977)的观点,即嗜酸粒细胞增多症患者的嗜酸粒细胞具有增强蠕虫毒性的作用,这些嗜酸粒细胞中的生化活性增高、I酮的及受体密度增大等均是嗜酸粒细胞数多者其活性增强的原因。结果并支持作者以前的设想,即在对曼氏和埃及血吸虫攻击感染的抵抗力中,嗜酸粒细胞起部分作用。 本文报道在体外人嗜酸粒细胞对埃及血吸虫童虫具有抗体依赖的杀伤作用。 童虫的制备:从感染区儿童尿中获得埃及血吸虫虫卵,孵出毛勤,感染螺蜘,然后使尾蟒自螺体逸出,制备皮肤期童虫。童虫活:护通过甲苯胺蓝在玻片上检测。 嗜酸粒细胞的制备:按Vada”等(1 979)法纯化自愿者外周血中的嗜敌粒细胞,纯度达95终以上。 血清的制备:静脉穿刺或手指取血,一20oC贮存,用前于56oC加热灭活2小时。以与嗜酸粒...  (本文共1页) 阅读全文>>

《国外医学(寄生虫病分册)》1987年02期
国外医学(寄生虫病分册)

用血吸虫童虫进行免疫荧光研究的一种简单方法

当用血吸虫童虫进行免疫荧光试验时,由于童虫较大,在不作切片的情况下,会出现某些困难,主要是童虫固定较难。作者在固定过程中,因采用了明胶液加重铬酸钾的方法而获得了满意的结果。方法如下:将5形重铬酸钾溶液lml加到200ml的0.25形(W/V)明胶溶液中,置水浴加热5~10分钟,直至完全混匀。待冷至室温,然后一滴滴地加于玻片上,于室温干燥。将收集的血吸虫童虫用PBs(0 .15万,pH7 .4)洗涤2次后,以1000转/分速度离心1分钟,弃去上清液。在小试管内将童虫再混悬于2ml PBS及2.sml的0.5那福尔马林的混合液中。置冰浴内15分钟,偶尔振摇。...  (本文共1页) 阅读全文>>

《湖北医学院学报》1987年04期
湖北医学院学报

在体外培养中吡喹酮对日本血吸虫肝门型童虫活动及存活影响的观察

毗咬酮(PZQ)是目前最‘优秀的抗血吸虫药,有关PZQ的药物学、疗效、作用机理、临床应用及毒性反应的国内外文献很多,但迄今尚禾见关于PZQ对体外培养的日本血吸虫童虫作用的报导。本实验旨在用已建立的体外培养系统观察卫ZQ对日本血吸虫肝门型童虫活动及存活的影响,以证实PZQ的杀童虫作用并为抗血吸虫药物研究提供可行的方法。 材料和方法 一、童虫制备及培养: 虫种系人工保种于实验室的日本血吸虫大陆株,用常规方法从钉螺体内逸出复性尾蜘,用改良的Smithers等‘”方法感染18~229体重雄性小白鼠,感染后第10d断颈处死,立即无菌解剖,用含肝素均Earle‘s液经左心灌流,收集肝门型童虫,用改良的林建银等‘“’报导的日血吸虫体外培养方法进行培养,培养基改用RPM卜1640,培养条件加用5%流通COZ。 二、方法: PZQ由湖北省医药工业研究所提供,批号51一01。先将PZQ按zomg/ml比例溶解于无水乙醇中,.再按1:10比例加入无菌...  (本文共6页) 阅读全文>>